混合型离子交换反相吸附固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定水中23种非甾体抗炎药的残留

非甾体抗炎药(NSAIDs)作为一种新型有机污染物,在环境水体中普遍检出,对生态系统及人体健康造成潜在的威胁,开发准确、可靠的测定水中痕量非甾体抗炎药的检测方法至为重要.本文采用Oasis MCX固相萃取柱对水样进行富集,建立测定水中23种非甾体抗炎药的超高效液相色谱-三重四极杆质谱分析方法.采用酸性条件(pH=4)萃取水样,上样的流速为2 mL·min^(−1),用4 mL甲醇-4 mL5%氨水甲醇进行洗脱,浓缩定容后用ACQUITY UPLCTM BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以2 mmol·L^(−1)乙酸铵+0.05%(V/V)甲酸水溶液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,多反应选择离子监测(MRM)模式进行检测,内标法定量.23种NSAIDs在相关线性范围内线性良好(r=0.9951—0.9992),回收率为80.2%—120%,相对标准偏差为0.4%—12.5%,方法检出限为0.20—4.84 ng·L^(−1).将该方法应用于10份地表水的检测,结果显示有10种NSAIDs检出,质量浓度在ND—83.5 ng·L^(−1)之间.该方法简单、灵敏、高效,可应用于环境水体中NSAIDs的检测.

离子交换色谱-串联质谱法快速测定茶叶中氯酸盐和高氯酸盐

目前,氯酸盐和高氯酸盐作为新型持久性环境污染物受到了广泛关注。茶树在我国有大面积种植,而在受高氯酸盐污染的土壤中,其含有的氯酸盐和高氯酸盐可在茶树中富集,鉴于氯酸盐和高氯酸盐对人体具有的潜在健康风险,因此亟需建立一种茶叶中氯酸盐和高氯酸盐残留量的快速检测方法。本文建立了茶叶中氯酸盐和高氯酸盐残留量的离子交换色谱-串联质谱检测方法。本研究优选Oasis PRiME HLB SPE柱对样品提取液进行净化,使用AceChrom Hybri-A(150 mm×21 mm,50μm)作为离子交换色谱柱,以100 mmol/L乙酸铵-乙腈(40∶60,v/v)作为流动相,在电喷雾负离子和MRM模式下,对目标物实现快速、准确的定性分析,并采用内标法定量。研究结果表明:当氯酸盐与高氯酸盐分别在200~200μg/L和100~100μg/L范围内时,方法的线性关系良好(r2>09990);在低、中、高3个加标水平下,氯酸盐和高氯酸盐平均回收率为8854%~9725%,方法的检出限分别为120μg/kg和80μg/kg,方法的定量限分别为400μg/kg和266μg/kg。该方法简单、快速、灵敏、准确,能够满足大批量茶叶样品中氯酸盐和高氯酸盐的快速筛查与定量分析。

离子交换色谱-紫外检测器法测定马铃薯中马来酰肼的残留量

提出了离子交换色谱-紫外检测器法测定马铃薯中马来酰肼残留量的方法。称取1 g洗净、去皮、搅碎的马铃薯样品,加入10 mL甲醇,超声提取30 min,于60℃水浴加热5 min,离心20 min,取上清液过0.22μm滤膜和反相前处理柱。采用Dionex IonPac AS16分析柱和Dionex IonPac AG16保护柱分离,KOH溶液梯度洗脱,在205 nm波长下进行检测。结果表明:马来酰肼的质量浓度在0.1825~10.14 mg·L^(-1)内与对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.06 mg·L^(-1);按照标准加入法进行回收试验,马来酰肼回收率为97.9%~108%;柱温、流量和紫外检测波长的微小改变,对MH的检测均没有影响;方法用于实际马铃薯样品分析,均未检出马来酰肼。

