离子色谱-安培检测器测定食品中的碘

添加氢氧化钾和硫代硫酸钠溶液于食品样品中,减压干燥后,采用灰化法处理,样液通过离子色谱进行分离,安培检测器检测食品中的碘。该方法优化了前处理条件,检出限为5μg/kg,样品测定的精密度在1.26%～4.54%,加标回收率为85.9%～112.3%。采用所建立的方法分析国家标准物质圆白菜(GBW10014)、菠菜(GBW10015)、奶粉(GBW10017)、鸡肉(GBW10018),测定值与标准值吻合。

离子色谱-安培检测法检测饮用水中碘化物

目前对于水中碘化物所采用的检测方法存在一些不足,而采用离子色谱-安培检测法可以更加简单、快速、准确的测定饮用水中的微量碘化物。

高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定吸附无细胞百(三组分)白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗的多糖含量

目的 采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定吸附无细胞百(三组分)白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗(以下简称DTac P-s IPV-Hib)中多糖含量,并对方法进行验证。方法 在1 ml样品中加入0.02 g柠檬酸钠,振荡混匀后,置于37℃保温24 h,4000×g离心5 min收集上清液,稀释后加入6 mol/L盐酸,100℃下加热2 h,冰浴10 min后加入0.8 ml氢氧化钠(1 mol/L)溶液用于终止酸水解。采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法根据检测信号峰面积计算对应水解荚膜多糖(PRP)含量,通过PRP占多糖含量干重的41.3%计算出总的多糖含量。结果 核糖醇参考品浓度在0.1~1.5μg/ml范围内标准曲线r2>0.99,检测下限可达10ng/ml。核糖醇加标回收率均在95%~105%;对高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法检测多糖的重复性和中间精密度进行验证,相对标准偏差(RSD)均小于5%,方法专属性和耐用性良好。结论 使用柠檬酸钠作为解吸附剂,与高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法相结合可用于DTac P-s IPV-Hib中Hib多糖的含量检测,为产品的质量控制和稳定性研究提供参考。

无糖和低糖食品中的糖和糖醇同时分析的阴离子交换色谱-脉冲安培检测法研究

建立并优化了高效、简便的阴离子交换色谱-脉冲安培检测器同时分析无糖食品中的糖和糖醇的方法,并且通过样品加标回收(回收率为88%～106%)以及与其他同系列色谱柱的互补、对照实验完善了该方法并验证其准确性和可靠性。该方法共检出了14个样品中的丙二醇、肌醇、甘油、D,L-木糖醇、D-山梨醇、D-甘露醇、半乳糖醇、D-葡萄糖、D-果糖、蔗糖和麦芽糖,其分析的线性范围为0.2×10-6～40×10-6,线性相关系数为99.8%～99.9%。

阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法测定寿胎丸中游离氨基酸

建立了阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法测定寿胎丸煎煮液中游离氨基酸的分析方法。实验考察了18种氨基酸的梯度洗脱条件，优化了固相萃取条件，最终选用SSDBX型固相萃取小柱净化煎煮液。在优化实验条件下，进行了加标回收实验，回收率在71．2％～120．9％之间，相对标准偏差为0．8％～10．4％。18种氨基酸的检测限为0．07～5．00μg／L。方法能满足寿胎丸煎煮液中氨基酸的检测要求。

高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法用于重组人促红素中唾液酸的含量测定

目的建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)测定重组人促红素(rhEPO)中唾液酸含量的方法。方法将rhEPO样品用5 mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH 7.0)换液后,调整浓度到0.33 mg/mL,取20μL样品溶液加入10 m U/μL的神经氨酸酶20μL,37℃孵育1 h后,加入0.04 mmol/L的尤罗索尼克酸(KDN)内标物50μL,再加入70μL超纯水,混匀后分析测定。采用CarboPac PA1分析柱,Carbo Pac PA100保护柱,流动相为150 mmol/L氢氧化钠与125 mmol/L乙酸钠混合溶液,柱温30℃,流速1.0 mL/min,等度洗脱,数据采集时间15 min。根据唾液酸峰面积与KDN内标峰面积的比值与含量的量效关系,计算样品中的唾液酸含量。结果唾液酸标准品浓度在0.0015～0.0075μg/mL范围内与唾液酸峰面积与KDN内标峰面积的比值呈良好的线性关系,R2>0.99;重复性RSD<4%;(低、中、高浓度)样品回收率分别为94.9%、94.3%、96.7%。用建立的HPAEC-PAD法测定了6批rhEPO中唾液酸含量,与间苯二酚测定法测定结果比较差异无统计学意义(P=0.7488)。结论本研究建立了rhEPO中唾液酸含量测定的HPAEC-PAD方法,该方法线性、重复性、稳定性良好,适用于rhEPO的唾液酸含量的常规测定。

