青钱柳离体胚的培养及快速繁殖

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计对影响其萌发、快速成苗的各种因素进行研究,并进行了诱导增殖试验。结果表明,基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和成苗最关键的因素。离体胚萌发的最佳培养基组合为WPM+GA3(10 mg/L)+蔗糖(30 g/L),萌发率可达100%;适宜成苗的培养基组合是WPM+GA3(5 mg/L)+麦芽糖(30 g/L),培养60 d的无菌苗移栽成活率为100%;最适的增殖培养基为WPM+6BA(0.5 mg/L),平均增殖系数为3.45。

美国黄松离体胚培养条件下不定芽的形成与根产生的研究

以美国黄松成熟胚为外植体在MS、GD、SH和N6 培养基上诱导不定芽 ,试验结果表明 ,基本培养基的种类对外植体不定芽的诱导起主要作用 ,GD最好 ,SH次之 ,MS和N6 最差。GD +0 5mg·L- 1 6 BA ,对外植体不定芽的诱导率达 5 5 % ,平均增殖率为 6 ,最大增殖率达 10 ;NAA不利于外植体不定芽的诱导 ;培养基中加入适量的活性炭有利于不定芽的形成和生长。对不定芽在GD、SH和 1 2SH培养基上进行生根诱导 ,试验结果表明 ,基本培养基的种类对不定芽形成根起主要作用 ,GD、SH不能诱导不定芽生根 ,1 2SH可以使不定芽生根 ,其对不定芽的诱导率为 2 2 % ,1 2SH +NAA 0 5mg·L- 1 对不定芽生根的诱导率为 3 3% ;NAA对不定芽生根具有促进作用。在离体培养条件下 。

离体胚培救技术在百合育种中的应用

离体胚培救技术在植物育种中发挥着极为重要的作用。在百合的育种工作中,胚培救技术的应用是获得远缘杂交后代的关键因素。就国内外关于百合胚培救技术的应用,着重分析了不同杂交组合基因型、不同胚龄败育胚的培养方法、不同培养条件等因素对胚培救效果的影响。

云南红豆杉新采收种子的形态与离体胚的萌发特性

通过云南红豆杉新采收种子形态观察、透水性测定、种子大小以及所带胚乳多少对离体胚萌发率的影响等试验,探讨云南红豆杉种子的休眠与萌发机理。结果表明,云南红豆杉种子呈倒卵形和三棱形;胚酒瓶形,白色;胚乳淡黄色,油质。种子千粒重为72.934g;种皮、种仁和种胚分别占种子鲜重的50.56%、40.45%和8.99%;胚与种子的体积比(E∶S)为0.074。胚的体积为0.156—1.012mm^3,种子为51.658—109.649mm^3,两者呈显著正相关(P<0.05,r=0.810)。完整种子的吸水率明显低于破裂种皮、酸蚀40min和酸蚀20min的种子,但差异随着浸泡时间延长而缩小;种子含水量饱和时,完整种子、破皮种子与酸蚀种子的吸水率无显著差异(前者为23.7%,后两者约28.0%)。不同大小种子离体胚的萌发率差异显著(P<0.05),特大、大、中、小和特小种子的离体胚的萌发率为80%、77.8%、67.5%、62.0%和44.0%。胚乳抑制离体胚的萌发,不带胚乳离体胚的萌发率为41.3%,显著高于带胚乳的萌发率(P<0.05),带部分胚乳的胚为9.7%—13.3%,带全胚乳的胚为0。同时离体胚培养过程中所用种胚的新鲜程度也严重影响胚的萌发率。云南红豆杉种子休眠属于中度生理休眠类型,种子中的抑制物质含量随时间的动态变化和胚乳中抑制物质含量的多少对胚萌发率的影响是以后云南红豆杉休眠研究的重点。

七叶树种子离体胚的超低温保存

通过对七叶树种子离体胚超低温(-196℃)保存后生活力、相对电导率和脱氢酶活性的测定分析,初步研究其长期保存的可行性。结果表明:含水率是影响七叶树种子离体胚超低温保存的重要因素,超低温保存时应对种子进行适度脱水。超低温保存后,七叶树离体胚生活力最高为93%,其处理组合中57.3%含水率+缓速冷冻+快速解冻+10%二甲基亚砜+10%蔗糖+20%聚乙二醇为最佳处理方案。

青钱柳离体胚的组织培养研究

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计方案对影响其萌发和成苗的4种因素进行了研究。结果表明:低温(4℃)层积有利于青钱柳离体胚的萌发,基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和生长的关键因素,低温层积后的离体胚适宜培养基组合为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L、萌发率达97.5%,适宜成苗的培养基组合为改良MS+NAA0.5mg/L、成苗率达93.33%,而6-BA对离体胚成苗则有抑制作用。

无核葡萄胚发育及早期离体培养的研究:Ⅲ.培养方式对离体胚发育的影响

对5个无核葡萄品种的试验表明,不同培养方式对离体胚发育的影响是很明显的,其中4个品种胚发育率液体培养高于固体培养,‘京早晶’在液体培养中胚发育率高达73.7%,是目前国内外胚发育率最高的报道;液体培养比固体培养胚的发育程度高,发育整齐,无畸形胚,易成苗.

