藏药十八味诃子利尿丸对雄性糖尿病大鼠脑组织离子钙结合衔接分子1及突触可塑性相关蛋白的影响

目的探讨藏药十八味诃子利尿丸对雄性糖尿病(Diabetes mellitus,DM)大鼠脑组织中小胶质细胞标记物离子钙结合衔接分子1(Ionized calcium binding adaptor molecule 1,IBA1)及突触可塑性相关蛋白的影响。方法30只雄性SD大鼠适应性喂养72 h后,取10只大鼠为对照组;另取20只制备DM大鼠,以高糖高脂饲料喂养12 w后于尾静脉一次性注射STZ溶液,其中10只为模型组、10只为藏药组(藏药组用十八味诃子利尿丸连续灌胃2 w),实验结束后断头取脑组织。用Western Blot法检测IBA1、IL-6、syn-1、PSD95、HIF-1α,用IHC法检测IBA1、IL-6、HIF-1α。对实验结果进行相关统计学分析。结果与对照组比较,模型组大鼠脑组织中的IBA1、IL-6、HIF-1α蛋白表达升高(P<0.05),syn-1、PSD95蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,藏药组大鼠脑组织中的IBA1、IL-6、HIF-1α蛋白表达降低(P<0.05),syn-1、PSD95蛋白表达量升高(P<0.05)。结论藏药十八味诃子利尿丸可能通过IBA1靶点降低DM大鼠脑组织中小胶质细胞的活化水平,并改善突触可塑性,从而对DM大鼠脑组织发挥保护作用。

内质网钙离子结合蛋白1对肝细胞癌患者预后的预测价值及阈值效应分析

目的探讨内质网钙离子结合蛋白1(reticulocalbin-1,RCN1)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后的预测价值。方法回顾性收集2020年1月至2021年6月河南科技大学第一附属医院收治的399例HCC患者作为研究对象,术后随访1年,根据预后情况将其分为预后良好组(n=310)和预后不良组(n=89)。收集入选患者的临床资料及实验室指标,采用多因素Logistic回归分析影响HCC患者预后的危险因素。采用平滑拟合曲线并进行阈值效应分析RCN1对HCC患者预后情况。结果RCN1≤42.36μg/g时,随着RCN1水平增加,患者预后不良率不受影响(OR=1.001,95%CI:0.815~1.958,P<0.001),RCN1>42.36μg/g时,随着RCN1水平增加,患者预后不良率明显增加(OR=1.239,95%CI:1.006~1.782,P<0.001)。列线图模型预测的准确性较高,临床适用性较好。结论RCN1对HCC患者预后情况有一定的预测价值,临床研究应加以重视。

基质交联分子-1调控前列腺癌细胞PC-3中钙离子通道作用研究

目的探讨前列腺癌细胞PC-3在其细胞内外钙离子浓度改变时,基质交联分子-1(stromal interaction molecule 1,STIMI)实时动态表达水平及其调节钙通道的作用机制。方法利用带有STIM1-YFP荧光探针的腺病毒载体(105病毒颗粒/细胞),转染前列腺癌细胞PC-3 24h后,采用荧光显微镜和细胞计数方法检测病毒探针对细胞形态和数量的毒理影响;利用全内角反射荧光显微镜,观察STIM1在以下几种情况中在细胞膜附近的实时动态变化:100μmol/L肌浆网钙ATP酶(SERCA)抑制剂环匹阿尼酸(CPA)、2mmol/L钙离子螯合剂(EGTA)、100μmol/L卡巴胆碱。结果 STIM1荧光探针转染前列腺癌细胞不影响细胞形态和细胞数量。前列腺癌细胞PC-3在SERCA抑制剂CPA处理后,荧光强度增加到(1.45±0.2)(F/F0,n细胞数=18);当细胞外钙离子浓度降为0并加入EGTA钙离子螯合剂后,细胞荧光强度增加到(1.38±0.2)(F/F0,n=7);加入卡巴胆碱处理后,细胞荧光增加(1.62±0.3)(F/F0,n=23),刺激后荧光强度明显增加,有显著性差异(P<0.01)。结论 STIM1在前列腺癌细胞PC-3中表达并有活性;在其细胞内外钙离子浓度改变时,STIM1在细胞膜上形成多聚体,通过钙库操纵Ca^(2+)通道调节前列腺癌细胞的功能。

L型钙离子通道α_1亚单位的分子生物学研究进展

钙离子被人们称作生物信使，与其密切相关的钙离子通道的重要性则不言而喻，因此众多的生命科学工作者投入了大量的精力研究钙离子通道，并且已经从细胞水平的研究深入到分子水平。遗憾的是，到目前为止仍没有完全搞清楚它的功能和作用机制，甚至没有形成统一的理论观点。...

