适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立

目的建立适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死的动物模型,为评价干细胞移植对急性心肌梗死后的心功能变化提供基础。方法选用Sprague-Dawley(SD)大鼠16只,结扎其左冠状动脉前降支中远1/3处,在结扎前后通过MPA多导生理记录仪连续描记心电图;4周后再次开胸进行Langendorff离体心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查;另选仅开关胸后存活的10只SD大鼠作为对照组。结果造模成功率为62.50%(10/16);心电图动态监测在冠脉结扎后出现ST-T抬高的融合波,30 min后可见病理性Q波;4周后Langendorff离体心脏灌流装置系统检测显示左室收缩压峰值(LVSP)、左室内压等容相最大上升及下降速率(+dp/dtmax,-dp/dtmax)等指标较对照组降低,左室舒张末压峰值(LVEDP)则反之;病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱、坏死心肌被纤维组织取代。结论通过结扎左冠脉前降支的方法,4周后能够形成稳定的适用于Langendorff离体心脏灌流的心肌梗死动物模型,该模型能应用于干细胞移植对心脏功能影响的研究。

Langendorff心脏灌流技术(针对心肌缺血再灌注)的应用和发展

Langendorff离体心脏灌流模型技术具有可重复性强、给药方便和技术要求低等特点,常被用于研究心肌缺血再灌注损伤。该模型排除了其他器官系统、神经系统或体液等影响。本文对该技术的步骤、动物的选择、灌流模式、灌注液的选择、检测的指标、缺血方式以及缺血和灌流时间的选择等方面进行了综述和优缺点的评价。

大鼠心脏体外灌流过程舒缩功能与流量变化

目的 观察大鼠体外心脏灌流 1 5 0 min过程心率、舒缩能力、冠脉流量的变化。 方法 L angendorff法灌流大鼠体外心脏 ,张力、记滴换能器分别采集心脏舒缩力、冠脉流量液滴信号 ,生物机能实验系统检测心率、心肌收缩幅度与最大收缩速度 (dp/dtmax)、心肌舒张力、最大舒张速度 (- dp/dtmax)、冠脉流出液的滴数。 结果 大鼠体外心脏灌流 1 5 0 min过程心肌张力呈下降性变化 ,心率、收缩幅度、最大收缩速度、最大舒张速度、冠脉流量稳定 1 2 0 min,之后呈下降性变化。 结论 大鼠心脏体外灌流时舒缩功能、冠脉流量可稳定 2 h。

高渗盐液灌流对大鼠离体心脏功能的影响

目的 探讨不同浓度高渗盐液对心脏功能的影响。方法 采用大鼠离体灌流模型 ,用不同钠离子浓度的灌流液进行顺性灌注 2 0min ,随后再用等渗灌流液灌注 5min ,连续观察冠状动脉血流量、心率、心输出量 (CO)、动脉压及左心室功能等指标的变化 ,并测心脏含水率。结果 含 16 5mmol LNa+ 的灌流液可明显增加CO、改善心脏的收缩舒张功能 ;而用高于 2 15mmol LNa+ 的灌流液灌流时 ,最初有短暂但十分明显的心脏收缩舒张功能障碍 ,但 5～ 10min后恢复到正常水平以上 ;各组在由高渗灌流液换为等渗时心脏收缩舒张功能都非常显著的增强。结论 高渗盐液能直接作用于心脏 。

乌榄叶水提取物对大鼠离体心脏灌流的作用探究

目的探究乌榄叶水提取物对大鼠离体心脏的冠脉流量、心肌收缩力及心率的影响。方法采用Langendorff离体心脏灌流法,通过MedLab生物信号采集处理系统,观察药物对正常大鼠离体心脏的冠脉流量、心肌收缩力及心率的作用。结果乌榄叶水提取物对大鼠冠脉流量作用效果与丹参的类似,与生理盐水空白组比较差异有统计学意义,具有稳定和增加冠脉流量作用,给药后前6 min表现为加强心肌收缩力作用,而后均逐渐减弱恢复。心率在整个过程中持续下降,且下降速率快。结论乌榄叶水提取物对冠脉流量和心肌收缩力具有先增加后减少至给药前状态的双向作用,并有较快、较强的慢心率作用。结果提示乌榄叶可能有利于降低心脏耗氧量,维持心功能,起保护心肌的作用。

