内质网钙离子结合蛋白1对肝细胞癌患者预后的预测价值及阈值效应分析

目的探讨内质网钙离子结合蛋白1(reticulocalbin-1,RCN1)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后的预测价值。方法回顾性收集2020年1月至2021年6月河南科技大学第一附属医院收治的399例HCC患者作为研究对象,术后随访1年,根据预后情况将其分为预后良好组(n=310)和预后不良组(n=89)。收集入选患者的临床资料及实验室指标,采用多因素Logistic回归分析影响HCC患者预后的危险因素。采用平滑拟合曲线并进行阈值效应分析RCN1对HCC患者预后情况。结果RCN1≤42.36μg/g时,随着RCN1水平增加,患者预后不良率不受影响(OR=1.001,95%CI:0.815~1.958,P<0.001),RCN1>42.36μg/g时,随着RCN1水平增加,患者预后不良率明显增加(OR=1.239,95%CI:1.006~1.782,P<0.001)。列线图模型预测的准确性较高,临床适用性较好。结论RCN1对HCC患者预后情况有一定的预测价值,临床研究应加以重视。

亚低温干预对创伤性颅脑损伤大鼠海马组织CIB1表达的影响

目的研究亚低温干预对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠脑组织海马CA1区钙离子结合相关蛋白1(CIB1)表达的影响。方法 54只SD大鼠随机分为亚低温组(n=24)、常温组(n=24)和假损伤组(n=6)。亚低温组和常温组大鼠经液压侧方打击制作TBI模型,亚低温组大鼠建模后给予亚低温干预(32℃,4 h)。于TBI后4、6、12、24 h时(假损伤组为伤后24 h)分批(n=6)处死动物,取损伤侧海马CA1区组织,RT-PCR和Western blotting检测CIB1 mRNA和蛋白的表达。结果常温组和亚低温组大鼠TBI后各时点损伤侧海马CA1区组织中CIB1 mRNA和蛋白的表达均显著高于假损伤组(P<0.05),分别在伤后4h和6 h上调达最高水平;亚低温组CIB1 mRNA和蛋白表达的上调程度显著低于常温组(P<0.05)。结论亚低温干预对TBI大鼠海马组织CIB1 mRNA和蛋白的表达上调具有抑制作用。

circ-RAD23B通过miR-708-5p/CPNE1轴调控膀胱癌细胞增殖、细胞周期、凋亡的机制

目的探讨circ-RAD23B对膀胱癌细胞增殖、细胞周期、凋亡的影响及分子机制。方法选取49例膀胱癌患者癌组织及相应的癌旁组织;培养人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3,将T24细胞分为NC组、si-NC组、si-circ-RAD23B组、miR-NC组、miR-708-5p组、si-钙离子依赖性磷脂结合蛋白(CPNE)1组、pcDNA-NC组、pcDNA-CPNE1组、si-circ-RAD23B+pcDNA-NC组、si-circ-RAD23B+pcDNA-CPNE1组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ-RAD23B、miR-708-5p和CPNE1 mRNA表达水平;Western印迹检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证circ-RAD23B和miR-708-5p及miR-708-5p和CPNE1之间的靶向关系;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况。结果与癌旁组织比较,膀胱癌组织中circ-RAD23B表达水平明显升高(P<0.05)。与SV-HUC-1细胞比较,膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3中circ-RAD23B表达水平明显升高,CPNE1 mRNA和蛋白表达水平明显升高,miR-708-5p表达水平明显降低(P<0.05)。circ-RAD23B靶向调控miR-708-5p,miR-708-5p靶向调控CPNE1。circ-RAD23B和CPNE1低表达或miR-708-5p高表达,膀胱癌细胞T24中CyclinD1表达水平明显降低,Cleaved-caspase-3表达水平明显升高,细胞A值明显降低,S期细胞所占比例明显降低,G2/M期细胞所占比例明显升高,细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。高表达CPNE1可逆转circ-RAD23B低表达对T24细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。结论circ-RAD23B低表达可能通过miR-708-5p/CPNE1轴抑制膀胱癌细胞增殖,诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。

脂多糖对大鼠中脑原代培养细胞的神经损伤作用

目的:观察脂多糖(LPS)对大鼠中脑原代混合细胞多巴胺能神经元的损伤作用。方法:取孕14d的SD大鼠胚胎中脑原代培养。①将细胞分为正常对照组和不同剂量LPS(0.01、0.10、1.00和10.00mg/L)组,体外培养7d后,实验组加入不同浓度的LPS,持续作用72h后,经酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学染色,计数TH阳性细胞数目并观察形态变化。②将细胞分为正常对照组和0.1mg/L的LPS组。体外培养7d,实验组加入终浓度为0.1mg/L的LPS,分别作用8、24和72h,收集细胞上清液,用ELISA检测白细胞介素6(IL-6)的含量;分别对作用8、24和72h的原代细胞进行TH和离子钙结合蛋白1(Iba1)的免疫细胞化学染色,计数多巴胺能神经元和激活的小胶质细胞的数量。结果:TH阳性细胞减少,大部分细胞表现为突起数目的减少,突起变短并有串珠样改变。0.1mg/LLPS分别作用8、24和72h的给药组与对照组相比,IL-6的含量均有显著增加(t分别为15.787、16.712和15.910,P均<0.001)。激活的Iba1染色阳性神经元的数量分别为(40.0±6.1)、(76.0±3.4)和(69.0±5.2)(F=387.820,P<0.001)。在24和72h的LPS给药组中,TH染色阳性神经元的数量分别为(18.0±5.3)和(10.0±3.2)(F=94.840,P<0.001)。结论:LPS通过激活小胶质细胞释放IL-6发挥对多巴胺能神经元的损伤作用。

淫羊藿苷对结肠癌增殖、侵袭抑制作用及机制研究

淫羊藿苷(Ica)梯度处理人结肠癌细胞HT29,采用MTT法、流式细胞术、Transwell小室检测Ica对HT29细胞增殖、周期、凋亡、侵袭和迁移的影响;蛋白组织学技术寻找Ica作用前后的差异蛋白,Western blot对部分蛋白进行验证。结果表明:Ica能够抑制HT29增殖;阻滞细胞由G0/G1期向S期的发展;诱导HT29细胞凋亡;抑制细胞侵袭和迁移;Ica干预24h后,乙醛脱氢酶2(ALDH2)和钙离子依赖性磷脂结合蛋白1(CPNE1)上调,Western blot验证结果一致。这一研究提示Ica可显著抑制HT29细胞的增殖、侵袭和迁移,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调ALDH2和CPNE1有关。