携带bla CTX-M禽大肠杆菌的多重耐药特征和体外致病性研究

【目的】探究携带bla CTX-M禽大肠杆菌的分子流行特点。【方法】检测76株携带bla CTX-M禽大肠杆菌的多重耐药谱、系统进化分群及毒力基因,并分析毒力基因与耐药特点、系统进化分群之间的关联性。【结果】药敏结果显示,携带bla CTX-M禽大肠杆菌对氟苯尼考的耐药率最高,达85.53%(65/76);其次是恩诺沙星,为48.68%(37/76);最常见的多重耐药谱为氟苯尼考+恩诺沙星+乙酰甲喹,达10.53%(8/76)。系统进化分群结果显示,主要的亚群为C群和B1群;其中,C群检出率最高,达53.95%(41/76);其次是B1群,为30.26%(23/76);E群、A群、D群和F群的检出率分别为9.21%(7/76)、2.63%(2/76)、2.63%(2/76)和1.32%(1/76);未检测出B2群和分支I群。毒力基因检测结果显示,76株携带bla CTX-M禽大肠杆菌均检出了至少4种毒力因子,且有11株菌同时携带至少11种毒力基因;其中,有13株菌同时检出禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)的5个标志性毒力基因(iroN、iutA、hly、OmpT和iss),检出率为17.11%;有11株菌检出ColV质粒的标志基因(cva/cvi、iroN、iucD/iutA、etsAC、OmpT/hlyF和sitA),检出率为14.47%;有28株菌检出耶尔森菌强毒力岛(high pathogenitility island,HPI)的标志基因irp-2和fyuA,检出率为36.82%。【结论】携带bla CTX-M禽大肠杆菌多为多重耐药菌,且多重耐药菌株携带ColV毒力质粒可能性更高;携带bla CTX-M禽大肠杆菌的多重耐药与致病性有关联,即携带bla CTX-M禽大肠杆菌具有多重耐药的同时,具有致病的可能性更高。

中国不同地区家禽大肠杆菌血清型分布和耐药性比较研究

近几年在中国东北、华南、华中和华北地区采样,得到鸡泄殖腔拭子292份、饲料和水29份、鸡舍尘土和垫料28份,共349份。用麦康凯培养基分离大肠杆菌,共分离到大肠杆菌241株(东北地区107株;华南地区107株;华中地区12株;华北地区15株),分离率为69.1%。共有血清型67种,每种血清型1～2株,个别血清型有10株左右。呈地区性和多样性分布,有些地区有优势型,有的地区优势型不明显。细菌耐药性非常严重,以多重耐药为主,耐10～19种药物的菌株占50%以上,有一定地区性。总体上耐药率最高的是萘啶酸(88.1%),其它依次为四环素85.7%、磺胺甲基异恶唑81.0%、复方新诺明77.1%、氨苄西林76.2%、阿莫西林74.3%、链霉素66.2%、氟喹诺酮类57.1%～66.7%、氯霉素52.9%、庆大霉素39.0%、卡那霉素36.2%。细菌对氟苯尼考、奥格门丁、头孢曲松、头孢噻吩、阿米卡星普遍敏感,耐药率仅为0～19.5%。使用抗菌药的鸡场,对相应药物耐药率较高。该项研究为进一步分析研究耐药机理和制订兽医临床抗菌药使用规范奠定了基础。

抗禽大肠杆菌中药的体外抑菌方法和效果的研究

为研究金银花、大青叶等10味中药对禽类大肠杆菌的体外抗菌效果,使用纸片法、打孔法同时对10种中药水提物进行体外抑菌试验,通过抑菌结果筛选较优抑菌试验方法,并测定抑菌效果较好中药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,两种方法检测的药物抑菌圈大小除甘草、重楼外,均呈现显著性差异(P≤0.05),且其中的金银花、黄柏、贯众、黄连四味药抑菌结果差异极显著(P<0.01),说明纸片法效果更佳;10味中药中金银花、黄连的抑菌圈直径最大,分别为(15.10±0.01),(16.02±0.01)mm,呈高度敏感反应;二者的MIC分别是62.5,31.25 mg·mL-1,MBC为125,62.5 mg·mL-1。试验得出较好的体外抑菌试验方法为纸片法,10种抗禽大肠杆菌中药中以金银花、黄连效果最佳。

中草药对禽大肠杆菌的体外抑菌试验

本文探讨定量分析单味及多味复方中草药的药理活性的方法,为临床应用提供理论依据。利用两倍稀释法测定16种中草药对4种禽大肠杆菌体外抑菌的MIC;并选取24种两味组合,12种3～5味组合进行试验。结果单味中药对禽大肠杆菌的体外抑菌的MIC在3.9g/L至375g/L之间;24种两味中药组合的MIC在11.7g/L至250g/L之间,少数组合对各血清型大肠杆菌有拮抗作用;12种3～5味中药组合的MIC在11.7g/L至46.8g/L之间,全部组合表现协同作用,显示中药配伍优势。

