目的建立一种新的用离子交换层析从Cohn组分IV沉淀中分离纯化α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)制剂的工艺。方法以Cohn组分Ⅳ为原料,用12倍体积20mmol/L Tris-HCl缓冲液溶解后,加入2.5%气相二氧化硅搅拌吸附脂蛋白等杂质。抽提...目的建立一种新的用离子交换层析从Cohn组分IV沉淀中分离纯化α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)制剂的工艺。方法以Cohn组分Ⅳ为原料,用12倍体积20mmol/L Tris-HCl缓冲液溶解后,加入2.5%气相二氧化硅搅拌吸附脂蛋白等杂质。抽提液经离心收集上清,再用0.45μm滤膜过滤。将滤液上样于CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析柱,收集未吸附的流穿蛋白液。再将收集的流穿液上样于Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱,上样及平衡液清洗后,用含60mmol NaCl的缓冲液洗涤杂蛋白,再用含100mmol/L NaCl的缓冲液洗脱,收集洗脱液。展开更多
933214快速简易的噬菌体 DNA 分离法[英]/Kernodle,S.P.…//BioTechniques.-1993,14(8).-360~362[译自 DBA,1993,12(9),93-04859]纯化噬菌体 DNA 的新方法是:用分散的噬菌体侵染 Y1088或 LE392,并在室温下保温20分钟;37℃置于 NZ 培养...933214快速简易的噬菌体 DNA 分离法[英]/Kernodle,S.P.…//BioTechniques.-1993,14(8).-360~362[译自 DBA,1993,12(9),93-04859]纯化噬菌体 DNA 的新方法是:用分散的噬菌体侵染 Y1088或 LE392,并在室温下保温20分钟;37℃置于 NZ 培养基中裂解12~16小时;展开更多
文摘目的建立一种新的用离子交换层析从Cohn组分IV沉淀中分离纯化α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)制剂的工艺。方法以Cohn组分Ⅳ为原料,用12倍体积20mmol/L Tris-HCl缓冲液溶解后,加入2.5%气相二氧化硅搅拌吸附脂蛋白等杂质。抽提液经离心收集上清,再用0.45μm滤膜过滤。将滤液上样于CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析柱,收集未吸附的流穿蛋白液。再将收集的流穿液上样于Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱,上样及平衡液清洗后,用含60mmol NaCl的缓冲液洗涤杂蛋白,再用含100mmol/L NaCl的缓冲液洗脱,收集洗脱液。
文摘933214快速简易的噬菌体 DNA 分离法[英]/Kernodle,S.P.…//BioTechniques.-1993,14(8).-360~362[译自 DBA,1993,12(9),93-04859]纯化噬菌体 DNA 的新方法是:用分散的噬菌体侵染 Y1088或 LE392,并在室温下保温20分钟;37℃置于 NZ 培养基中裂解12~16小时;