应用离子交换纤维素提取外源凝集素的研究

应用ＤＥＡＥ—纤维素从花芸豆和白芸豆中提取外源凝集素（Ｌｅｃｔｉｎ），在平衡ｐＨ６．８的条件下，用酸度梯度洗脱的方法，得到了较好的柱色谱分离效果，用所获得的外源凝集素组分进行淋巴细胞的激活培养试验，其效果十分显著．

聚硫醚型纤维素的合成及其吸附性能

A kind of polythioether cellulose compound(PTEC)was synthesized by etherification of rice husk cellulose with chloromethylthiirane(CMT) in alkaline media. The preparation conditions have been investigated. The PTEC with 4 31% sulfur content was obtained by reacting 12 g rice husk cellulose with 36 mL chloromethylthiirane in 3 mol/L NaOH solution. The product has an adsorption capacity for Ag(Ⅰ) and Hg(Ⅱ) of 24 92 mg/g and 66 80 mg/g, respectively at pH=7 and for Pb(Ⅱ) it is 0 15 mg/g at pH=3. The fiber could be used as a adsorbent for metal ions.

羊Ⅲ型前胶原的分离纯化

目的 :从山羊胎皮提纯羊Ⅲ型前胶原 ,以代替人Ⅲ型前胶原生产免疫试剂。方法 :以山羊胎皮为原料 ,通过 11 2 %硫酸铵及 10 %氯化钠盐析和超速离心 ,DE32和DE5 2阴离子交换纤维素柱层析提取纯化得到羊Ⅲ型前胶原。结果 :测得羊Ⅲ型前胶原分子量为 4 6 8kDa。主要成分甘氨酸、羟脯氨酸和脯氨酸构成比分别为 4 0 4 %、11 7%和 11 1%。与人羊Ⅲ型前胶原的交叉反应为 6 5 89%。结论

桑叶多糖SDS-1和SDT-1的系统分离纯化

对桑叶水提取的粗多糖在离子交换纤维素上的吸附量进行了考察,然后利用离子交换纤维素柱色谱将粗多糖分为4个电荷性质不同的亚组分SD0、SD0.1、SD0.2、SD0.3。通过桑叶粗多糖在离子交换纤维素的吸附解吸行为可知,桑叶多糖主要以酸性多糖的形式存在。其中主要组分SD0.2进一步采用Sephacryl S-200凝胶介质进行纯化,采用苯酚-硫酸法和高效凝胶过滤色谱法同时进行检测,得到均一多糖SDS-1和SDT-1。SDS-1的Mw=8.9×104,Mn=7.5×104,分散度D=1.18;SDT-1的Mw=1.54×104,Mn=1.42×104,D=1.08。

玉米SOD的分离与纯化

探索高速、快速的玉米SOD分离与纯化方法,旨在为玉米SOD的规模化生产提供依据。利用金属螯合亲和层析和DEAE-纤维素离子交换层析相结合的方法分离纯化玉米SOD,得到2种达到电泳纯的SOD组分(A、B),并对它们的基本性质进行了初步分析。SDS-PAGE法测定A、B两组分的亚基分子量分别为20 kD和16.4kD;由电泳后的定位染色情况可知,这2种SOD组分均属于Cu/Zn-SOD;等电聚焦表明,A、B两组分的等电点分别为7.2和6.9。

柱层析法分离纯化菊粉酶的研究

以黑曲霉固体发酵法产生的粗菊粉酶为试材,采用葡聚糖凝胶层析法和DEAE纤维素52柱层析法对经过硫酸铵沉淀后的粗酶进行了分离纯化,得到接近电泳纯的高纯度菊粉酶。结果表明:以菊粉为底物研究酶活时,DEAE-纤维素52离子交换层析得到较好的分离效果,主要活力峰比活力12.64U·mg-1提纯了6.37倍;以蔗糖为底物时,SephadexG100分离效果好,比活力35.57U·mg-1提纯了3.78倍。

毛栓菌木聚糖酶的纯化

[目的]进一步研究毛栓菌木聚糖酶的酶学性质。[方法]对毛栓菌木聚糖酶的粗酶液进行硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析S、ephadexG100柱层析3步纯化,探讨木聚糖酶的产酶曲线及纯化方法。[结果]毛栓菌在最适培养基中培养时,木聚糖酶活力从第2天迅速提升,第8天达高峰,随后下降。经饱和度为30%～70%的硫酸铵分级沉淀后,酶活力回收率为84.931%,蛋白质含量为粗酶液的24.640%,纯化倍数为3.445。经DEAE-纤维素离子交换层析后,酶活力回收率为44.345%,酶蛋白纯化倍数为11.772。经SephadexG100柱层析后,酶活力回收率为20.201%,酶蛋白纯化倍数为16.123。[结论]毛栓菌木聚糖酶的粗酶液经过3步纯化后,酶活力回收率达20.201%,酶蛋白纯化倍数达16.123。

蛋白质的分离纯化

蛋白质的分离纯化是一件细致的工作、有时制备一个纯度较高的蛋白质要付出艰巨而长期的努力.制备工作涉及物理学、化学和生物学等较广的知识,在这个繁杂的过程中需要许多复杂的技术操作.到目前为止,还没有一个单独的或一套现成的方法能够把任何一种蛋白质从复杂的混合蛋白质中提取出来,但是对于任何一种蛋白质都有可能选择一套适当的分离程序以获得高纯度的制品.所以,提纯某种蛋白质时,各种方法都要尝试.实验前要进行充分的调查研究,对自己欲分离提纯的蛋白质有一定的了解,同时要建立相应的分析鉴定方法,以指导分离纯化工作的顺利进行.1