响应面法优化麻疯树花粉离体萌发培养基的研究

麻疯树因其种子含油率较高,种子油提炼的生物柴油可部分替代汽油,而成为一种极具潜能的能源作物,但由于产量低,麻疯树在热带、亚热带的发展受到极大限制。杂交育种是提高产量的重要手段,杂交亲本花粉生活力的高低直接影响到育种的成效。因此,寻求麻疯树离体花粉萌发的最适培养基配方,探明花粉萌发培养基中各主要培养基成分间的交互作用对生产上麻疯树杂交结实率和种子产量的提高具有重要意义。该研究以麻疯树开花初期雄花上花药刚散粉时的成熟花粉粒为材料,采用Box-Behnken设计(Box-Behnken design,BBD)的响应面法,对麻疯树花粉离体萌发培养基中各主要培养基成分的浓度配比及各主要培养基成分的交互作用进行了研究。以花粉萌发率为响应指标,建立了4种营养成分(蔗糖、硼酸、硝酸钙、硝酸钾)与花粉萌发率的响应面模型,并对各主要培养基成分的浓度配比进行了优化。通过R软件进行响应面分析的结果表明:4因素对花粉萌发率的影响顺序为蔗糖>硼酸>硝酸钙>硝酸钾;蔗糖与硼酸、蔗糖与硝酸钙、蔗糖与硝酸钾之间的交互作用显著。响应面建模优化后的最佳培养基为13.77%蔗糖+32.14 mg·L^(-1)硼酸+22.21 mg·L^(-1)硝酸钙+19.95 mg·L^(-1)硝酸钾+200 mg·L^(-1)硫酸镁,在此条件下的理论萌发率为99.73%。采用此培养基成分配比得到麻疯树花粉离体试验萌发率为98.97%,与理论响应值相吻合,同时也表明利用BBD设计的响应面模型进行麻疯树花粉离体萌发培养条件优化方法的有效性。

西南桦花粉离体萌发的适宜条件与萌发特征

应用各种浓度蔗糖、蔗糖+硼酸培养基于系列温度下开展西南桦花粉萌发对比试验,研究了蔗糖、硼酸浓度对西南桦花粉离体萌发的影响,筛选出适合西南桦花粉萌发培养基的适宜组分和适宜培养温度,并应用4个单株的花粉对其萌发特征进行了初步研究。结果表明:蔗糖基本培养基上添加硼酸能够显著促进西南桦花粉萌发;西南桦花粉离体萌发的合适培养基为15%蔗糖+200 mg.kg-1硼酸,适宜培养温度为30℃;在此条件下培养3 h后花粉萌发率基本稳定,培养7 h后花粉管长度也趋于稳定。

魔芋花粉离体萌发及花粉管生长的研究

研究了培养基组分和培养温度对魔芋花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明:魔芋花粉萌发和花粉管生长的适宜蔗糖浓度为10%～15%,适宜培养温度为26～28℃,该培养条件下,花魔芋和白魔芋花粉萌发率和花粉管长度分别达26.78%、22.35%和455.18、427.22μm。硼酸、硝酸钙在一定浓度范围内可促进魔芋花粉萌发和花粉管生长,浓度过高时起抑制作用;适宜魔芋花粉萌发和花粉管生长的硼酸、硝酸钙浓度分别为150～200和200～300 mg/L。硝酸钾在一定浓度范围内对魔芋花粉萌发和花粉管生长影响不显著。

柚木花粉离体萌发试验

柚木（Tectona grandis L.f.）是世界名贵的用材树种,天然分布于印度、缅甸、泰国和老挝,具有生长快、用途广、纹理美观和价格昂贵的特点,已在热带、南亚热带地区广为引种,是世界上人工林种植面积最大的4个树种之一,也是单位面积产值最高的一个造林树种。

‘保罗兰’睡莲花粉离体萌发及花粉管生长的研究

【目的】研究不同培养基组分、不同培养时间对‘保罗兰’睡莲花粉萌发和花粉管生长的影响,为睡莲杂交育种提供科学的依据。【方法】采用花粉离体萌发法,用显微镜观察花粉离体萌发情况。【结果】20和40mg/L的硼酸(H3BO3)处理均能促进花粉萌发,适宜浓度的蔗糖和低浓度的Ca^2+处理能显著提高花粉的萌发率;睡莲花粉在培养的4h之内,花粉萌发率上升较快,4~6h萌发率趋于稳定。花粉管生长在前2h生长较快,2~6h生长趋于稳定。【结论】10%蔗糖+20mg/L或40mg/LH3BO3+20mg/L氯化钙(CaCl2)是‘保罗兰’睡莲花粉最适萌发培养基组分,最佳镜检时间为4h。

