辣椒离体细胞多倍体的诱导研究

以辣椒的下胚轴为外植体 ,在MS + 6 BA 2 .0mg/L +IAA 1.0mg/L培养基中诱导出愈伤组织 .用加入秋水仙碱的培养基和液体浸泡两种方法处理愈伤组织 ,进行离体细胞多倍体诱导 .结果表明 :将加入秋水仙碱的培养基法优于液体浸泡法 ,秋水仙碱浓度为 10 0 0mg/L ,处理时间为 4d时 ,其加倍效果最好 ,加倍率达 80 % .染色体数目鉴定表明 :四倍体染色体数目是2n =4x =4 8,而二倍体染色体数目是 2n =2x =2 4 .

乙醇和软脂酸诱导的脂肪肝离体细胞模型

该文以人正常肝细胞株L02为实验材料,采用乙醇和软脂酸等损伤条件建立脂肪肝的离体细胞模型,并以细胞内脂滴数量、甘油三酯含量和γ-谷氨酰转肽酶泄露量等指标,证明该离体细胞模型与实验动物模型的相似性,及其实际应用意义。实验结果表明,分别用含有0.6%酒精、10微克/毫升软脂酸或5微克/毫升软脂酸和0.6%乙醇的1640培养基长期培养肝细胞(6天),可使肝细胞代谢紊乱,产生明显的甘油三酯累积(P<0.01),脂滴数量明显增多,和γ-谷氨酰转肽酶泄漏增加等现象。这些现象与人类及实验动物脂肪肝的表型特征很相符,且用公认去脂药物洛伐他汀,脂必妥处理,可使上述症状明显减轻。

^(60)Coγ射线辐照对麻黄离体细胞生长的影响

用麻黄外植体诱导出愈伤组织 ,并对其进行不同剂量60 Coγ射线辐照处理 ,结果表明 :低剂量辐照对麻黄愈伤组织影响不大 ,而 80Gy辐照改变愈伤组织结构 ,其色泽变浅 ,在悬浮培养条件下细胞增殖量明显增加 ,分裂旺盛期提前。初步分析 80Gy辐照为有效诱变。

粳稻离体细胞的耐冷性变异与遗传

本文根据国内外研究现状与笔者的试验结果,综述了粳稻体细胞耐冷性变异与遗传的研究进展及其在水稻育种上的应用前景。粳稻体细胞在组织培养过程中产生大量的耐冷性遗传变异。对这些变异可利用理化因素进行定向选择。笔者等利用这一技术,已培育出耐冷性极强的体细胞无性系应用于水稻育种。本文还阐明了体细胞耐冷变异的发生规律及其部分遗传特性。

八种昆虫离体细胞系对灭多威农药的敏感性研究

采用MTT法 ,研究了灭多威农药对八种昆虫离体细胞系敏感性的差异。结果显示 ,同一浓度处理下 ,不同细胞系细胞病变的程度不同 ,敏感性差异很大。LC50 值在 10 2 ～ 10 5μg/ml范围内变化 ,其中 ,白纹伊蚊细胞系是最敏感的 。

紫外线辐射坛紫菜离体细胞的初步试验

报道紫外线辐射离体培养的坛紫菜叶状体细胞，对细胞存活率，分裂和发育再生情况进行观察的结果。试验显示，坛紫菜离体细胞对紫外线辐射比较敏感，试验中使用的各种紫外线辐射量对离体细胞都有伤害致死作用，随着辐射量加大，细胞存活率下降。紫外线辐射还具有抑制细胞分裂，诱发与增加再生苗形态变异的作用。根据试验结果，认为紫外线是一种有效的诱变因子，还讨论诱变处理方法及适宜的辐射量。

文昌鱼(Branchiostoma belcheri)离体细胞原代培养初步研究

分别以不同类型的培养液和盐度条件培养文昌鱼尾部、鳃、肝盲囊组织细胞.观察显示经培养文昌鱼三类组织块在贴壁后24 h内细胞开始从组织块内迁移出来,并迅速增殖形成细胞晕,鳃组织细胞为圆球形状,尾部组织细胞为多边形上皮样细胞,肝盲囊组织细胞为圆球形状.其中肝盲囊细胞和鳃组织细胞在含0.45%NaC l、15%小牛血清的Eagle’sMEM培养粉中生长较其他培养条件好,而尾部组织细胞则在含0.9%NaC l、15%小牛血清的Eagle’s MEM培养粉中生长较其他培养条件好.这样的细胞能存活近40天,从而为文昌鱼体外细胞培养及建细胞系提供了依据.