离体胚培养途径探索东北刺人参种子的休眠原因

为深入探索东北刺人参(Oplopanaxela tusNakai)种子休眠的原因,在WPM培养基上对经过不同处理的东北刺人参种子胚进行离体萌发试验。结果表明:由于胚乳的存在,即使种胚已经完成了形态后熟,胚仍然不能萌发;种子胚在尚未分化完全时处于休眠状态,在离体条件下不能萌发;当胚完成分化以后,胚本身不是休眠的,在适宜的离体条件下能正常萌发,而且胚发育越接近成熟其萌发力就越强。在一定的范围内,外源激素对离体胚萌发有促进作用。

肉桂离体胚超低温保存研究

对不同含水量肉桂离体胚进行超低温(LN2)保存,采用不同冷冻方式、解冻方式及防冻剂预处理,并测定超低温保存前后的脱氢酶、电导率、α-淀粉酶生理生化指标.结果表明:超低温保存的技术关键是减少保存材料在脱水过程中所受的伤害,以及采用适宜的冷冻和解冻方式和添加适宜的防冻剂.防冻剂预处理可以适当提高保存含水量,增加含水量范围.肉桂离体胚没有添加防冻剂时最适宜保存含水量为30%～40%(w:w),采用快冻快解处理.防冻剂预处理后的保存效果比没有防冻剂预处理的更佳,采用缓冻快解或快冻缓解处理较为适宜.

香草酸对青钱柳离体胚萌发过程中生理生化指标的影响及各指标的相关性分析

采用离体胚培养法,研究了在培养基中添加81.33 mg.L-1(半抑制浓度,IC50)香草酸的条件下,青钱柳〔Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk.〕离体胚萌发过程中部分生理生化指标的变化,并对各指标间的相关性进行了分析。结果表明:随培养时间的延长,处理组(培养基中添加81.33 mg.L-1香草酸)及对照组离体胚的粗脂肪和蛋白质含量均呈逐渐降低的趋势,淀粉和可溶性糖含量均呈先降低后升高的趋势,异柠檬酸裂合酶(ICL)、酸性磷酸酶(AP)、碱性磷酸酶(ALP)和过氧化物酶(POD)活性以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)联合活性均高于培养初期,且ICL、POD、AP和ALP活性不断提高;但处理组的粗脂肪和蛋白质含量均高于对照组且变化幅度相对较小,淀粉含量在培养前期高于对照、在培养后期低于对照,可溶性糖含量总体上高于对照,ICL、AP和ALP活性及G-6-PDH和6-PGDH联合活性的提高幅度整体上小于对照,培养后期POD活性显著高于对照。相关性分析结果表明:青钱柳离体胚萌发过程中粗脂肪和蛋白质含量与各种酶活性间均呈显著或极显著的负相关。研究结果显示:香草酸对青钱柳离体胚萌发过程中各种酶的活化产生抑制作用,导致主要贮藏物质的转化受阻,从而影响胚的萌发。

锥栗种子离体胚超低温保存脱氢酶活性研究

运用超低温 (- 1 96℃ )保存手段 ,通过对锥栗种子离体胚超低温保存后脱氢酶活性的方差分析和 Q检验法多重比较分析 ,对其长期保存的可行性进行研究 ,结果表明 :含水量是影响锥栗种子离体胚超低温保存的重要因素 ,超低温保存应进行适度脱水 .无防冻剂预处理 ,2 0 %含水量 ,缓冻缓解方式条件下 。

超低温保存对苦槠种子和离体胚脱氢酶活性的影响

将苦槠种子、离体胚及离体胚防冻剂处理后用液氮(LN2)进行超低温保存,测定种胚内三苯基甲月s质量浓度,研究其超低温保存效果。结果表明:苦槠离体胚防冻剂处理的三苯基甲月s质量浓度最高,脱氢酶活性最大,其次是离体胚,最小的是种子。3种保存材料的保存效果均受含水量水平显著影响,而当离体胚含水量小于10%时,冷解冻方式对LN2保存效果不明显。对种子而言,12%-15%含水量是适宜的保存含水量,采用缓冻快解,三苯基甲月s质量浓度高,分别是24.93、27.43μg.mL-1;对离体胚而言,10%-15%的含水量是适宜的,但12%含水量水平保存效果最好。添加防冻剂处理后,15%-20%含水量离体胚的三苯基甲月s质量浓度最高,分别达36.98、31.58μg.mL-1;防冻剂在LN2保存过程中起到了明显的保护作用,用10%二甲亚砜处理效果最好。