离子交换色谱-氢化物发生双道原子荧光法同时测定砷和硒形态

建立了离子交换色谱-氢化物发生双道原子荧光联用同时测定4种As形态和3种Se形态的方法,并优化了各种实验参数。采用PRP-X100阴离子交换分析柱可以在10min内同时分离、检测As和Se形态。在8%HCl和1.5%(m/V)KBH4的氢化物反应条件下,进样量100μL,各形态的检出限为:As(Ⅲ)0.2μg/L、DMA0.3μg/L、MMA0.2μg/L、As(Ⅴ)0.3μg/L、SeCys0.6μg/L、Se(Ⅳ)0.5μg/L、SeMet3μg/L。当各As形态浓度为100μg/L、各Se形态浓度为200μg/L,各形态的精密度RSD(n=7)均小于5%。当各As形态浓度范围为5～100μg/L、SeCys和Se(Ⅳ)浓度范围为10～200μg/L、SeMet浓度范围为50～200μg/L时,各形态均可得到良好的线性关系,线性相关系数均大于0.9992。用建立的方法测定了富硒营养品中的As和Se形态,加标回收率在91%～115%之间。

采用高效离子交换色谱分离分析动物肠道菌群方法初探

报道了利用高效离子交换色谱直接分离动物粪便肠道菌群的有关研究结果.人与兔的粪便样品稀释后经离心分离岀细菌,通过DEAE弱阴离子交换色谱(30cm×2cmi.d)进一步除去杂物,将所得细菌的完整细胞样品直接上样高效液相阴离子交换色谱进行分离.色谱柱采用TSKgelSuperQ-TOYOPEARL650C强阴离子交换树脂,平衡缓冲液为0.02mol/L的哌嗪-HCl缓冲液(pH8.0),吸附于色谱柱上的细菌完整细胞用0～1mol/LNaCl线性梯度进行洗脱,洗岀液由260nm紫外吸收与光散射强度检测器检测.人与兔粪便细菌样品分别获得8个与5个组分,经镜检与培养实验确认为细菌,并且光散射仪洗脱峰峰面积同细菌计数结果具有线性相关性.实验表明,高效离子交换色谱能够应用于肠道菌群这样的复杂细菌体系的分离分析.

离子交换色谱测定原油中的单双石油磺酸盐

建立了一种新的离子交换高效液相色谱在线测定原油中单双石油磺酸盐的方法，通过使用六通阀切换，在一根强阴离子交换柱上完成在线纯化和分离。原油样品经过二氯甲烷-甲醇（体积比60：40）溶剂稀释后进入HPLC测定。原油中单石油磺酸盐的检出限为10．0μg/g，双石油磺酸盐的检出限为12．5μg/g。2-萘磺酸钠和萘-1，5-二磺酸钠分别在4.8～120．0mg／L和4．0～100．1mg／L范围内有良好的线性。该方法准确、重复性好，可以满足原油中石油磺酸盐的分离测定。

离子交换色谱法分离青枯菌及其色谱峰的鉴定

采用离子交换色谱法对世界上分布最广、危害最重且最难防治的植物致病菌青枯菌进行了色谱表征。在以0·02mol/L哌嗪-盐酸缓冲液(pH8·0)为流动相、梯度洗脱条件下,青枯菌在SuperQ-650C色谱柱(200mm×4·6mmi·d·)上被分离为3个不同的色谱峰。根据这3个组分的形态和生理生化性质,确定青枯菌原液和分离得到的3个组分都属于青枯菌的生化型Ⅲ型。通过2,3,4-三苯基氯化四氮唑(TTC)平板鉴定两个洗脱峰菌体的致病性及电镜观察二者的运动性,发现第一洗脱峰菌体的致病性弱于第二洗脱峰菌体而运动性强于后者。实验表明,通过离子交换色谱可以把常规微生物方法无法分离的青枯菌的不同状态区分出来。分离结果将为阐明青枯菌的多态性及传代培养过程中致病性逐渐减弱的内在机理,最终研制出特效的青枯菌抗菌剂具有重要意义。