大叶相思花粉离体萌发适宜条件及活力检测方法

【目的】对大叶相思花粉离体萌发适宜条件以及花粉活力不同检测方法进行研究,为今后进一步开展人工控制授粉、选育优良的马大杂交新品种提供基础。【方法】采回花穗的次日10:00之后,使用毛笔刷法收集大叶相思花粉;通过不同培养温度、不同蔗糖浓度和不同硼酸浓度处理后进行花粉离体萌发,筛选适宜大叶相思花粉离体萌发的条件;采用过氧化物酶法、I_2-KI法以及花粉管离体萌发法对大叶相思花粉进行活力测定,探讨大叶相思花粉有效的活力测定方法。【结果】大叶相思花粉在28℃下培养,其花粉平均萌发率为71.99%,花粉管平均长度为5.3 D(1 D=1倍的花粉粒长度),花粉管平均条数为6.2条,显著高于其他培养温度的处理。当培养基中含有200 g·L^(-1)蔗糖时,大叶相思花粉萌发率为84.96%,其花粉管平均长度为5.8 D,花粉管平均条数为6.2条,显著高于含有其他蔗糖浓度的处理。在含有300 mg·L^(-1)硼酸的培养基中培养大叶相思花粉,其平均萌发率为75.32%,花粉管平均长度可达4.8 D,平均花粉管条数为5.4条,显著高于在其他硼酸浓度下的处理。大叶相思花粉在培养温度30℃、200 g·L^(-1)蔗糖、300 mg·L^(-1)硼酸的培养基中萌发率为98.26%,花粉管长度均可达到10倍复合花粉粒的长度,最多可萌发出10条花粉管,显著高于其他处理。培养3 h的大叶相思花粉,萌发率为65.74%;培养6 h时,其萌发率为90.55%;培养24 h后,其萌发率趋于稳定,达到最高值98.26%。过氧化物酶法检测的花粉活力为99.67%,I_2-KI法检测的花粉活力为99.00%,花粉管离体培养法检测的花粉活力为98.15%,3种方法检测的花粉活力无显著差异。【结论】大叶相思花粉在不同的离体培养处理下,其萌发情况均不相同且差异显著,最佳离体萌发条件为200 g·L^(-1)蔗糖+300 mg·L^(-1)硼酸,培养温度为30℃,萌发率为98.26%。过氧化物酶法、I_2-KI法以及花粉管离体培养法检测的花粉活力无显著差异。研究结果可为今后开展大叶相思的花粉收集、贮藏及活力测定等研究,以及开展人工控制授粉选育优良马大杂种相思新品种等研究提供重要依据。

8个菠萝品种的花粉特性及其离体萌发

研究8个菠萝品种的花粉特性以及离体条件下的花粉萌发。结果表明：不同菠萝品种的花粉大小、花粉数量、花粉活力、花粉离体萌发率和花粉管萌发长度均存在明显差异。金菠萝花粉最大,金钻花粉最小;单个花药花粉量约3-18万粒,蜜宝花粉量最多,苹果花粉量最少。用TTC法测定8个菠萝品种的花粉活力为25.18%-56.84%,其中无刺卡因最高,黄金菠萝最低。在离体培养条件下,不同菠萝品种在9种培养基上的花粉萌发率均值和花粉管长度均值变幅分别为53.31%-76.02%、43.27-518.28μm,其中蜜宝、无刺卡因、甜蜜蜜、金菠萝的花粉萌发率均值和花粉管长度均值较高,珍珠、苹果的花粉萌发率均值和花粉管长度均值较低。配方为1%琼脂＋10%蔗糖＋0.01%硼酸的培养基适于用作菠萝花粉的离体萌发培养基。