基质交感分子1介导钙离子内流对老年冠心病患者外周血T细胞亚群激活的影响

目的探讨基质交感分子(Stim)1介导钙离子(Ca2+)内流对老年冠心病患者外周血T细胞亚群激活的影响。方法采集2013年1~12月在第三军医大学第一附属医院的患者共125例,根据冠状动脉造影(CAG)结果分成对照组和冠心病组,采集所有患者基础临床生化指标。采用流式细胞计数分析患者T淋巴细胞数目,免疫磁珠法分离患者外周血CD3+T淋巴细胞,采用Western印迹法检测T细胞内Stim1蛋白表达,采用免疫荧光法检测T细胞内Ca2+内流,ELISA法检测外周血炎症因子水平。结果与对照组比较,冠心病组患者年龄、体质量指数(BMI)、高血压史、吸烟史、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、N-端脑钠肽前体(NT-pro BNP)和胱抑素C水平均显著增高(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低(P<0.05);与对照组比较,冠心病患者CD3+T以及CD4+T细胞数目显著增加(P<0.05),而CD8+T细胞和调节型T细胞(CD4+Foxp3+,Treg)显著降低(P<0.05)。体外培养患者的T淋巴细胞中,与对照组比较,冠心病组T细胞内Stim1蛋白表达显著增高(P<0.05),T细胞Ca2+内流显著增加;与对照组比较,冠心病患者外周血中白细胞介素(IL)-12、干扰素(IFN)-γ和IL-6水平均显著增高(P<0.05),而转化生长因子(TGF)-β水平显著降低(P<0.05)。结论冠心病患者T细胞Stim1表达水平增高,Stim1可通过调节Ca2+内流进而影响T淋巴细胞亚群活性,促进动脉粥样硬化的进展。

钙离子信号蛋白TRPC1及Orai1参与了HUVEC经SOC和ROC介导的钙内流和NO生成

目的研究瞬时受体电位通道1(TRPC1)及钙释放激活钙通道调节分子1(Orai1)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)经钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)介导的Ca2+内流和一氧化氮(NO)生成中的作用。方法取2~3代HUVEC进行随机分组,将构建的TRPC1、Orai1干扰质粒(sh TRPC1、sh Orai1)分别转染入HUVEC,采用real-time PCR和Western blot检测TRPC1、Orai1 mRNA和蛋白的表达及转染抑制效率。将各组细胞分别与钙敏感受体(CaR)激动剂精胺、ROC模拟剂(TPA)+CaR负性变构调节剂Calhex231、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro31-8220与经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967孵育后,荧光探针Fura-2/AM及DAF-FM负载方法同步检测[Ca2+]i和NO生成的变化。结果与对照组比较,sh TRPC1组和sh Orai1组mRNA表达(抑制率分别为84.50%、76.10%)和蛋白的表达(抑制率分别为83.98%、71.73%)明显降低(P<0.05)。在4种不同药物作用下,sh TRPC1组和sh Orai1组[Ca2+]i△ratio值和NO净荧光强度值均明显降低(P<0.05)。结论 TRPC1、Orai1参与了人脐静脉内皮细胞SOC和ROC介导的钙内流和NO生成。

钙传感器基质交感分子1与心血管疾病的研究进展

冠心病和心力衰竭等心血管疾病的发病机制多样、病理生理过程复杂多变,虽目前从多个方面研究,但仍未能完全明确。钙离子主要位于细胞外或储存在内质网等细胞器中,是常见的第二信使,在细胞生存进程中有着十分重要的作用。近些年研究发现细胞内钙稳态失调是诱发心血管疾病的重要因素[1-2]。钙离子耗竭引起的翻译后蛋白修饰异常会导致蛋白运输错误、内质网应激、生长抑制和细胞凋亡。有关钙离子通道的研究对心血管疾病的发病机制进行了补充,为从根本上减少疾病发生、控制疾病发展提供了新的思路。人类基质交感分子(stromal interaction molecule,STIM)家族包括STIM1及STIM22种组成成分,广泛存在于多类人体细胞中,但在多数组织中无论在表达还是功能上STIM1均较STIM2强。STIM1参与机体多种生理和病理生理过程。近些年大量研究发现,STIM1与高血压[3]、冠心病[4]等多种心血管疾病均关系密切。本文主要针对近年来国内外对STIM1的研究结果,论述STIM1的结构和功能及其在心血管疾病发生发展中的作用及应用前景。

