HPLC手性离子对试剂法拆分普萘洛尔对映体

建立了一种以Nova PakCN HP氰基柱为固定相,以V(二氯甲烷)∶V(乙醇)=97∶3为流动相,添加N 苄氧羰基 S 苯基 L 半胱胺酸甲酯(MBPCE)为手性离子对试剂,拆分普萘洛尔对映体的高效液相色谱的分析方法。当c(MBPCE)=3.5mmol/L,流动相流速为0.5ml/min,检测波长为254nm时,普萘洛尔对映体的分离选择性为1.15,分离度为1.02,线性范围为0.1～4.0mg/ml,浓度测定的变异系数为0.21%～0.86%。

离子对试剂及其在多肽及蛋白质分离分析中的应用

离子对试剂是实现反相离子对色谱(Reversed-phase Ion-pair Chromatogra-phy,RPIC)快速灵敏和高分辨的关键因素。离子对试剂的正确选择和适当的添加,对多肽及蛋白质的分离分析有着显著影响。本文介绍了RPIC的基本原理及其在蛋白多肽分析中的应用前景,并详细阐述了常用离子对试剂的种类、特点及应用。

两性化合物与离子对试剂的混合物作流动相的流动相离子色谱法测定气溶胶中水溶性阴离子

用流动相离子色谱法 (MPIC) ,以两性化合物与离子对试剂的混合溶液为流动相 ,在C18柱上抑制电导检测分析气溶胶中常规无机阴离子和有机酸。实验采用氢氧化四丁基铵 (TBAOH)为离子对试剂 ,与两性化合物 3 (N 吗啉 ) 1 丙磺酸 (MOPS)混合 ,加入Na2 CO3 无机添加剂作流动相 ,其浓度为 1mmol/LTBAOH/ 5mmol/LMOPS/ 0 .5mmol/LNa2 CO3 。分离柱采用硅质C18柱 ,抑制电导检测。可以较好地分离和检测常见的无机和有机阴离子。该方法具有较好的重现性和线性关系 ,F-、Cl-、NO-2 、Br-、C3 H3 O-3 、NO-3 的回收率分别为10 2 .0 %、10 4 .6 %、10 2 .4 %、97.8%、97.75 %和 10 2 .5 % ;检出限分别为 0 .0 17、0 .0 14、0 .0 0 4 8、0 0 36、0 .16和 0 .0 17mg/L。

混合离子对试剂体系下寡核苷酸的IP-RPLC保留行为

利用离子对反相液相色谱(IP-RPLC)对寡核苷酸在混合离子对试剂三乙胺/丙胺-乙酸盐(TEA/PAAA)体系下的保留行为进行了研究,并与经典离子对试剂三乙胺乙酸盐(TEAA)体系下的保留行为进行了对比.实验结果表明,相同离子对试剂浓度下,寡核苷酸在TEA/PA-AA体系下的保留均弱于TEAA体系下的保留,且寡核苷酸的保留均随着离子对试剂浓度(20~120 mmol/L)的增加而增强.同型寡核苷酸(dC)_n作为特例,当n>10时,保留基本趋于稳定,这是由于(dC)_n随着离子对试剂浓度的增加保留增长较快,在较低的离子对试剂浓度下即可达到最大保留.同时发现,短链同型寡核苷酸(dT)_n和异型寡核苷酸在TEA/PA-AA体系下的分离均优于TEAA体系,而同型寡核苷酸(dA)_n和(dC)_n的分离则在TEAA体系下更优.通过研究流动相中离子对试剂总浓度c_p与寡核苷酸保留因子k之间的关系,推断出2种体系下寡核苷酸的保留机理均以离子对模型占主导地位.总体而言,分离相同长度的异型寡核苷酸时,TEA/PA-AA混合离子对体系尤其在中等离子对浓度下比TEAA体系具有明显优势,低的离子对试剂浓度可增加与后续电喷雾质谱(ESIMS)的兼容性,有利于寡核苷酸的定性分析.