大花三色堇和三色堇花粉离体萌发的培养基研究

研究了不同浓度的蔗糖和硼酸对大花三色堇和三色堇花粉离体萌发的影响,及大花三色堇不同自交系间花粉萌发的差异。结果表明:蔗糖对花粉离体萌发有着重要的影响,不同蔗糖浓度下,花粉萌发率有明显差异,蔗糖浓度为30%和35%时,大花三色堇和三色堇花粉离体萌发率分别达到最高;添加适量的硼酸有利于离体花粉的萌发,但不同硼酸浓度下,花粉萌发率差异不大;在同样的蔗糖和硼酸浓度下,不同自交系的大花三色堇的花粉萌发率没有明显差异。

3种丁香花粉离体萌发和贮藏条件研究

以3种中国特产丁香花粉为试材，研究了蔗糖、H3BO3、Ca^2＋和GA3对花粉离体萌发的影响，以及贮藏温度和贮藏时间对花粉活力的影响。结果表明：蔗糖、H3BO3、Ca^2＋和GA3对3种丁香花粉萌发均有显著影响（P〈0．05）。红丁香、华丁香、白丁香最适宜的花粉离体萌发液体培养基分别是：10％蔗糖＋0．01％H3BO3、15％蔗糖＋0．01％H3BO3、15％蔗糖＋0．05％H3BO3。不同浓度的Ca^2＋和GA3对3种丁香花粉萌发的影响有显著差异（P〈0．05），Ca^2＋浓度为50～100mg／L和GA3浓度为50mg／L的处理萌发率最高。3种丁香的花粉活力随着贮藏时间的延长逐渐下降，不同贮藏温度对3种丁香的花粉活力影响有显著差异（P〈0．05），-80℃条件下花粉活力下降的速度最慢，是3种丁香花粉最适宜的贮藏温度。

珙桐花粉离体萌发及花粉管生长研究

[目的]揭示珙桐濒危的原因和机制,为珙桐花粉保存和杂交育种工作及保护提供参考。[方法]运用方差分析、多重比较等方法对珙桐花粉的萌发和花粉管生长进行了研究。[结果]研究得出,培养基内蔗糖、硼酸、琼脂在一定浓度范围内,对花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但超过一定浓度时则起抑制作用;吲哚乙酸对花粉萌发及花粉管生长影响不显著。温度20～25℃时,珙桐花粉萌发和花粉管生长最好;同时,花粉萌发也要求合适的湿度条件,湿度太低花粉萌发率低,湿度太大花粉管易吸水破裂。[结论]珙桐花粉萌发和花粉管的生长因培养基组分和培养条件的的改变而不同,其花粉萌发和花粉管生长不仅需要一个适宜的组分浓度,也需要有一个合适的培养条件。

红锥花粉离体萌发适宜条件及贮藏方法

为给红锥(Castanopsis hystirx)人工授粉和新品种培育提供基础,测定红锥花粉萌发率和花粉管长度,探讨花粉的最佳离体萌发条件和贮藏条件。结果表明,采用100 g/L蔗糖+200 mg/L硼酸培养液,培养温度为25℃,花粉萌发率最高(28.23%),花粉管长度最长(260.45μm);采用-20℃+干燥剂或-80℃+干燥剂贮藏花粉效果较好,贮藏365天,萌发率仍有30.54%和26.43%,花粉管长度为108.61和95.65μm。低温、干燥有利于红锥花粉贮藏。

仙客来花粉离体萌发培养条件的优化

采用正交法,对比了不同温度、pH、蔗糖浓度和硼酸浓度对仙客来花粉离体萌发的影响,发现对仙客来花粉萌发影响最大的因素是温度和pH,其中pH值在7.0的情况下萌发率显著高于pH 6.0和pH 8.0;在温度为25℃时平均萌发率可达85%以上,且培养3 h后花粉萌发率基本处于稳定状态,温度高于25℃花粉萌发受到抑制。根据试验结果,优化了仙客来花粉萌发的培养条件为配制10%蔗糖、0.075%硼酸和1%琼脂的培养基,pH值调至7.0,在25℃下培养3 h。

不同培养条件对凤梨花粉离体萌发的影响

采用正交法，研究对比了不同蔗糖浓度、硼酸浓度、温度和pH值对凤梨花粉离体萌发的影响，筛选出最适合凤梨花粉萌发的培养基配方和条件。结果表明，蔗糖基本培养基上添加硼酸能够显著促进凤梨花粉萌发；凤梨金宝剑和三色星花粉离体萌发的合适培养基为1130～200g，L蔗糖＋75mg／L硼酸，适宜培养温度为25℃，适宜pH值为6～7；几个因素中对花粉萌发影响最大的是温度；在此条件下培养2．5h后花粉萌发率基本稳定，培养7h后花粉管长度也趋于稳定。