葛根芩连汤联合普罗布考对糖尿病视网膜病变患者血清钙镁离子sICAM-1及CTGF水平影响研究

目的探讨葛根芩连汤联合普罗布考对糖尿病视网膜病变患者血清钙镁离子、可溶性细胞黏附分子-1(s IGAM-1)及结缔组织生长因子(CTGF)水平的影响。方法将47例糖尿病视网膜病变患者随机划为实验组及对照组,对照组23例予二甲双胍联合阿卡波糖治疗,实验组24例在对照组治疗基础上加予葛根芩连汤联合普罗布考治疗。治疗28 d后比较2组临床疗效及血清钙镁离子、s IGAM-1与CTGF水平变化。结果实验组有效率为95.8%,对照组为73.9%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);2组治疗后血糖、餐后2 h血糖、血清糖化血红蛋白、同型半胱氨酸血清总胆固醇(TC)、s ICAM-1及CTGF水平明显降低,血清钙镁离子水平明显升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);且实验组上述指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05);实验组的视网膜病变进展率为8.3%,对照组为43.5%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论葛根芩连汤联合普罗布考治疗糖尿病伴视网膜病变血糖控制效果良好,同时能够缓解视网膜病变进展,推测与升高血清钙镁离子水平、降低血清s ICAM-1及CTGF水平有关。

针罐结合对中重度变应性鼻炎血清Eotaxin、ICAM-1及ECP表达的影响

目的:通过观察针罐结合对中重度变应性鼻炎患者血清Eotaxin、ICAM-1及ECP表达的影响,探讨针罐结合治疗变应性鼻炎的作用机制。方法:中重度变应性鼻炎患者70例,分为针罐结合组(36例)和药物组(34例),针罐结合组选取风池、迎香、曲池、血海、肺俞、脾俞等穴,针后背俞穴拔罐治疗;药物组采用布地奈德鼻喷雾剂联合西替利嗪片进行治疗,两组均治疗8周。分别于治疗前、治疗4周、治疗8周后采用ELISA法测定血清中Eotaxin、ICAM-1、ECP的含量。结果:针罐组治疗4周、8周后Eotaxin、ECP升高,ICAM-1降低(P<0.05或P<0.001),且ICAM-1下降较药物组明显(P<0.05)。结论:针罐结合治疗中重度变应性鼻炎可能与对Eotaxin、ICAM-1、ECP的调节作用有关。

骨质疏松分子生物学研究专家共识

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。

可溶性耐药相关钙结合蛋白在MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病模型中的表达及意义

目的:观察1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病(PD)模型中可溶性抗药性相关钙结合蛋白(sorcin)表达的变化,寻求参与PD多巴胺能神经元细胞神经变性的蛋白质改变,为阐明PD的发病机制提供理论依据。方法:应用1.0mmol.L-1 MPP+处理未分化的SH-SY5Y细胞24h,在体外建立PD细胞模型,应用荧光染色双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)、图像分析、基质-辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和生物信息学的方法,对该模型的差异表达蛋白质进行研究。结果:蛋白质组学分析在对照组和MPP+处理组之间发现22个差异表达蛋白质,其中1个蛋白质点被确切的鉴定为sorcin。sorcin的表达明显上调,荧光丰度比值为1.97倍。该蛋白的最小肽片段覆盖率、最大概率期望值、相对分子质量和等电点分别为25.7、0.006、21 940和5.3。结论:sorcin在功能上与钙离子稳态和凋亡有关,可能参与了MPP+在SH-SY5Y细胞诱导的毒性,并可能与PD的发病机制有关。