肾上腺髓质素和肾上腺髓质素原N端20肽对大鼠离体灌流心脏功能的影响

目的 :研究肾上腺髓质素原 (proadrenomedullin ,proADM)的不同肽段 ,肾上腺髓质素 (adrenomedullin ,ADM )和肾上腺髓质素原N端 2 0肽 (proadrenomedullinN terminal 2 0 peptide ,PAMP)的心脏效应及可能机制。方法 :Langendorff装置灌流离体大鼠心脏 ,通过心室内的乳胶水囊经换能器连于PowerLab多导生理记录仪 ,观察不同浓度的ADM和PAMP对左心室内压 (leftventricularpressure ,LVP)、左室内压变化速率 (leftventricularpressure(dp/dtmax)、冠状动脉 (冠脉 )流量 (coronaryfluid ,CF)和心率 (heartrate,HR)的影响 ,并检测灌流后心肌组织cAMP含量。结果 :ADM (1 0 -1 1 ～ 1 0 -8mol·L-1 )灌流呈浓度依赖地降低心脏LVP和±dp/dtmax ;PAMP也以浓度依赖的方式降低上述心功能的指标 ,且较相同浓度的ADM作用强。PAMP与ADM依次以不同浓度梯度联合应用 ,较各药单用对上述心功能指标的影响表现为低浓度 (1 0 -1 1 ～ 1 0 -1 0 mol·L-1 )时增强 ,而高浓度 (1 0 -9～ 1 0 -8mol·L-1 )削弱其心功能抑制效应。ADM和PAMP单独或联合应用时 ,冠脉流量均高于对照组水平。灌流液含有NO合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)抑制剂L NAME(Nω nitro L argininemethylester)时 ,ADM、PAMP或ADM联合PAMP灌流 ,其对LVP。

离体豚鼠心脏灌流法在冠心宁注射液生物活性检测中的应用

目的:研究豚鼠离体心脏灌流法在冠心宁注射液生物活性检测中的应用,为完善其质量标准提供参考。方法:采用离体豚鼠心脏灌流技术,对6个厂家27批冠心宁注射液样品进行生物活性检测。结果:冠心宁注射液能显著增加离体豚鼠心脏的冠脉流量。在一定剂量范围内,冠心宁注射液表现出一定的量效关系;在一定剂量下,其对同一只离体心脏的灌流增加量重复性较好,但在不同心脏上重复性较差。结论:此法有望成为冠心宁注射液的有效性质量控制方法。

核磁共振研究羟苯氨酮对离体灌流心脏能量代谢的影响

羟苯氨酮是一种新型强心扩血管剂 ,在以往的研究中发现 ,羟苯氨酮对实验性心衰和心肌缺血再灌注损伤有保护作用 .利用3 1P核磁共振表面线圈技术 ,对羟苯氨酮在Langendorff模型的离体灌流心脏 6 0min缺血 6 0min再灌注中的作用机制进行了探讨 .实验结果显示给药组胞内pH值比对照组恢复得更快 ,但是胞内高能磷酸化合物的含量却低于对照组 .羟苯氨酮对缺血 再灌注损伤的保护作用表现在提高心肌细胞的能量代谢水平 。