中药复方制剂防治实验性禽大肠杆菌病的疗效试验

应用中药水煎液对禽大肠杆菌进行试验,根据中兽医辨证论治理论结合体外抑菌试验的结果,组成两个复方制剂对人工感染禽大肠杆菌病鸭作治疗及预防保护试验;结果两个复方制剂的治疗保护率为制剂Ⅰ84.8%,制剂Ⅱ87.9%,感染对照组的自然保护率为21.2%。两复方制剂的预防保护率分别为93.9%和90.9%,感染对照组的自然保护率为24.2%。试验各组之间鸭的增重差异不显著。

禽大肠杆菌DNA旋转酶活性改变与其对氟喹诺酮类药物耐药性的关系研究

用亚ＭＩＣ（药物最低抑菌浓度）连续递增式传代培养法获得了禽大肠杆菌（血清型为Ｏ１、Ｏ２、Ｏ７８）对氟喹诺酮类药物（ＦＱｓ）—诺氟沙星（ＮＦＬＸ）、依诺沙星（ＥＮＸ）、环丙沙星（ＣＰＬＸ）稳定的高度耐药菌株（ＭＩＣ提高≥１２８倍），通过对耐药菌株和敏感菌株ＤＮＡ旋转酶的分离、提取及活性检测，并进行统计学分析比较，研究ＤＮＡ旋转酶活性改变与细菌耐药的关系，结果表明：禽大肠杆菌对氟喹诺酮类药物产生耐药的一个重要因素为其ＤＮＡ旋转酶的活性改变。

辽西地区禽大肠杆菌耐药性分析

禽大肠菌病是由埃希氏菌属中的大肠埃希氏菌的某些血清型引起各种禽的肠道或肠道外感染的一种传染病.本病可导致胚胎和幼雏死亡.禽大肠杆菌病在国内外均有报导,随着养禽业的迅猛发展,本病的发病率与死亡率也大为增加,鸡群中普遍流行,给养禽业带来巨大的损失.由于抗菌药物的广泛使用,使禽大肠杆菌的耐药菌株大量出现给此病的临床治疗带来了困难.我们从辽西分离到56株禽大肠杆菌,并进行了耐药性的测试和分析,希望能为辽西地区甚至是辽宁省的禽大肠杆菌病临床合理用药提供参考.

致病性禽大肠杆菌菌毛研究进展

菌毛（Fimbriae）是大肠杆菌菌体表面的一种蛋白性突起．是致病性禽大肠杆菌（Avian pathogenic Escherichia Coli．APEC）致病的重要因素之一．对禽大肠杆菌在禽体内的定居、增殖，以及协作毒素释放等方面起着重要作用。它主要的功能是通过与其宿主组织表面相应的受体相互结合使细菌吸附于该组织表面而定居．故有些菌毛又称为定植因子。其黏附作用具有选择性．这与宿主细胞表面的特殊受体有关。本文就致病性禽大肠杆菌菌毛的相关研究情况进行综合报道。

禽大肠杆菌O_2、O_(78)及其耐药、融合菌株的外膜蛋白免疫研究

为了研究大肠杆菌O2、O78及其耐药、融合菌株外膜蛋白的免疫原性,用Sarkosyl处理和超速离心技术相结合的方法分别提取禽大肠杆菌强毒株O2、O78,耐药弱毒株O2(NorrChls)、O78(NorsChlr)及其融合双价弱毒株O2.78(NorrChlr)等5个菌株的外膜蛋白(OMPs),经SDS PAGE,结果均出现1条相同的相对分子质量在31000～43000之间的主要OMPs条带,表明5个菌株存在相同的OMPs成分.将3个耐药菌株的OMPs分别免疫小白鼠和鸡,结果均产生对O2、O78良好的同源及交叉免疫保护效果.用各耐药菌株的OMPs做包被抗原,ELISA方法都能交叉检测3个耐药菌株OMPs免疫鸡血清中IgG水平,且各IgG的消长曲线基本一致.

复方中草药“毒菌杀”对禽大肠杆菌及鸡白痢沙门氏菌的体外抑菌试验

观察了复方中草药“毒菌杀”的安全性及其对禽大肠杆菌及鸡白痢沙门氏菌的体外抑菌情况。结果发现“毒菌杀”安全性高,组成“毒菌杀”的各单味中药及其合剂对大肠杆菌的最低抑菌浓度MIC(g/mL)分别为板蓝根0.05、穿心莲0.05、黄芪0.025、黄柏0.05、柴胡0.05、生地0.05、甘草0.05、当归0.025,“毒菌杀”方剂为0.05;对沙门氏菌的MIC分别为板蓝根0.05、穿心莲0.025、黄芪0.025、黄柏0.05、柴胡0.025、生地0.05、甘草0.025、当归0.05,“毒菌杀”方剂为0.025;而牛胆汁对这两种致病菌的最低抑菌浓度分别为2%和1%。说明“毒菌杀”方剂对大肠杆菌、沙门氏菌具有明显的抑制作用。