热休克蛋白90a通过增强钙库操作性钙离子内流活性促进肝癌细胞转移

目的探讨细胞外热休克蛋白90α(eHsp90α)对肝癌细胞转移的影响及机制。方法 Westernblot检测细胞培养基上清中eHsp90α的水平和细胞中基质相互作用分子1(STIM1)蛋白表达,Confocal检测钙库操作性钙离子内流(SOCE)活性,免疫荧光双染检测STIM1和ORAI1的相互作用水平,Transwell和划痕实验检测细胞转移能力。结果肝癌细胞系中e Hsp90α较正常肝细胞系LO-2显著增加;高度转移能力的MHCC87H和HCCLM3细胞中e Hsp90α水平、STIM1蛋白表达和SOCE活性较低转移能力的HepG2、HL-7702和SNU-449显著升高。hrHsp90α可以显著增加HepG2的转移能力、STIM1蛋白变化和SOCE活性。敲低STIM1蛋白表达或抑制SOCE活性,可以抑制MHCC87H的转移能力和hrHsp90α诱导的HepG2转移能力增加。结论eHsp90α可促进肝癌细胞的转移,其机制是通过诱导STIM1蛋白表达,进而增加SOCE活性。

加味二仙丸对支气管哮喘大鼠钙离子通道的影响

目的:探讨加味二仙丸对支气管哮喘大鼠中钙库操控的钙离子通道(SOCC)的影响。方法:54只SD大鼠采用随机数字表法分成空白组9只,造模组45只。建立大鼠哮喘模型,造模成功后将造模组大鼠随机分成模型组、加味二仙丸低剂量组、加味二仙丸中剂量组、加味二仙丸高剂量组、固肾定喘丸组,每组6只。各药物组给予相应药物干预,模型组和空白组大鼠予以等容量的生理盐水进行灌胃,2次/d,连续给药28 d。通过HE染色判断哮喘模型是否制备成功,通过免疫组织化学法测基质相互作用分子1(STIM1)、钙释放激活钙通道蛋白1(ORAI1)的阳性表达,通过Western blotting法测STIM1、ORAI1蛋白相对表达量,通过荧光指示剂法观察钙离子平均荧光强度值,反映其钙离子浓度变化。结果:模型组大鼠支气管分支及其周围有大量以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,加味二仙丸低、中、高剂量组和固肾定喘丸组大鼠可见少量的炎症细胞浸润,各给药组大鼠损伤程度介于空白组和模型组之间,且各给药组损伤程度无明显差异。与空白组比较,模型组大鼠肺组织STIM1、ORAI1的平均光密度值和蛋白表达量、钙离子平均荧光强度值明显升高,加味二仙丸低剂量组大鼠肺组织STIM1的平均光密度值和蛋白表达量、ORAI1蛋白表达量、钙离子平均荧光强度值升高,加味二仙丸中剂量组和固肾定喘丸组大鼠肺组织ORAI1蛋白表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,加味二仙丸高剂量组大鼠肺组织STIM1、ORAI1平均光密度值和蛋白表达量、钙离子平均荧光强度值明显降低,固肾定喘丸组大鼠肺组织STIM1和ORAI1蛋白表达量降低,加味二仙丸低、中剂量组大鼠肺组织ORAI1蛋白表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:加味二仙丸能抑制哮喘大鼠肺组织中SOCC的激活,从而抑制钙离子内流,起到治疗支气管哮喘的作用。

基质相互作用蛋白分子1在肿瘤发生发展和临床应用中的研究进展

基质相互作用蛋白分子1(STIM1)与肿瘤的发生发展密切相关,其参与多种癌症细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的调节过程。阻断或敲除STIM1可以显著抑制癌细胞的增殖和迁移。阐明STIM1在癌症细胞中的调节机制,将有助于新的治疗靶点的确定。本文对STIM1分子在不同肿瘤中的作用机制及临床应用前景作一综述。