离子对试剂对离子对色谱-间接紫外检测分析哌啶离子液体阳离子的影响

本文研究了不同的离子对试剂对离子对色谱-间接紫外检测测定哌啶离子液体阳离子的影响,探讨了保留和检测规律。研究的离子对试剂有戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠和癸烷磺酸钠。结果表明,离子对试剂的烷基链越长,哌啶阳离子的保留时间越长,检出限总体趋势提高;流动相中有机溶剂甲醇含量增加,哌啶阳离子的保留时间缩短,检出限降低。哌啶阳离子的保留机理主要是动态离子交换机理。用庚烷磺酸钠和辛烷磺酸钠作为离子对试剂可使哌啶离子液体阳离子获得较好的分离分析。

双离子对试剂在高效液相色谱法测定盐酸普萘洛尔中的作用

目的考察中国药典2015年版盐酸普萘洛尔有关物质检查方法中双离子对试剂对于色谱行为的影响。方法分别调整流动相中十二烷基硫酸钠和四丁基磷酸二氢铵的浓度,更换不同品牌的色谱柱,检查色谱峰保留时间和拖尾因子的变化。结果容量因子的自然对数值与十二烷基硫酸钠摩尔浓度的自然对数值存在近似线性关系;流动相中四丁基磷酸二氢铵浓度增大,拖尾因子降低;不同色谱柱对于相同流动相的反应不同。结论流动相中十二烷基硫酸钠增加盐酸普萘洛尔保留能力,四丁基磷酸二氢胺能起到类似"封端"作用。

缓冲盐类型和离子对试剂非对离子对强离解酸性化合物离子对反相液相色谱保留行为的影响

在离子对反相液相色谱(IP-RPLC)分析中,溶质保留受对离子(counter ion)的影响比较受人关注,但鲜有研究流动相中缓冲盐类型和离子对试剂中非对离子(non-counter ion)对溶质保留行为的影响。鉴于此,该文以14种磺酸化合物为研究对象,甲醇为有机调节剂,分别考察了3种缓冲盐体系(磷酸二氢铵、氯化铵和乙酸铵)和5种离子对试剂体系(四丁基溴化铵、四丁基磷酸二氢铵、四丁基硫酸氢铵、四丁基硝酸铵和四丁基乙酸铵)下强离解酸性化合物的IP-RPLC保留行为,通过比较不同流动相条件下得到的溶质log kw(100%水相作流动相时的保留因子)、S(线型溶剂强度模型线性回归得到的常数),以及CHI(色谱疏水指数,log kw/S),寻找保留行为规律。研究表明,流动相中的缓冲盐类型和离子对试剂非对离子均会影响化合物的log kw和S值,所有化合物在氯化铵缓冲盐体系下具有最大的log kw值。相对于无机阴离子,离子对试剂中弱离解性有机阴离子(乙酸根)的存在有利于增加磺酸化合物的S值。通过对比不同条件下的保留行为,推测磺酸化合物的IP-RPLC保留机理中同时存在着离子对模型和动态离子交换模型。与log kw和S值不同,化合物的CHI值受缓冲盐类型以及离子对试剂非对离子的影响较弱。此外,研究发现化合物的表观正辛醇/水分配系数(log D)与log kw、S、CHI之间均具有良好的线性相关性。不同缓冲溶液和不同离子对试剂非对离子条件下获得的log kw和S值存在着一定的差异,而CHI值相对稳定,因此,CHI更适用于IP-RPLC中定量结构-保留行为关系模型的建立。

离子对试剂在草铵膦高效液相色谱分析方法中的应用

采用高效液相色谱法,以离子对缓冲盐+乙腈溶液为流动相,使用Ultimate AQ-C18色谱柱和二极管阵列检测器,在195nm波长下对草铵膦进行定量分析。结果表明,该分析方法线性相关系数为0.9998,标准偏差为0.0195,变异系数为0.0201%,平均回收率为100.11%。