高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法测定人工培养蛹虫草多糖的单糖组成

目的采用高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法测定人工培养蛹虫草多糖的单糖组成。方法以人工培养蛹虫草子实体为原料,利用热水和稀碱液分别对其水溶性多糖成分进行提取,分离得到6种人工蛹虫草水溶性多糖化合物。其中水提部分主要分离得到3种精多糖P50、P70-1和P70-2,碱提部分则分离得到3种精多糖CBP- 1、CBP-2和CBP-3。高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法分别对上述6种精多糖的单糖组成成分进行了测定。结果除CBP-3为葡聚糖外,其他5个多糖均为由D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖组成的杂多糖。结论采用高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法进行多糖化合物的单糖组成成分测定,无需进行衍生化,可达到简便、高效、准确地进行单糖组成分析之目的。

氨基酸-糖混合物的高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测方法的研究进展

氨基酸和糖的研究是生命科学领域中的重要内容,其定量分析技术一直受到人们的高度关注。本文对氨基酸和糖的高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测方法进行了较详细的讨论,综述了氨基酸-糖混合物分析中的研究进展。

离子色谱-脉冲安培检测器法测定饲料添加剂中的低聚果糖

建立了饲料添加剂中低聚果糖的离子色谱-安培检测器检测方法。试样经果聚糖酶酶解后测定酶解产物中果糖含量,换算可得低聚果糖含量。结果表明:果糖在2~50μg/mL具有良好的线性关系,方法回收率为95.7%~100.5%,相对标准偏差为0.8%~2.8%。该方法定量准确可靠,回收率高,适用于饲料添加剂中低聚果糖的日常检测。

利用离子色谱法检测笋制品中氨基酸含量的方法研究

用阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法（HPAEC—IPAD）测定了本实验室加工的3种笋制品的氨基酸含量。结果显示，实验建立的测定方法具有检出限较低、线性范围较宽的优点；测得笋制品的总氨基酸含量达108．02～110．13g／kg（干重），必需氨基酸含量达40％以上，表明3种笋制品具有较好的营养价值。

高效阴离子交换色谱–脉冲安培法测定生态养护抑菌凝胶中的褐藻寡糖

建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定生态养护抑菌凝胶中褐藻寡糖含量的方法。采用阴离子交换柱CarboPac PA10(250 mm×2 mm,3.5μm),以氢氧化钠、乙酸钠和水为洗脱液进行梯度洗脱,柱温为35℃,流量为0.8 mL/min。α-L-古罗糖醛酸单糖(PG)和β-D-甘露糖醛酸单糖(PM)的质量浓度分别在0.25~9.0μg/mL和0.18~8.4μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,线性相关系数分别为0.9997和0.9998,检出限分别为0.06,0.03μg/mL,定量限分别为0.20,0.10μg/mL。测定结果的相对标准偏差分别为1.11%,1.25%(n=6),加标回收率分别为101.03%和95.22%。该方法简便易行,灵敏度高,重现性好,适用于生态养护抑菌凝胶中褐藻寡糖的分析。