帕瑞昔布钠对切口痛大鼠脊髓Iba-1和GFAP蛋白表达的影响

探讨帕瑞昔布钠(PS)对切口痛大鼠脊髓小胶质细胞离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)和背角胶质纤维酸性(GFAP)蛋白表达的影响。方法 随机将30只SPF级雄性SD大鼠分为空白对照组(K组)、模型组(M组)及PS治疗组(PAR组),每组各10只。K组不做任何处理,M组只做切口痛模型,PAR组术后注射40μg/μL PS-生理盐水溶液10mL。采用免疫组织化学染色测定Iba-1、GFAP蛋白水平。比较各组术后1h、12h时的Iba-1、GFAP蛋白水平及疼痛累计评分。结果 M组术后1h、12h时的Iba-1为[(0.09±0.03)、(0.07±0.02)]、GFAP蛋白水平为[(0.54±0.08)、(0.46±0.05)]高于PAR组、K组,PAR组术后1h、12h时的Iba-1、GFAP蛋白水平高于K组,有统计学差异(P<0.05);M组的疼痛累计评分为(16.97±3.28)分,高于PAR组(10.28±2.46)分、K组(1.51±0.35)分,PAR组疼痛累计评分高于K组,有统计学差异(P<0.05)。结论 PS能够对切口痛大鼠产生良好的镇痛效果,减轻疼痛程度,降低脊髓Iba-1和GFAP蛋白表达。

亚低温干预对创伤性颅脑损伤大鼠海马组织CIB1表达的影响

目的研究亚低温干预对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠脑组织海马CA1区钙离子结合相关蛋白1(CIB1)表达的影响。方法 54只SD大鼠随机分为亚低温组(n=24)、常温组(n=24)和假损伤组(n=6)。亚低温组和常温组大鼠经液压侧方打击制作TBI模型,亚低温组大鼠建模后给予亚低温干预(32℃,4 h)。于TBI后4、6、12、24 h时(假损伤组为伤后24 h)分批(n=6)处死动物,取损伤侧海马CA1区组织,RT-PCR和Western blotting检测CIB1 mRNA和蛋白的表达。结果常温组和亚低温组大鼠TBI后各时点损伤侧海马CA1区组织中CIB1 mRNA和蛋白的表达均显著高于假损伤组(P<0.05),分别在伤后4h和6 h上调达最高水平;亚低温组CIB1 mRNA和蛋白表达的上调程度显著低于常温组(P<0.05)。结论亚低温干预对TBI大鼠海马组织CIB1 mRNA和蛋白的表达上调具有抑制作用。

癫痫清颗粒对海人藻酸致癫痫大鼠海马组织中IL-6含量及GFAP、Iba-1表达的影响

目的:研究癫痫清颗粒对海人藻酸致癫痫大鼠海马组织中白细胞介素6(IL-6)含量及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙接头分子1(Iba-1)表达的影响,探讨该药防治癫痫的作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组(蒸馏水)、模型组(蒸馏水)、苯妥英钠组(0.03 g/kg,阳性对照)和癫痫清颗粒低、中、高剂量组(4.74、9.47、18.94 g/kg,以生药计),每组20只,每天ig给药1次,连续7d。末次给药1 h后,除假手术组外的其余各组大鼠均于左侧海马CA1区单次注射海人藻酸复制癫痫模型,观察大鼠行为学变化及死亡情况。造模24 h后,采用酶联免疫吸附法检测大鼠海马组织中IL-6含量,采用尼氏染色法对海马组织神经元进行计数,采用免疫组化法检测大鼠海马组织中GFAP、Iba-1表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠造模后发生明显癫痫症状,部分大鼠死亡;海马组织中IL-6含量及神经元数目明显减少(P<0.01),GFAP、Iba-1表达明显增强(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠癫痫症状及死亡情况得到改善,而海马组织中IL-6含量虽均不同程度升高,但差异无统计学意义(P>0.05);苯妥英钠组和癫痫清颗粒中、高剂量组大鼠海马组织神经元个数明显增加(P<0.01),GFAP表达明显降低(P<0.01);苯妥英钠组和癫痫清颗粒高剂量组大鼠海马组织中Iba-1表达明显降低(P<0.01)。结论:癫痫清颗粒可通过抑制海马组织中GFAP和Iba-1的表达、增加海马组织中神经元数量,从而发挥防治癫痫的作用。