离子交换色谱法测定10种热带水果中的葡萄糖、蔗糖和果糖

建立了高效阴离子交换-脉冲安培检测（High performance anion exchange—pulsed amperometric detection，HPAE—PAD）测定火龙果、莲雾、牛油果等10种热带水果中葡萄糖、蔗糖和果糖的检测方法。热带水果申的多糖经超声萃取后，用METROSEP CARB1（150mm×4．0mm）色谱柱进行分离，以30．0mmol／LNaOH为流动相，等度洗脱，用安培检测器检测，18rain可完成对样品多糖的分离和定量分析。经测定，葡萄糖和蔗糖的检出限分别为0．1209μg／mL和0．2827μg／mL，线性范围为1．0~70．0μg/mL；果糖的检出限为0．5501μg/mL，线性范围为5．0-80．0μg/mL。样品溶液连续5次进样，3种糖的相对标准偏差为0．67％～7．04％，平均回收率为78．70％-117．75％。该方法前处理简单、选择性好、灵敏度高．可用于热带水果中可溶性糖的测定。

对数期金黄色葡萄球菌的离子交换色谱行为及其表征

建立了高效离子交换色谱和激光光散射仪联用的分离 检测系统研究对数期金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的方法。实验采用TSKgelSuperQ TOYOPEARL650C色谱柱,以20mmol/L的哌嗪 盐酸缓冲液(pH6 0)为流动相,倍增系数为21的光散射系统检测,发现对数期的S.aureus表现出两个有规律变化的色谱峰。透射电镜观察显示前峰的S.aureus为圆形,后峰为椭圆形且有一条明显的横隔壁。采用3 (4,5) 双甲基 2 噻唑 (2,5) 苯基溴化四氮唑盐(MTT)试剂测定这两个色谱峰,发现后峰的增殖能力比前峰高65 3%。实验结果表明,前峰为停止分裂的金黄色葡萄球菌、后峰为处于裂殖状态的金黄色葡萄球菌。该方法可作为研究微生物的一种快速而精确的新型分析方法。

离子交换色谱和凝胶过滤分离纯化菜籽抗氧化肽

为获得高纯度并具有高抗氧化活性的肽组分,本文依次采用离子交换色谱和凝胶过滤纯化水酶法提油工艺获得的菜籽粗肽(RP55)。由离子交换色谱分离可得到3个肽组分:RP55-E1、RP55-E2和RP55-E3,总回收率约为62%。和RP55相比,3个组分均色泽变浅,糖和单宁含量显著降低,其中RP55-E2蛋白质含量最高(75.18%),其清除DPPH.的ED50为0.159 mg/mL。通过凝胶过滤进一步分离RP55-E2得到5个肽组分,总回收率约为42%,其中组分RP55-E2-G5蛋白质含量最高(86.26%),清除DPPH.的ED50为0.083 mg/mL,比RP55-E2抗氧化活性有显著提高。

离子交换色谱法测定食醋中有机酸

采用离子交换色谱法分离测定了食醋中有机酸，检测的有机酸有乳酸、乙酸、丙酸、甲酸、丙酮酸、琥珀酸、草酸、柠檬酸，样品加标回收率为81％～110％，变异系数均在5％以内，方法简便、准确、快速。

毛细管离子交换电色谱的分离行为

在离子交换毛细管色谱柱上实施电色谱，并对其分离行为进行了研究。采用７５ μｍ（ｉ．ｄ．）２０ ｃｍ的毛细管强阳离子交换柱（３ μｍ），以 ＮａＨ２ＰＯ４－Ｈ３ＰＯ４缓冲液为淋洗剂，紫外柱上检测（２１４ ｎｍ）。考察了流动相的ｐＨ值、有机改性剂及分离电压等因素对分离的影响。研究表明，不同的ｐＨ，溶质的流出次序发生改变。随着有机改性剂含量增加，溶质的保留时间减小，而电渗流却增大。同时，对分离的柱效和方法的重现性进行了考察。