人参皂苷Rb1改善自噬流抗离体大鼠心脏心肌缺血再灌注损伤

目的通过Langendorff系统构建离体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤模型,探讨人参皂苷Rb1对心肌I/R损伤的保护作用及机制。方法选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、I/R组和人参皂苷Rb1(1、5、10和20μmol/L)预处理组,每组10只。大鼠开胸、结扎主动脉后,取出心脏置于Langendorff系统进行灌流,按照分组情况构建相应模型。采用Lab Chart电生理系统检测心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左室压上升/下降最大速率(±dp/dtmax)等相关心功能指标;采用TTC染色法检测心肌梗死面积;采用Western blotting检测Beclin 1、LC3、p62和Lamp 2表达情况;采用免疫组织化学法检测Beclin 1表达情况。结果人参皂苷Rb1(1、5、10和20μmol/L)改善由I/R损伤导致的LVDP和±dp/dtmax的下降,减少心肌梗死面积,其中10μmol/L浓度人参皂苷Rb1对心功能保护作用最显著(P<0.05)。Beclin 1在I/R组心肌细胞胞质中阳性表达率显著增高,加入人参皂苷Rb1(10μmol/L)后表达量减少(P<0.05)。与sham组相比,在I/R组发现自噬流受损:自噬相关蛋白Beclin 1、LC3和p62表达水平升高,Lamp 2表达水平下调(P<0.05)。加入人参皂苷Rb1(10μmol/L)后上述蛋白的调控作用被反转,自噬流通畅(P<0.05)。结论人参皂苷Rb1预处理通过改善自噬流受损发挥抗大鼠离体心肌I/R损伤的保护作用,其中以10μmol/L浓度的人参皂苷Rb1保护作用最好。

抗钠-钙交换体α-2_(807-844)抗体对Langendorff灌流大鼠离体心功能的影响

目的观察1～103 nmol/L抗钠-钙交换体(NCX)α-2(807-844)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响。方法化学合成的NCXα-2(807-844)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,采用Langendorff离体心脏灌流系统观察对大鼠离体心功能的影响。结果主动免疫后兔体内抗α-2(807-844)抗血清滴度明显升高,经Protein A纯化后获得浓度为7.21mg/mL的抗体;与对照组比较,1～10nmol/Lα-2抗体可明显增加大鼠离体心脏左室发展压(LVDP)及左室压最大上升速率(+dP/dtmax,P<0.01),且使左室压最大下降速率(-dP/dtmax)减小(P<0.01);然而,102～103 nmol/Lα-2抗体则可不同程度地降低正常大鼠离体心脏LVDP、±dP/dtmax(P<0.01)。结论抗钠-钙交换体α-2(807-844)肽段抗体对离体大鼠心功能的作用与其浓度有关。在低浓度时,α-2抗体可使心肌收缩增强;而较高浓度的α-2抗体可同时抑制心肌收缩和舒张。

对大鼠在体肠单向灌流技术中重量法的评价

目的:评价重量法在大鼠在体肠单向灌流技术中的应用。方法:以长春西汀为模型药物,采用大鼠在体肠单向灌流技术,对重量法和酚红法计算的净水流量值(NWF)、药物吸收速率常数(Ka)和药物表观吸收系数(Papp)进行比较,并对重量法中收集液在密度修正前后的NWF和Papp值进行比较。结果:重量法计算所得的NWF值显著高于酚红法(P<0.05),前者计算所得的Ka和Papp值略高于后者(P>0.05);重量法能显著减少实验误差;对收集液密度进行修正可以进一步提高实验数据的准确性。结论:重量法可以作为大鼠单向灌流在体肠吸收实验中校正灌流液体积的有效方法,它避免了加入“标示物”给实验带来的一系列问题。