烷基磺酸钠类离子对试剂对槟榔中生物碱保留行为的影响研究

目的:探讨可用于指导以离子对试剂为流动相添加剂时优化槟榔中生物碱类成分色谱分离效果的数学模型,并探讨离子对试剂作为添加剂时,生物碱的色谱分离机理。方法:利用离子对试剂作添加剂,高效液相法分离槟榔中系列生物碱,并根据2个经典的保留模型:溶质计量置换保留模型(SDM-R)和Snyder经验式,考察离子对试剂浓度,烷基链长度和流动相中有机溶剂体积分数对生物碱保留行为的影响,通过改变模型参数的实验结果探讨模型的适用性及生物碱的色谱保留机理。结果:当离子对试剂作流动相添加剂时,在一定浓度范围内,离子对试剂浓度与待测成分保留值符合SDM-R模型的线性关系;且有机相的体积分数与待测成分保留值符合Snyder经验式的线性关系。结论:SDM-R模型与Snyder经验式可在一定限度内为以离子对试剂为添加剂对槟榔中生物碱进行的液相分离提供指导,且以离子对试剂作流动相添加剂时,生物碱的分离保留过程兼具离子交换作用和离子对作用。该两模型的应用对以生物碱为主要活性成分的中药的液相色谱质量控制方法具有借鉴意义。

采用离子对试剂同时测定啤酒中异α-酸和还原异α-酸

建立了使用离子对试剂同时检测啤酒中异α-酸、二氢异α-酸、四氢异α-酸和六氢异α-酸的反相高效液相色谱法。实验采用四丁基氢氧化铵-磷酸缓冲液(pH调至7.2)-乙腈为流动相,Xterra RP C18(4.6×150 mm,5μm)色谱柱,等度洗脱,实现这4种异构化α-酸的所有组分的有效分离测定。各组分色谱峰保留时间的RSD为0.1%～0.3%,峰面积的RSD为0.5%～1.7%(n=7),重现性和线性关系较好;4种异构化α-酸的加标回收率为96%～108%。该方法无需样品处理,简便易行,可用于分析啤酒中所含异构化α-酸的种类和含量。

整体柱离子对色谱对铬(Ⅵ)的快速测定

研究了基于硅胶整体柱的离子对色谱快速测定Cr(Ⅵ)的方法,讨论了淋洗液浓度、乙腈浓度、流速、温度和pH等因素对分离的影响。用1.0 mmol/L四丁基氢氧化铵-0.8 mmol/L邻苯二甲酸(pH6.0)作为淋洗液,流速6.0 mL/min,可以在1 min内快速分离测定Cl-、NO3-、Cr(Ⅵ)、SO42-离子。Cr(Ⅵ)的检出限为1.02 mg/L,保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)(n=5)分别为0.2%和0.3%。将方法应用于测定地下水中的Cr(Ⅵ),回收率为104%。

反相离子对色谱法测定脱氧精胍菌素药物中的主成分

建立了反相离子对色谱法分离测定脱氧精胍菌素药物中主成分的方法。分别考察了色谱柱类型、离子对试剂种类及浓度、缓冲盐浓度和流动相pH值等参数对实验结果的影响。确定了分离脱氧精胍菌素的最佳条件:C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以5 mmol/L磷酸氢二钾水溶液(含5 mmol/L戊烷磺酸钠,pH 3.6±0.3)-乙腈(90∶10,v/v)为流动相,流速为1.0 mL/min;检测波长为210 nm;柱温为30℃;进样量为20μL。该方法实现了对脱氧精胍菌素的良好分离,且线性关系良好,检出限可达0.5 mg/L。

离子对反相高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠的含量

以四丁基溴化铵为离子对试剂，采用离子对反相高校液相色谱法，配以示差折光检测器（RI）检测，建立了用于阿仑膦酸钠含量测定的分析方法。以Agilent CLC-ODS C18柱为固定相，流动相为V（甲醇）：V（水）=10：90，含5mmol／LNH4H2P04，2mmol／L四丁基溴化铵，1．5mmol／L乙二胺四乙酸二钠，用NaOH调节pH至7．2），流速为1．0mL／min，柱温为室温。方法的线性范围为80～720mg／L；回归方程为A=0．3971ρ-10．624，r=0．9993；方法的平均回收率为100．0％：RSD为0．76％．在该色谱条件下,得到阿仑膦酸钠主峰。