应用高效离子交换色谱分析青枯菌的致病力分化

应用高效离子交换色谱和激光光散射仪检测器对不同致病力的青枯菌进行分析,建立了一种快速检测青枯菌致病力分化的新方法.青枯菌纯培养物经过高效离子交换色谱分离得到3个致病力不同的特征峰,大小依次为峰3组分>峰2组分>峰1组分.对10株青枯菌进行色谱分析,并结合番茄组培苗感染试验检测其致病力,结果发现,强致病力菌株经过色谱分离只在峰3的保留时间位置出现单一特征峰,在9d内即可引起100%的番茄组培苗发病;若菌株经过色谱分离形成3个特征峰,则峰3所占的面积比越大,该菌株的致病性相对就越强.25株不同致病力青枯菌的验证试验表明了该方法的可行性,番茄组培苗发病率x与峰3面积比y之间呈现出良好的线性关系,回归方程y=0.9581x+5.4984,相关系数r=0.986.通过对青枯菌色谱行为、致病力、细胞表面黏附的EPSⅠ含量三者之间相互关系的进一步研究,发现青枯菌的致病力越强,则细胞表面黏附的EPSⅠ越多,峰3所占的面积比就越大.

离子交换色谱分离海洋胶原肽及其抗氧化活性研究

以工业化生产的海洋鱼皮胶原肽为研究对象,研究了从中分离抗氧化活性肽的方法。分别探索了分子排阻色谱和离子交换色谱直接梯度洗脱以及先等度洗脱,再梯度洗脱3种洗脱方法的分离效果,发现离子交换色谱先等度洗脱,再梯度洗脱分离效果最好,共分成5个洗脱峰。优化出此方法下的最佳洗脱液pH为5.5,最佳上样量为50mg。在优化的分离条件下分离并富集样品,脱盐后测定分离前后抗氧化活性,与原胶原肽相比,3#、4#、5#峰均显示出较强的抗氧化活性,其中3#峰活性最强,提高了10.6倍。这对工业化生产高抗氧化活性肽具有一定参考价值。

离子交换固相萃取高效液相色谱联用法检测食品中的5-羟甲基糠醛

为提高分析方法的准确性,优化建立一种定量检测各类食品中5-羟甲基糠醛含量的高效液相色谱方法。采用离子交换固相萃取柱代替传统的C18固相萃取柱进行前处理,与高效液相色谱联用,提高了方法的回收率和精密度。在0.01～12mg/L质量浓度范围内,5-羟甲基糠醛质量浓度和色谱峰面积线性关系好(R2=0.9998),方法检出限(RSN=3)为3.42μg/L。在0.1、0.5、1mg/kg3种质量浓度添加水平内,5-羟甲基糠醛的添加回收率为85%～103%,RSD为0.31%～3.83%。采用该方法对13种样品进行测定,结果表明该方法能够用于食品中5-羟甲基糠醛含量测定。

离子交换色谱法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白

建立了高效、经济、大规模获得鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的生产方法。在对传统的水稀释法改良的基础上,结合聚乙二醇沉淀与离子交换色谱进行IgY的分离纯化。结果显示,用8倍无菌水稀释蛋黄液,用0.1 mol/L HCl调节pH为5.2,在4℃下静置8 h,于5 000×g力离心可得上清粗IgY液,经测定回收率可达93.47%。然后用6%聚乙二醇沉淀后经DEAE-Toyopearl 650 M离子交换纯化,最佳的纯化条件:0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7)平衡上样,0.075 mol/L PBS(pH 7)洗脱。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果显示所得的IgY的纯度为95.02%,活性保持率高达73.77%。本研究弥补了传统分离方法不能同时达到高纯度和高回收率的缺点,且可用于大规模生产。