丹参素对大鼠离体心脏缺血再灌注心肌能量代谢的影响

SD大鼠随机分为正常灌流组和缺血再灌注组,对大鼠离体心脏进行Langendorff灌流。采用高效液相色谱法测定大鼠心肌组织中辅酶A、乙酰辅酶A及高能磷酸化合物含量,心肌组织中乳酸含量和灌流液中脂肪酸的含量采用试剂盒测定,观察给予丹参素和阳性药雷诺嗪后上述各指标的变化情况。结果表明,雷诺嗪能够增加心肌ATP储备,升高腺苷酸能荷值,降低心肌组织乳酸含量及含脂肪酸组乙酰CoA/CoA比值,抑制脂肪酸的氧化从而优化心肌能量代谢。丹参素可以使大鼠离体心脏ATP含量及腺苷酸能荷值升高,乳酸含量降低,对正常灌流组心肌组织乙酰CoA/CoA比值无明显影响,但可以降低添加脂肪酸的缺血再灌注组心肌组织乙酰CoA/CoA比值,提示丹参素对病理状态下心肌脂肪酸的氧化有一定的抑制作用,从而优化病理状态下的心肌能量代谢,发挥对缺血再灌注心肌的保护作用。

尾加压素Ⅱ对正常及缺血-再灌注离体大鼠心脏的影响

在正常Langendorff灌流与缺血-再灌注(停灌20 min-复灌20 min)离体大鼠心脏模型,观察尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)对冠脉流量、心功能和心肌代谢的影响以及心肌UⅡ受体的功能,以探讨UⅡ的心脏效应。对正常心脏给予0.1、1和10 nmol/L UⅡ各5 min,然后换洗5 min,对停灌缺血-再灌注心脏在再灌注期给予1或10nmol/L UⅡ。监测心率、左室内压和左室内压升降的最大变化率等心功能指标,计算冠脉流量,测定冠脉流出液中总蛋白和肌红蛋白含量以及乳酸脱氢酶(LDH)活性。灌流结束后,测定心肌丙二醛(MDA)含量和质膜UⅡ结合位点(放射性配基结合法)。结果如下:(1)正常心脏灌流UⅡ后,冠脉流量和心功能呈浓度依赖下降,换洗后没有完全恢复。心肌蛋白、肌红蛋白和LDH漏出随UⅡ浓度的增加而增加,换洗后迅速减少。UⅡ组心肌MDA含量与对照组差异无显著性。(2)缺血-再灌注后,冠脉流量显著减少,心功能显著抑制,再灌注期心肌蛋白、肌红蛋白和LDH明显漏出;给予UⅡ后,上述变化增强,且高浓度组更强,与对照组差异有显著性(P<<0.01),再灌注后心肌MDA含量亦显著高于对照(P<0.01)。(3)缺血-再灌注心肌质膜UⅡ受体的B_(max)显著高于正常对照心肌(14.65±1.78vs20.53±1.98 fmol/mg pr,P<0.01),Kd值变化无统计学意义。上述结果表明,在正常?

川芎内酯A预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :观察川芎内酯A预处理对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :采用Langendorff离体心脏恒压灌流方法 ,以 0 .5ml/min的灌流速度、浓度分别为 0 .0 12 5mg/ml、0 .0 2 5mg/ml和 0 .0 5mg/ml的川芎内酯A ,与K H灌流液同时灌流心脏10min ,然后全心停灌 3 0min ,复灌 60min。结果 :川芎内酯A预处理可提高心脏缺血再灌期的冠脉流量和心肌收缩力 ,降低室颤和室速的发生率 ,使心肌匀浆的乳酸脱氢酶、丙二醛含量降低 ,超氧化物歧化酶活性增强。结论 :川芎内酯A预处理对离体心脏缺血再灌注所致损伤可能具有保护作用。

