蛋白质分离与纯化过程中高效离子交换色谱柱的再生探讨

随着我国科学技术的快速发展,生物技术应用水平取得了大幅度的提升,很多生物技术被广泛应用与蛋白质的生产过程中,例如,发酵工程、蛋白质工程以及基因工程等,但是在蛋白质的分离与纯化方面,技术水平发展仍较为缓慢,这在很大程度上制约着蛋白质的工业化建设,致使其所具备的经济效益以及社会效益无法得以全面发展。

固相萃取分离-高效液相色谱法测定陈皮中噻菌灵残留量

试样于磷酸（1＋999）溶液中浸泡2h，超声振荡20min，加水定容为50mL离心3min，分取上层澄清液5．0mL，通过ENVI^TM C18固相萃取柱纯化。用由0．1mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（pH3．0）与乙腈以70比30的体积比组成的混合液（此溶液也用作流动相）作为淋洗液，将被测定物质从固相萃取柱上洗脱，所得淋出液供高效液相色谱（HPLC）测定。HPLC分析中，LC-SCX离子交换柱用作色谱柱，上述的混合溶液作为流动相，荧光检测的激发波长为307nm，发射波长为359nm。噻菌灵的质量浓度在0．5-100．0ug·L^-1范围内与其相应的峰面积值之间呈线性关系，在3个浓度水平上对回收率作了试验，测得回收率在88．0％～95．0％之间，相对标准偏差（n=6）在3．1%～5．0%之间。

柱前衍生与柱后衍生法检测紫芝药材中氨基酸

采用柱前衍生法和柱后衍生法测定紫芝药材中氨基酸成分,分析氨基酸分析仪(离子交换色谱分离-柱后衍生)和高效液相色谱仪(柱前衍生-反相液相色谱分离)在氨基酸测定上存在的异同。结果表明两种方法在测定同一样品时,在丝氨酸、异亮氨酸和脯氨酸等组分检测上的差异显著。

囊尾蚴病猪血清抗体的制备及其相对分子量的测定

用盐析法初步分离囊尾蚴病猪血清中的抗体，用离子交换柱色谱（ＤＥＡＥ－ 纤维素）、凝胶过滤层析（ｓｅｐｈａｄｅｘ）进一步分级分离纯化，并用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ） 分析抗体的组成。应用１０％ 连续凝胶系统、圆盘电泳、考马斯亮蓝染色测定相对分子量。结果表明，囊尾蚴病猪的抗体有２ 条区带，其相对分子量Ｍｒ 分别为８２ｋｕ、５１ ｋｕ。试验初步研究囊尾蚴病猪的抗体的组成，为进一步研究抗猪囊尾蚴抗体的特性以及猪囊尾蚴病的诊断、治疗奠定基础。

鸡蛋壳溶菌酶分离纯化工艺研究

以鲜鸡蛋壳为原料,1.0％NaCl(pH3.0,40℃)提取溶菌酶, 724大孔阳离子树脂色谱纯化,10％(NH_4)_2SO_4洗脱,盐析 结晶。用羧甲基纤维素CM52柱色谱分析,显示产品纯度 较高。

高效液相色谱法检测不同类型消毒剂中度米芬含量的方法研究

目的建立测定不同类型消毒产品中度米芬含量的高效液相色谱方法。方法在Sepax HP-SCX (4. 6×250 mm,5μ,磺化交联的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为填充剂)离子交换树脂色谱柱上,以甲醇+0. 05 mol/L醋酸钠溶液(80:20)为流动相,流量为1. 0 ml/min,柱温为40℃,检测波长为274 nm条件下,测定度米芬含量。结果度米芬的浓度范围为0. 101 8～2. 035 1 mg/ml时,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0. 999 8,n=6),平均回收率为106. 70%,RSD为2. 25%。结论该方法准确简便、通用且专属性强,有助于检测和判断消毒产品中度米芬违规添加问题,能够为填补《消毒技术规范》中消毒剂产品度米芬含量测定方法的空白提供技术支持。

高效液相色谱法测定染毒饲料中麦草畏原药含量

[目的]建立染毒饲料中麦草畏原药的高效液相色谱(HPLC)分析方法,测定其均一性和稳定性。[方法]以乙腈-0.2 mmol/L磷酸二氢钾水溶液(体积比20∶80)为流动相,流速为1.0 m L/min,使用Agilent ZORBAX SAX离子交换色谱柱,紫外检测,波长230 nm,柱温30℃。[结果]低、中、高质量分数的染毒饲料样品平均回收率分别为103.9%、97.5%和93.8%。精密度分别为3.7%、2.6%和4.8%。线性相关系数大于0.999。配制的低、高染毒饲料的准确度分别为93.1%和103.7%。储存8 d后准确度分别为84.7%和87.2%。[结论]该方法简单可靠、分离效果好,精密度和准确度高、线性关系好。染毒饲料配制准确,储存稳定。