超大孔离子交换制备色谱分离纯化高活性凝血因子Ⅷ

建立了一条从人血浆中分离高活性凝血因子Ⅷ(FⅧ)的纯化工艺。基于FⅧ和介质孔径的尺度比及其对蛋白质活性影响的分析,设计了以超大孔离子交换制备色谱为核心步骤的新型分离纯化工艺。分别进行超大孔离子交换色谱与传统离子交换色谱的条件优化,并对优化工艺所得产品进行了活性检测(底物显色法)和纯度检测(高效凝胶过滤和凝胶电泳)。结果表明,超大孔介质结构不但可以有效地保护蛋白质大分子结构,而且能够大幅度地提高制备色谱的传质速率,从而得到具有高凝血活性的FⅧ产品。FⅧ在超大孔制备色谱过程中的回收率(85%)比传统离子交换制备色谱高4～5倍,产品比活高达154 IU/mg。此外,还研究了超大孔介质的再生程序,采用5个柱体积的1 mol/L NaOH低流速清洗色谱柱,保证了色谱工艺的稳定性。本纯化工艺步骤简单,重现性好,易于放大生产。

离子交换色谱法对8种有机酸含量的同时测定

建立了淋洗液自动发生梯度淋洗的离子交换色谱法同时测定果汁中乳酸、乙酸、苹果酸、丙二酸、马来酸、草酸、柠檬酸、异柠檬酸8种有机酸的分析方法。样品经处理后用IonPac AS11-HC分离柱和IonPacAG11-HC型保护柱分离,以EG40自动淋洗液发生器生成的0.8～30 mmol/L KOH为淋洗液梯度洗脱,抑制型电导检测器检测。在优化的梯度条件下,8种有机酸均能基线分离,且待测物浓度与其峰面积在一定范围内呈良好线性。8种有机酸的检出限为10～30μg/L,加标回收率为95%～100%,相对标准偏差RSDs(n=6)小于3.0%。方法用于果汁样品中有机酸含量的检测,平行性好、准确度高,结果满意。并通过建立鲜榨果汁的有机酸指纹图谱,初步鉴定果汁的品质。

同系物季铵盐离子液体阳离子的离子交换色谱法分析

建立了离子交换色谱-直接电导检测法分离测定3种同系物季铵盐离子液体阳离子（四甲基铵、四乙基铵和四丙基铵阳离子）的方法。采用磺酸型阳离子交换色谱柱，以乙二胺-柠檬酸-乙腈为淋洗液，考察了淋洗液种类、浓度及色谱柱温度对3种阳离子保留的影响。并根据测定对象不同，调整乙二胺浓度及乙腈含量以改善分离效果。淋洗液中增加乙腈含量，可明显缩短四丙基铵阳离子的保留时间，并改善其色谱峰形。季铵阳离子同系物的保留符合碳数规律。优化的色谱条件为：流速1.0 mL/min，色谱柱温度40℃；以0.02 mmol/L乙二胺-0.12 mmol/L 柠檬酸（ pH 4.0）为淋洗液分离测定四甲基铵；以0.2 mmol/L乙二胺-0.4 mmol/L 柠檬酸-1％乙腈（ pH 4.0）为淋洗液分离测定四乙基铵和四丙基铵。所测阳离子的检出限（ S/N=3）分别为0.015，0.22，1.88 mg/L，相对标准偏差（n=5）均小于2.3％。将方法应用于表面活性剂和实验室合成的离子液体的分析，加标回收率为99％-104％。本方法简单、准确、可靠，具有良好的实用性。

离子交换色谱-电感耦合等离子体质谱法测定高纯钛中痕量杂质元素

建立了离子交换色谱-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定高纯钛中Mg、Cr、Fe、V、Mn、Co、Ni、Cu、Zn、Sr、Cd、Ba、Tl、Pb等痕量杂质元素分析方法,并对ICP-MS工作参数及条件进行了优化和选择。高纯钛用HF和HNO3溶解后进入离子色谱的阳离子交换柱,经HF(3+97)淋洗后,用HNO3洗脱,洗脱下来的溶液进入电感耦合等离子体质谱检测。方法的检出限在0.00099～0.85μg/L之间,测定下限为0.0033～2.8μg/L,各元素的回收率在90%～110%之间。利用本方法对纯度>99.99%高纯钛样品的杂质元素进行分析,结果表明,其精密度和准确度均满足痕量分析的要求。