低强度激光对离体细胞效应的若干新进展

本文综述了低强度激光照射对离体细胞效应的研究进展。主要讨论了低强度激光照射对造骨细胞,成纤维细胞,骨骼肌细胞,造血细胞的效应和低强度激光生物刺激作用的机制。

离体细胞的非放射性原位杂交

离体细胞的非放射性原位杂交单惠敏，黄曼影，王悦，周远征，许荣 （中国医学科学院基础医学研究所，北京１００００５）早在１９６９年，人们就开始把分子杂交技术应用到组织切片和细胞标本上￣［１～３］。现在，虽然在探针标记上大致可把原位杂交分为同位素标记和非同...

非酒精性脂肪肝离体细胞模型的建立

随着人们生活水平提高,非酒精性脂肪肝（NAFL）及非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的发病率呈逐年上升趋势[1,2],严重威胁人类健康。目前,对NAFL的研究最常采用的是动物模型,但动物模型存在个体差异大,研究周期长,实验条件不易控制等不利因素。而细胞模型能较好地克服上述因素,有针对性地研究NAFL发病的细胞机制,且能进一步缩短药物干预的进程[3,4]。

Bt Cry1Ac抗性粉纹夜蛾离体细胞与敏感细胞mRNA的差异显示

为了研究昆虫对Bt的抗性机制 ,以苏云金芽孢杆菌Cry1Ac活性毒素对粉纹夜蛾离体细胞连续筛选 80代 ,获得了高抗性细胞。采用DDRT PCR技术比较了该抗性细胞与非选择敏感细胞mRNA的差异 ,经反向RNA斑点印迹杂交确证了 5个片段为两种细胞的显著差异表达序列标签(ESTs)。序列分析结果表明 ,敏感细胞特有的三种ESTs都位于cDNA的非编码区 ,两种ESTs(GenBank注册号 :S1 ,CF32 2 4 1 5 ;S3,CF32 2 4 1 7)与数据库中EST没有显著同源性 ,另一种S2(GenBank注册号 :CF32 2 4 1 6)与已登录的某些昆虫的ESTs具有一定的同源性。从抗性细胞特有的R1 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 3)推导出的氨基酸序列与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶有 60 %～63%的同源性 ,从抗性细胞特有的R2 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 4)推导出的氨基酸序列与黏蛋白类有约 30 %的同源性。这些差异表达基因可能与抗性的形成相关。

粉纹夜蛾离体细胞抗菌肽的诱导和抗菌活性测定

以每细胞1 000 个灭活的大肠杆菌诱导粉纹夜蛾传代细胞,诱导细胞的上清液经三氯醋酸沉淀提取诱导蛋白,抗菌活性用液体培养抑制测定法进行检测.试验证明:细胞诱导后第8 h开始产生抗菌物质,第12 h 达最高峰;提取的抗菌物质经100℃处理4 h,仍然保持抗菌活性.

离体细胞的培养条件

细胞培养是细胞学研究的基本方法之一 .离体细胞在体外培养时对外界条件要求很高 ,培养条件的微小改变会严重影响细胞的正常生长 .在两种哺乳动物细胞培养的基础上 。

一些化学物质对苏云金芽孢杆菌Cry1Ac毒素与昆虫离体细胞相互作用的影响

为探讨苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis(Bt)杀虫晶体蛋白与昆虫细胞的相互作用,以BtCry1Ac毒素和对该毒素敏感的粉纹夜蛾Trichoplusiani离体细胞BTITN5B14为材料,研究了一些化学物质对Cry1Ac毒素与昆虫离体细胞相互作用的影响。结果表明:N-糖基化抑制剂衣霉素、蛋白质合成抑制剂放线菌酮、胞吞作用抑制剂莫能菌素和胰蛋白酶预处理,都能不同程度地提高BTITN5B14细胞对Cry1Ac毒素的敏感性,其中胰蛋白酶预处理的作用最明显;而N-乙酰半乳糖胺不能抑制Cry1Ac毒素对这种离体细胞的毒力。