巴戟天药材寡糖化学成分的高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测器指纹图谱研究

目的建立巴戟天药材寡糖化学成分的高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测器(HPAEC-PAD)特征指纹图谱,为制定巴戟天药材质量标准提供参考数据。方法利用HPAEC-PAD,色谱条件为,Hamilton RCX-10(4.1 mm×250 mm,7μm),100 mmol.L-1 NaOH溶液(A)-100 mmol.L-1 NaOH,500 mmol.L-1 NaAc混合溶液(B)流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1,柱温为30℃,检测电压0.1V,分析时间为40 min。结果建立了巴戟天药材寡糖化学成分的HPAEC-PAD指纹图谱,并标定出巴戟天药材20个共有峰,其中3个峰经与对照品比对为蔗果三糖、耐斯糖(nystose)、1F-果呋喃糖基耐斯(1F-fructo-furanosylnyslose),经指纹图谱系统解决方案软件(ChromafingerTM)生成共有模式,并进行相似度和主成分分析。不同产地巴戟天药材均含有以上共有峰,但在共有峰的峰高上有差异,并可用于区别巴戟天及其常见混伪品。结论利用该方法建立的巴戟天寡糖类化学成分的指纹图谱特征性和专属性强,且该方法快速、灵敏、可靠,可用于控制巴戟天药材的质量。

高效阴离子色谱-脉冲安培检测法测定脑膜炎球菌结合疫苗中A群多糖含量

目的：采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法（HPAEC-PAD）测定A群脑膜炎球菌多糖及脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中6-磷酸甘露糖胺的含量，并对该方法进行验证，实现微量A群脑膜炎球菌多糖的定量检测。方法：A群脑膜炎球菌多糖酸水解处理后，经^1H、^13C NMR及COSY谱图分析，产物结构为6-磷酸甘露糖胺单体，然后进样CarboPac PA10柱，氢氧化钠-醋酸钠梯度洗脱，脉冲安培检测。筛选样品的水解条件;对HPAEC-PAD法进行专属性、精密度及准确性验证，并进行初步应用。结果：确定样品的水解条件为2 mol·L^-1三氟乙酸煮沸5 h。 载体蛋白破伤风类毒素对检测无干扰；在1～10 μg·mL^-1范围内，标准曲线线性关系良好（r 〉 0.999），加样回收率在95.73%～102.4%之间;试验内和试验间精密度试验结果RSD小于5%。 HPAEC-PAD法测定疫苗原液的多糖含量与Chen法比色测定结果相当，成品疫苗的A群多糖含量测定符合《A、C群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》（每剂均≥10 μg）和《A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》（每剂均≥4 μg）。结论：HPAEC-PAD法专属性、精密度和准确性良好，可用于A群脑膜炎球菌多糖含量测定，尤其是脑膜炎球菌结合疫苗中A群多糖含量测定。

利用高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测法测定不同生长年限巴戟天中6种寡糖类成分含量

目的采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测法（HPAEC-PAD）对巴戟天不同生长期中的6种寡糖（葡萄糖、果糖、蔗糖、1-蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖）进行检测,对其动态积累规律进行分析,为研究巴戟天的最佳采收期提供参考。方法利用高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测法,色谱条件如下：Hamilton RCX-10色谱柱（4.1 mm×250mm,7μm）,100 mmol·L-1Na OH溶液（A）-100 mmol·L-1Na OH溶液,500 mmol·L-1Na OAc混合溶液（B）为流动相梯度洗脱,流速0.8 m L·min-1,柱温35℃,进样量25μL。结果随着生长年限的增加,巴戟天根中的单糖呈现减少的趋势,蔗糖则逐渐增加,聚合度为3或以上的1-蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖则在1~5年间渐增加,然后缓慢降低。结论不同生长年限巴戟天中6种寡糖成分的组成及含量相差较大,提示该类成分的合成与生长年限有一定的关系,为制定适宜的采收期提供参考。

离子色谱-积分脉冲安培检测法测定D-核糖

采用离子色谱-积分脉冲安培检测法（IC-IPAD）测定D-核糖,采用Carbo PacTM PA10色谱柱进行分离,60 mmol/L Na OH溶液为淋洗液,流速0.6 m L/min,柱温30℃,ED3000安培检测器,Au工作电极,Ti对电极,Ag/Ag Cl复合参比电极。以外标法定量,D-核糖质量浓度为3.60~43.2mg/L范围内峰面积呈良好的线性关系（R2=0.9999）,检出限及定量限分别为0.200、0.620 ng,精密度实验的相对标准偏差（RSD）为0.524%,平均回收率为101%。因此,IC-IPAD可用于D-核糖含量的测定,且操作简便、无需衍生、分离效果好、灵敏度高。