日本海棠花粉最佳离体萌发培养基筛选及萌发过程研究

为给观赏海棠杂交育种提供参考依据,采用单因素和正交试验方法,对日本海棠花粉离体萌发培养基进行了筛选,对其花粉活力展开了研究,探讨并观察了观赏海棠花粉离体萌发条件和花粉萌发过程。单因素试验结果表明:当蔗糖、硼酸、硝酸钙的处理浓度分别为10%、0.02%(其萌发率与0.04%浓度处理的无显著差异)、0.02%(其萌发率与0.01%浓度处理的无显著差异)时,日本海棠的平均花粉萌发率及花粉管长度最高值分别达到55.2%与853.11μm、54.4%与595.07μm、37.6%与713.74μm,显著高于同一试验因素下的其余各处理。正交试验结果表明:10%蔗糖+0.02%硼酸+0.04%硝酸钙的组合培养基为日本海棠离体萌发的最适培养基,以此培养基培养的日本海棠其平均花粉萌发率与花粉管长度分别达到70.1%和777.02μm,显著高于除以(10%蔗糖+0.01%硼酸+0.03%硝酸钙)组合培养基处理以外的其他组合培养基处理。在日本海棠花粉离体萌发过程中,培养第1个小时内花粉未萌发,培养2~4 h的花粉萌发率和花粉管生长速率均达到最高值,分别达23.4%/h及259.01μm/h,培养8 h后,其萌发速率趋于平稳,培养12 h后,其花粉管生长速度趋于平稳。研究结果表明,日本海棠离体萌发的最佳培养基为(10%蔗糖+0.02%硼酸+0.04%硝酸钙)组合培养基,以此组合培养基培养2~4 h其花粉萌发率与花粉管生长速率均最高。

风铃木花粉萌发最适培养基及贮藏条件的筛选

【目的】筛选适宜风铃木花粉离体萌发的培养基成分及其质量浓度,并探究花粉的最佳贮藏条件。【方法】以紫花风铃木(Handroanthus impetiginosus)和黄花风铃木(H.chrysantha)的花粉为研究对象,先使用单因素试验初筛花粉离体萌发培养基中蔗糖、H_(3)BO_(3)、CaCl_(2)的适宜质量浓度和培养温度范围,再利用正交试验检验各成分之间的交互作用对花粉萌发的影响,筛选出花粉离体萌发的最适培养基;使用离体萌发法探究干燥处理对贮藏花粉活力的影响,以及干燥与新鲜花粉在不同温度(25(室温),4,-20℃)下贮藏0~30 d花粉活力的变化趋势。【结果】单因素试验结果表明,适宜紫花风铃木花粉萌发的培养基中蔗糖质量浓度为50~150 g/L,H_(3)BO_(3)质量浓度为50~200 mg/L,最适萌发温度为25℃;适宜黄花风铃木花粉萌发的培养基中蔗糖质量浓度为50~200 g/L,H_(3)BO_(3)质量浓度为100~200 mg/L,最适萌发温度为27℃;2种风铃木花粉在不添加CaCl_(2)的培养基中萌发率均显著高于其他处理,表明Ca^(2+)或Cl^(-)对花粉萌发起抑制作用。正交试验中紫花风铃木在蔗糖100 g/L+H_(3)BO_(3)100 mg/L+CaCl_(2)200 mg/L的培养基中萌发率为48.31%,显著高于其他处理,但显著低于单因素试验中同质量浓度蔗糖和H_(3)BO_(3)下CaCl_(2)为0 mg/L的萌发率(75.23%);黄花风铃木在蔗糖150 g/L+H_(3)BO_(3)200 mg/L+CaCl_(2)0 mg/L的培养基中萌发率为62.69%,显著高于其他处理。相同贮藏温度下,干燥处理能减缓花粉活力的下降速度;随着贮藏时间的延长,不同处理下的花粉活力均逐渐降低;新鲜或干燥花粉活力在-20℃贮藏条件下的下降速度均明显低于25和4℃贮藏条件,表明贮藏时间相同时,一定温度范围内贮藏温度越低,越有利于花粉活力的保持。【结论】紫花风铃木花粉离体萌发最适培养基为蔗糖100 g/L+H_(3)BO_(3)100 mg/L,培养温度25℃;而黄花风铃木花粉离体萌发最适培养基为蔗糖150 g/L+H_(3)BO_(3)200 mg/L,培养温度27℃;干燥处理后再进行低温贮藏能更好地保持风铃木花粉活力。