激素对2种红豆杉离体胚培养的影响

研究了不同浓度的6-BA、GA3、和BR 3种激素对红豆杉离体胚培养的影响,并建立了2种红豆杉的离体胚培养和植株再生系统。结果表明,6-BA对2种红豆杉种胚的萌发促进作用最大,BR次之,GA3最小。南方红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为1.5 mg/L 6-BA+1.7×103ng/L BR+2 mg/L GA3。短叶红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为1.0 mg/L 6-BA+1.7×103ng/L BR+4 mg/L GA3。

马拉巴栗胚胎发育及离体胚再生植株的研究

提 要 对马拉巴栗胚胎发育研究表明 :胚在受精后很长一段时间呈休眠状态 ,以后经原球胚、鱼雷胚到子叶胚 ,胚胎发育呈多胚现象。胚乳形成属核型。离体胚培养再生植株采用花宝 1号 3g/L +椰子乳 5 0ml/L +糖 2 0g/L +琼脂 12g/L。

五针白皮松离体胚培养初步研究

对珍稀濒危植物五针白皮松进行离体胚的组织培养，可以从子叶上诱导产生大量的愈伤组织及不定芽．经初步试验，以Ｍｓ为基本培养基并附加激素ＢＡ３ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ，对诱导子叶产生不定芽最为有效，而Ｍｓ＋ＢＡ１～３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５～０．５ｍｇ／Ｌ可诱导培养的离体胚产生愈伤组织．

“早钟6号”枇杷离体胚的组织培养

本研究以"早钟6号"枇杷的离体胚为外植体,建立了枇杷试管苗的离体再生体系,结果表明:试管苗茎段适宜的诱导培养基为:MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;最适增殖培养基为:MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适宜生根培养基为:1/2 MS+NAA 0.4 mg/L+IBA 0.2 mg/L,本研究为枇杷试管苗的工厂化生产及生物技术等方面的研究奠定了基础。

外源脯氨酸对盐胁迫下大豆离体胚再生植株生长及渗透调节的影响

采用组织培养方法研究了盐胁迫下外源脯氨酸对大豆离体胚再生植株生长状况及生理特性的影响。结果表明，盐胁迫下外源脯氨酸减小大豆再生植株茎粗、增大株高、促进根系生长发育；增加游离脯氨酸及可溶性糖的累积，其中前者含量增加显著；促进Ｋ＋、Ｍｇ２＋的吸收，降低Ｎａ＋、Ｃｌ－的含量；增加含水量、降低渗透势。外源脯氨酸有缓解盐害对大豆再生植株渗透胁迫的效应。

马尾松离体胚组织培养初报

本文首次报道了从马尾松离体胚诱导丛生芽苗的试验结果。试验结果发现丛生芽苗的形成必需有适当浓度比例的BA和NAA,二者缺一不可。离体胚在MS+BA0.5～1.0mg/l+NAA0.2mg/l的培养基中,从子叶上分化出的丛生芽生长状况最佳。离体胚在MS+BA0.6mg+GA0.2mg的培养基中,萌芽率最高,苗的长势最佳。

几种蛋清对小麦离体胚培养成苗的影响

用附加有鸡蛋清、鸭蛋清、鹌鹑蛋清与Ｍｓ组合培养基对离体小麦胚进行培养，观察其对成苗的影响，并与Ｍｓ＋ＺＴ、Ｍｓ＋ＮＡＡ、Ｍｓ＋ＺＴ＋２．４－Ｄ以及纯琼脂１３种不同蛋清组合的培养基对照比较，结果表明：３种蛋清与Ｍｓ组合培养基均能促进小麦离体胚发育成苗，对根的生长发育更有利。

铈对马尾松离体胚DNA、RNA及蛋白质合成的影响

用含 30mgL-1CeCl3的培养液培养马尾松离体胚 ,采用3H T、3H U和3H Leu标记技术测定 .结果表明 ,Ce Cl3明显提高马尾松离体胚在培养过程中对DNA、RNA和蛋白质前体的吸收 ,以及合成这些生物大分子的能力 .CeCl3处理在 15h开始迅速吸收DNA前体和合成DNA ,比CK提前 5h .CeCl3处理在 10h开始迅速吸收RNA前体和合成RNA ,比CK提前 5h .CeCl3处理 5h ,蛋白质合成前体的吸收量和蛋白质合成量明显高于CK .图 6参