心脏离体灌流装置观察细胞移植对心脏功能的影响

目的观察胚胎心肌细胞移植到大鼠急性心肌梗死区后对大鼠心脏功能的影响及其存活情况。方法100只成年大鼠随机分成2组。移植组开胸结扎大鼠冠状动脉后在梗死区内注射培养的胚胎心肌细胞悬液;对照组结扎冠状动脉后在与移植组相同的部位注射等量的细胞培养液。各组分别在移植后的48h、72h、1周、2周收集心脏标本,HE染色及抗5鄄溴脱氧尿核苷(5鄄BrdU)免疫组化染色。Langendorff心脏离体灌流装置测定移植术后第2周各组大鼠的心脏功能。结果移植组大鼠心脏左室收缩峰压(LVSP)、左室内压最大上升与下降速率(+dp/dtmax,-dp/dtmax)与对照组相比明显升高,差异有非常显著意义(P<0.01),左室舒张期末压(LVEDP)明显降低,与对照组相比差异也有非常显著意义(P<0.01)。在移植组心肌梗死区内可以看到存活的胚胎心肌细胞,对照组未发现。结论胚胎心肌细胞移植能够改善大鼠的心脏功能,并且可以在大鼠的心肌梗死区内存活及分化。

参附注射液对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察参附注射液对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用Langendorff大鼠离体心脏灌流技术制备心脏缺血再灌注损伤模型,用不同浓度氮饱和参附注射液灌流心脏。观察记录复灌20min和40min时的心率,灌流量及酶指标的变化。结果参附注射液可提高心脏缺血再灌期的心率和冠脉流量,明显降低灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的水平。结论参附注射液对缺血再灌注损伤心脏具有保护作用。

门冬氨酸钾镁对离体灌流心脏缺氧的保护作用

目的探讨门冬氨酸钾镁对离体心脏缺氧的保护作用,及2种不同制剂组成方式的门冬氨酸钾镁注射液的效能比较。方法将60只SD大鼠取心脏行Langendorff离体心脏灌流,依照灌流液中钾、镁组成的不同分为A制剂组(门冬氨酸钾+门冬氨酸镁)、B制剂组(天门冬氨酸+氧化镁+氢氧化钾)及对照组(KCl+MgSO4)3组,每组各20只动物,3组的K+、Mg2+等剂量。记录离体大鼠心脏在缺氧条件下的HR、左室压力变化及心脏跳动持续时间。结果A制剂组中离体心脏在缺氧后HR及左室压力降低速度缓慢,心脏跳动持续时间达(273.9±65.2)min,与B制剂组(174.7±43.6)min及对照组(121.8±32.9)min相比明显延长(P<0.01)。结论门冬氨酸钾镁液对离体缺氧心脏有保护作用,明显延长缺氧状态下心脏的跳动时间,但制剂B比制剂A的抗缺氧效能差。

用于核磁共振检测的离体心脏灌流模型

本报告是关于核磁共振研究生理学问题的灌流模型。我们解决了Langendorff灌流装置用于核磁共振研究时存在的问题，如远距离灌流、保温、保氧和灌流液回收等，建立了稳定的可供核磁共振测量用的灌流模型。在这个装置中高体大鼠心脏的节律性活动可维持90min以上。

大鼠在体单向肠灌流模型研究肉桂酸肠道吸收特性

目的研究肉桂酸在大鼠肠道的吸收部位和吸收机制,以及转运蛋白对肉桂酸肠道吸收的影响。方法建立在体单向肠灌流模型,采用HPLC法测定肉桂酸在肠道中的浓度变化,通过吸收速度常数(Ka)和表观吸收系数(Peff)来研究肉桂酸的吸收动力学特征。结果肉桂酸在各个肠段的Ka和Peff结果为十二指肠>空肠>回肠,十二指肠和空肠的Ka和Peff值显著性高于回肠(P<0.05),不同浓度肉桂酸在同一肠段的Ka和Peff值差异无统计学意义,加入MRP2抑制剂(吲哚美辛)后Ka和Peff值差异亦无统计学意义,但加入Pgp抑制剂(盐酸维拉帕米)后其值则显著性增加。结论十二指肠、空肠是肉桂酸吸收的主要部位,吸收机制为被动转运,肠道转运受Pgp转运蛋白的影响,但不受MRP2转运蛋白的影响。