3种槭属植物花粉离体萌发适宜条件及活力检测方法

该文以红花槭、元宝枫、糖槭为试验材料,蕾期采集花粉,通过不同培养温度、不同蔗糖和硼酸质量浓度处理后进行花粉离体萌发,筛选其最佳萌发条件。采用TTC法、I2-IK法、过氧化物酶法、亚甲基蓝法以及离体萌发法对3种槭属植物进行活力测定,探讨其有效的活力测定方法。结果表明:红花槭花粉在培养温度28℃,蔗糖75 g/L+硼酸150 mg/L的培养基中萌发率最高为81.95%;元宝枫花粉在培养温度25℃,蔗糖100 g/L+硼酸250 mg/L的培养基中萌发率最高为66.7%;糖槭花粉在培养温度28℃,蔗糖25 g/L+硼酸350 mg/L的培养基中萌发率最高为88.37%。过氧化物酶法与亚甲基蓝法活力测定效果较好,与离体萌发相比差异显著,其余2种染色剂不适合3种槭属植物花粉染色。

不同浓度硼酸和氯化钙对紫茉莉花粉离体萌发的影响

运用水滴法研究不同浓度硼酸和氯化钙对紫茉莉花粉离体萌发的影响。结果表明:紫茉莉花粉粒在花朵未完全开放时活性最佳,在一定浓度的硼酸和氯化钙对花粉的萌发有较大的促进作用,超过一定浓度时起抑制作用,对未开放紫茉莉花粉离体萌发的最适硼酸浓度为100mg/L,最适氯化钙浓度为1%,其得到高花粉萌发率和最长花粉管生长长度。

淫羊藿花粉萌发及花粉管生长研究

运用方差分析、多重比较和正交实验方法对淫羊藿花粉的萌发和花粉管生长进行了研究.结果表明:培养基内硼酸、硝酸钙、蔗糖在一定浓度范围内,对花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但超过一定浓度时则起抑制作用;镁和钾对花粉萌发及花粉管生长影响不显著.在正交实验中蔗糖和H3BO3对淫羊藿花粉萌发有显著影响,而培养基组分间没有明显的交互作用.淫羊藿最适花粉液体培养基为15%蔗糖+40 mg/L H3BO3+40 mg/LCa(NO3)2·4H2O;在pH值为5.0、25℃和600 lx光照时淫羊藿花粉萌发和花粉管生长最好.

达乌里胡枝子花粉萌发特性研究

为揭示达乌里胡枝子(Lespedeza daurica)花粉的育性并为其花粉活力检测提供一种高效方法,本试验以达乌里胡枝子新鲜花粉为试验材料,采用液体培养基,研究了蔗糖、硼酸、氯化钙浓度、采样时间、温度、光照和培养时间等因素对花粉离体萌发和花粉管生长的影响。试验结果表明:单因素试验中,适宜花粉萌发的培养基配方为20 g·L^(-1)蔗糖+40 mg·L^(-1)硼酸+80 mg·L^(-1)氯化钙,最佳镜检时间为6 h,最适采样时间为中午12:00,最适培养条件为黑暗条件下25℃,最适贮藏温度为—20℃。本试验表明,达乌里胡枝子花粉总体上活力较高,花粉离体液体培养是一种高效、简单、快捷、可靠的检测方法,但在培养条件的选择上应加以优化。

巫山淫羊藿花粉萌发及花粉管生长研究

巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)系小檗科淫羊藿属植物.淫羊藿属植物是现在应用最为广泛,药用来源种类最多的中药之一,受到国内外广泛关注.本文运用方差分析、多重比较和正交实验方法对巫山淫羊藿花粉的萌发和花粉管生长的影响因子进行了研究.结果显示:巫山淫羊藿花粉培养的最适培养基为20%蔗糖+10mg/LH3BO3+20mg/LCa(NO3);在pH值为5.0、20℃和600lx光照时巫山淫羊藿花粉萌发和花粉管生长最好.本结果可为淫羊藿属植物的栽培及育种工作提供参考数据.