整体柱离子相互作用色谱快速分析无机阴离子

研究了用硅胶整体柱和直接电导检测的离子相互作用色谱快速分析常见无机阴离子的方法。实验采用氢氧化四丁铵和邻苯二甲酸为淋洗液，讨论了包括淋洗液浓度、流速和PH对分离的影响。当以1．5mmol／L氢氧化四丁铵和1．1mmol／L邻苯二甲酸为淋洗液（PH5．5），流速6mL／min时，可以在1min内分离Cl^-、NO2^-、Br^-、NO3^-、ClO3^-、SO4^2-和I^-7种阴离子。方法的检出限为0．3～1．9mg／L，峰面积、峰高的相对标准偏差（RSD，n=5）分别为0．400～2．29／6和0．1％～1．59／6。将该法用于测定矿泉水和地下水中的阴离子，加标回收率在97．9％～100．39／6之间。

整体柱离子对色谱快速分析高氯酸盐

研究了用硅胶整体柱和直接电导检测的离子对色谱快速分析高氯酸盐的方法。实验采用Chromolith Speed ROD RP-18e色谱柱，以氢氧化四丁铵（离子对试剂）＋邻苯二甲酸＋乙腈（有机改进剂）为淋洗液，讨论了离子对试剂浓度、有机改进剂浓度、pH、色谱柱温度和流速对ClO4^-保留时间的影响。确定最佳色谱条件为：0．25mmol／L氢氧化四丁铵＋0．18mmol／L邻苯二甲酸＋7％乙腈（pH5．5）作为淋洗液，柱温30℃，流速6．0mL／min。在此条件下，ClO4^-的保留时间在1min之内。其它常见阴离子（Cl^-、NO3^-、SO4^2-和I^-）不干扰测定。方法的检出限为1．56mg／L；工作曲线的线性范围是2．4～100mg／L；峰面积的相对标准偏差（RSD，n=5）为1．9％。将本方法应用于测定加标果汁和加标地下水中的ClO4^-，加标回收率分别为98．2％和97．6％。

反相离子对液相色谱法同时测定11种氟喹诺酮类药物的研究

建立了高效液相色谱-荧光法同时测定11种氟喹诺酮类药物的分析方法。主要研究了流动相、流动相配比及流动相的pH对氟喹诺酮分离的影响。确定了液相色谱分析最佳条件。分离条件为：Xbridge Shield RP C18柱,以V（0.10%三氟乙酸）∶V（乙腈）∶V（甲醇）=89∶4∶7为流动相;检测波长为λex=280 nm和λem=450 nm。方法检出限为：诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星和恩诺沙星0.007μg/mL,单诺沙星0.002μg/mL,沙拉沙星和氧氟沙星为0.04μg/mL,二氟沙星和奥比沙星为0.02μg/mL,依诺沙星、麻保沙星为0.4μg/mL,各组分回收率在97%-100.2%,相对标准偏差为0.2%-2.9%。

离子对色谱法分离氨基酸的研究

利用氨基酸具有两性的基本性质,采用离子对高效液相色谱法,选用两种离子对试剂九氟戊酸(NFPA)和十五氟辛酸(PDFOA),用蒸发光散射检测法对氨基酸进行分离检测.结果表明,本文中建立的以PDFOA为离子对试剂的分离方法能有效分离11种氨基酸.

在线离子对固相萃取预富集系统分析水样中的烷基苯磺酸盐

采用在线离子对固相萃取法富集测定生活废水中阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠.电动分析系统由1个电渗泵和5个电磁切换阀组成,计算机控制泵运作和阀切换.在萃取柱和检测器之间用改进的气液分离器除去洗脱液中气泡.实验对离子对试剂和固相萃取条件进行了优化.结果表明,在样品溶液中加入0.5 mmol/L四丁基溴化铵、采样体积15 mL、用0.80 mL/min萃取保留,2.0 mL/min吸入80 %乙腈洗脱液15 s,再以1.65 mL/min洗脱时,结果最佳.方法检出限为10 μg/L,线性范围0.030～1.00 mg/L,富集倍数65,相对标准偏差3.7 %,回收率90.6%～98.0%.

反相离子对色谱法对寡核苷酸药物分析的进展

寡核苷酸药物是近年来药物研发领域中的热点之一,相应分析方法的研究也被广泛开展,其中反相离子对色谱法以分离度高、易与MS对接等优势成为寡核苷酸分析中最常用的方法。本文综述了反相离子对色谱法在寡核苷酸分析方面的新进展,以下将从色谱柱、流动相,分离规律的探索,MS检测器方面进行系统介绍。