烟叶和烟草料液中氨基酸的直接检测及碳水化合物的去除

建立了高效阴离子交换色谱一积分脉冲安培法（HPAEC-IPAD）直接检测烟叶和烟草料液中氨基酸的方法。利用离线除糖的方法，去除烟叶和烟草料液中大量干扰糖类，包括葡萄糖、果糖和蔗糖及麦芽低聚糖等。采用AminoPac PA10阴离子交换柱，以NaOH和NaAc的强碱性溶液为淋洗液，采用梯度洗脱，流速为0．25mL／min；积分脉冲安培法对氨基酸进行检测，回收率可达76％～105％。此方法可以有效的解决烟叶、烟草料液等含糖量高的样品中糖类化合物的干扰，对氨基酸实现灵敏、准确的定量分析。

高效阴离子色谱法测定当归果胶多糖中的糖醛酸含量

建立高效阴离子色谱-脉冲安培检测(HPAEC-PAD)当归果胶多糖中糖醛酸的定性、定量方法,并对测试样品的预处理方法进行研究。分别对多糖样品进行不同预处理,采用外标法测定糖醛酸含量。结果表明,多糖样品需经脱脂处理并结合弱酸水解和酶解才能获得准确、真实的结果;建立了半乳糖醛酸(GalA)和葡萄糖醛酸(GlcA)的线性回归方程,相关系数均为0.9990。经计算,HPAEC-PAD法测定当归多糖的GalA含量为53.62%,与比色法(58.27%)的相对误差为8.67%,并具有良好的重现性。采用HPAEC-PAD法对糖醛酸定性、定量,无需衍生化,且灵敏度高、重现性好,是快速测定糖醛酸含量的有效方法。

由马铃薯淀粉制得磷酸寡糖的定性定量测定

对以马铃薯淀粉为原料、全酶法制得的磷酸寡糖进行定性定量分析。通过采用薄层层析法(thin layerchromatography,TLC)和高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测(high-performance anionic exchange chromatography-air puls-ing ampere detectors,HPAEC-PAD)对磷酸寡糖组分进行检测分析,同时利用红外吸收光谱(infrared spectroscopy,IR)对其进行结构分析。结果表明:磷酸寡糖是结合有磷酸基团的并且聚合度在3～7之间的麦芽低聚糖混合物,以麦芽三糖至麦芽六糖组分居多。

直接氨基酸法测定乳清粉中氨基酸

本文通过使用氨基酸直接分析法——离子交换色谱-积分脉冲安培法(HPIC-IPAD)对乳清中游离的氨基酸和水解后乳清粉中的氨基酸进行检测分析。结果表明,可以检测到乳清粉中含有游离氨基酸6种,水解以后可以检测到15种氨基酸,而且氨基酸的保留时间(Rt)相对标准偏差(RSD)平均为1.843%,峰面积RSD平均为2.6174%。

Thermobifida fusca异淀粉酶的作用机制分析

异淀粉酶可水解支链淀粉的α-1,6糖苷键,为淀粉彻底水解所必须.使用仪器分析方法推断此类酶作用机制的研究国内未见报道.Thermobifida fusca异淀粉酶经镍离子亲和色谱纯化,以玉米支链淀粉（maize amylopeetin,AP）为底物,结合体积排阻色谱、高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器及氢谱核磁共振等仪器分析方法研究其作用机制.结果表明：AP分子的相对分子质量为2 812 000,水解反应2h后生成两类葡聚糖组分,相对分子质量分别为760 000和7.2 000,比例为1∶4.4;IAM随机水解支链淀粉分子的α-1,6糖苷键,并可切断带有2-3个葡萄糖残基的侧链分支点生成麦芽糖和麦芽三糖,而对α-1,4糖苷键无作用.完全水解支链淀粉生成具有α或β型还原末端的直链淀粉链或麦芽寡糖,产物聚合度（degree of polymerization,DP）主要在15～35之间.IAM作用机理的研究可为其工业化应用奠定基础.