急性胰腺炎患者血清钙结合蛋白A12联合黏附分子检测的临床意义

目的 探讨急性胰腺炎患者血清钙结合蛋白A12（S100A12）和细胞黏附分子水平变化与重症急性胰腺炎的关系.方法 将54例急性胰腺炎患者分为轻症急性胰腺炎（MAP）和重症急性胰腺炎（SAP）.采用双抗夹心酶联免疫吸附测定法检测患者外周静脉血中S100A12、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管细胞间黏附分子-1（VCAM-1）、内皮细胞选择素（E-selectin）和血小板选择蛋白（P-selectin）水平变化.结果 MAP组S100A12和ICAM-1水平分别为18.52±51.17、100.34±23.76,SAP组分别为281.48±145.33、209.28±37.38,对照组为16.46±3.52、18.20±5.08,三者之间差异有统计学意义（P＜0.05）;急性胰腺炎患者VCAM-1明显低于对照组,E-selectin和P-selectin水平和对照组相似;而SAP组P-selectin明显低于MAP组.以S100A12＞ 172.68 μg/L为标准诊断SAP的敏感度75.0％,特异性87.5％;以ICAM-1＞ 119.75 μg/L为标准诊断SAP的敏感度68.8％,特异性84.4％.且SAP组死亡患者S100A12和ICAM-1明显高于存活者（P＜0.05）.结论 急性胰腺炎患者血清中S100A12和ICAM-1的表达与病情严重程度及预后密切相关.

雷公藤内酯醇(T10)通过抑制脊髓背角内p38-MAPK的磷酸化发挥镇痛作用的机制研究

目的:观察鞘内给予雷公藤内酯(triptolide,T10)对于慢性炎性痛和神经病理性痛模型大鼠脊髓背角小胶质细胞内p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,MAPK)的磷酸化水平的影响。方法:采用大鼠足底注射完全弗式佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)构建慢性炎性痛模型,L5脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)和坐骨神经分支选择性结扎(spared nerve injury,SNI)的方法制作慢性神经病理性痛模型。利用von Frey丝刺激法连续观察造模后大鼠的痛行为变化;应用免疫荧光染色方法观察大鼠腰膨大节段胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和电离钙绑定衔接分子1(ionized calcium binding adaptor molecule-1,Iba-1)的表达水平;应用Western Blot方法观察大鼠腰膨大节段p38 MAPK的磷酸化水平。结果:(1)行为学结果显示:CFA、SNL、SNI模型大鼠机械性痛阈均明显降低,且术后一周内与正常对照组相比均保持在较低水平(P<0.01)。从术后第1 d起鞘内连续给予T10至第7 d,分别观察到T10能够明显提高上述模型大鼠手术侧后足的机械性痛阈(P<0.05);但T10在SNL模型和SNI模型大鼠中的效果要弱于CFA引起的慢性炎性痛(P<0.05)。(2)免疫荧光染色结果显示:CFA、SNL和SNI模型大鼠腰膨大脊髓背角内GFAP、Iba-1的表达明显高于正常对照组,而p-p38 MAPK阳性产物主要表达于小胶质细胞内。(3)Western Blot结果显示:造模后7 d脊髓背角内p-p38 MAPK的表达明显上调,鞘内给予T10后可以显著下调脊髓背角内p38的磷酸化水平(P<0.05)。结论:鞘内给予T10有效缓解由于CFA、SNL和SNI诱导的慢性痛模型大鼠的机械性痛阈的机制可能是通过下调脊髓背角内p38 MAPK信号通路的磷酸化水平,进而达到抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的活化。其次,T10对不同类型的疼痛模型的作用效果存在差异,对由CFA引起的慢性炎性痛的作用效果要强于由SNL和SNI诱导的慢性神经病理性痛。

SOCE通道在神经退行性疾病发病中的作用机制研究进展

钙离子(Ca^(2+))作为细胞内的第二信使,参与影响神经元的氧化应激、能量代谢、免疫应答、释放神经递质、调节信号通道等活动,在神经退行性疾病中发挥重要作用。钙通道家族是钙信号的主要来源之一,由基质相互作用分子1(STIM1)和钙释放激活钙调节蛋白1(Orai1)组成钙库操纵的Ca^(2+)内流(SOCE)通道是重要的钙通道家族成员,参与影响神经元的Ca^(2+)内流。SOCE通道活性及相关蛋白表达变化在阿尔茨海默病、帕金森病、脑缺血性疾病、亨廷顿病等神经退行性疾病发病过程中发挥重要作用。SOCE通道通过影响钙稳态、磷酸酶系统、能量合成、神经递质表达等机制参与神经退行性疾病的发病过程。基于SOCE通道的调控有望为上述疾病治疗提供新的思路。