昆虫离体细胞总膜蛋白的提取及双向电泳分析

探讨适用于双向电泳的昆虫离体细胞总膜蛋白提取技术及适于双向电泳染色的高灵敏度蛋白质银染技术。以粉纹夜蛾细胞系BT1-TN - 5B1- 4为材料 ,比较了传统的Kwa法和Sigma公司的ProteoPropTM MEMBRANEEXTRACTIONKIT提取BT1-TN - 5B1离体细胞总膜蛋白 ,SDS -PAGE及双向电泳结果表明Sigma公司试剂盒提取的总膜蛋白效果较好 ,并且适用于双向电泳分析 ;比较了两种蛋白银染方法 ,确定并优化了一种灵敏度较高适于双向电泳的银染方法 ,得到了理想的膜蛋白 2 -DE图谱。

模拟调强放疗照射离体细胞的质量保证

目的:在模拟调强放疗方式照射细胞的过程中,保证细胞按调强方式被照射,照射剂量准确。方法:在细胞培养瓶中装满细胞培养液,水平固定在标准水箱(30cm×30cm×30cm)电离室横梁上,在水箱中加水到电离室上方5cm,用CT机(philips brilliance bigbor CT)扫描获取图像,传到计划系统(ECLIPSE 7.0)中;再用一个空的培养瓶替换装满培养液的培养瓶,重新用CT机扫描,获取图像,传到计划系统中。采用先设野中野后合并野中野的设计方法,设计模拟调强照射计划,设定电离室处的吸收剂量400cGy。再把此水箱放到加速器(Varian 600-C/D)下,按设计的模拟调强照射计划进行照射,同时用电离室(NE0.6cc)剂量仪(NEFARMER 2570)测量得到实际吸收剂量。结果:在细胞培养瓶中装满细胞培养液时模拟调强照射实测得到397cGy,与理论值相差-0.8%;在细胞培养瓶中不装细胞培养液时模拟调强照射实测得到395cGy,与理论值相差-1.3%。结论:用CT模拟定位,用计划系统通过设野中野的方法设计模拟调强照射计划是可行的,可以实现模拟调强照射离体细胞,理论剂量与实测剂量相差小于2%。

秋水仙碱与EMS处理坛紫菜离体细胞的初步观察

报道用不同浓度秋水仙碱与EMS（甲基磺酸乙酯）处理坛紫菜离体细胞，对处理后细胞的存活率、分裂和发育再生情况进行观察的结果。试验表明，秋水仙碱处理可显著抑制高体细胞分裂，促进再生藻体生长假根、增加有根苗比例，延缓再生藻体发育成熟与衰亡：浓度≥5×10-3时对离体细胞产生显著地致死和致再生藻体畸形作用。EMS处理也有一定的促进离体细胞再生苗生长假根作用，对细胞分裂抑制作用不明显，也未观察到明显的致畸变或致突变作用。较高浓度EMS处理（2×10-3处理2小时或4×10-3处理1小时）引起细胞急性中毒和严重死亡。

蓖麻蚕NPV感染离体细胞的研究

蓖麻蚕核型多角体病毒(NPV)是杆状病毒典型代表之一。建立蓖麻蚕NPV-昆虫细胞系统,对于研究病毒的增殖规律,阐述基因表达与调控等基础理论研究具有重要价值。特别是杆状病毒载体系统已成为杆状病毒分子生物学研究领域的热门课题。国内已开始构建蓖麻蚕NPV表达载体,期望在细胞和活体水平表达外源基因。因此,选择和建立适宜的病毒宿主离体系统。

RAPD技术用于昆虫离体细胞鉴定的初步探讨

探讨利用RAPD技术对昆虫离体培养进行快速鉴定的可能性。实验中所选用的细胞材料是美国棉铃虫 (HeliothisZea)细胞株Hz—AM3 (简称Hz)、粉纹夜蛾 (Trichoplusiani)细胞株BTI—TN5B1- 4 (简称 5B1)、斜纹夜蛾 (Spodopteralitura)卵巢细胞株SL1,利用RAPD技术找出三种细胞的差异条带 。