广东地区水禽大肠杆菌血清型鉴定

禽大肠杆菌病是由大肠埃希菌的某些致病性菌株或某些致病血清型引起的一种非接触性传染病。表现为大肠杆菌性败血症、肠炎、卵黄性腹膜炎、输卵管炎、肝周炎、眼炎和大肠杆菌性肉芽肿等多种症状。防治大肠杆菌病的主要措施是应用疫苗及抗生素。制备疫苗的最大困难是大肠杆菌血清型众多,仅国内报道就有80余种,并且不同动物及不同地区流行的主要血清型不完全一样。O抗原又称菌体抗原,是大肠杆菌重要的抗原,

禽大肠杆菌高密度发酵与溶氧关系的研究

利用GUJS - 10C小型发酵罐分批培养禽大肠杆菌 ,通过平板计数、比浊计数的方法 ,对大肠杆菌高密度发酵中细菌生长与溶氧的关系进行分析。结果表明 :溶氧的规律性变化能够反映大肠杆菌生长的规律 ,即在细菌生长的适应期细菌数量较少 ,耗氧量少 ,溶氧曲线最高 ;随着发酵时间的增加 ,细菌不断增多 ,耗氧量也随之增加 ,溶氧曲线下降 ;达到对数生长期 ,曲线最低 ;进入稳定期 ,曲线趋于平稳 ;到发酵后期 ,细菌进入衰老期 ,溶氧曲线略有上升 ,这时可终止发酵。

1株禽大肠杆菌噬菌体的分离及杀菌效果评估

【目的】探索噬菌体作为控制养殖环境致病性大肠杆菌的新手段。【方法】本研究进行了大肠杆菌噬菌体的分离及相应指标评估。通过双层平板法从养殖环境中分离禽致病性大肠杆菌裂解性噬菌体。通过电镜及酶切鉴定、温度及酸碱稳定性、最佳感染复数、一步生长曲线及其在模拟环境中的杀菌效果对该噬菌体进行综合性评估。【结果】分离得到的噬菌体具有正多面体的头部和细而长的尾部结构,头部直径约98 nm,尾部长约123 nm,结合酶切鉴定结果初步判定该噬菌体为肌尾科双链DNA噬菌体。该噬菌体的温度耐受范围为37~50℃;酸碱耐受范围为pH 3.0~11.0。当感染复数为0.00001时产生的子代噬菌体滴度最高;一步生长曲线测定结果显示,该噬菌体潜伏期为20~40 min,裂解时间为80~100 min,裂解量为4133 PFU/cell。从该噬菌体对模拟环境中宿主大肠杆菌的杀菌效果可看出,浓度为1×10^(4)~1×10^(6) PFU/mL的噬菌体ФECP2-1对液体中目标大肠杆菌作用1~6 h,杀菌率均在99.9%以上;浓度为2×10^(4)~2×10^(6) PFU/g的噬菌体ФECP2-1对鸡粪中目标大肠杆菌作用5~10 h,杀菌率均在99%以上,该噬菌体对鸡粪中目标大肠杆菌杀菌效果略低于对液体中目标大肠杆菌的杀菌效果。【结论】ФECP2-1符合噬菌体类消毒剂相关特征,是一株具有良好应用前景的噬菌体,可作为一种生物消毒剂应用于养殖环境中禽大肠杆菌的防控。

禽大肠杆菌病疫苗研究进展

禽致病性大肠杆菌(APEC)是引起家禽多种肠外疾病如气囊炎、心包炎、肝周炎、蜂窝织炎及败血症的主要人畜共患病原菌。在过去的数十年间,试验了多种不同类型的疫苗用于本病的控制。鉴于APEC血清型较多且不同血清型之间缺乏交叉免疫保护,故生产上使用的APEC疫苗研究进展缓慢。作者对不同类型APEC疫苗进行了综述并提出未来的研究方向。

10味中药对畜禽大肠杆菌的体外抗菌活性试验

大肠杆菌可引起多种畜禽疫病，临床最常见的有仔猪黄、白痢，仔猪水肿病，鸡的败血症、心包炎、肝周炎、腹膜炎、肠炎，家兔的黏液性肠炎等。大肠杆菌病目前在国内大多数养殖场广泛流行，发病率和死亡率居高不下，严重威胁着畜禽养殖业的发展，给养殖业造成了巨大的经济损失。

泰安及周边地区禽大肠杆菌分离鉴定及耐药分析

对泰安及周边地区鸡大肠杆菌病的流行情况和致病性大肠杆菌的耐药性状况进行了比较系统的调查分析:对25株鸡源性大肠杆菌进行了分离纯化、生化试验,同时对所分离的菌株进行了耐药性测定及β内酰胺药物耐药基因TEM的检测等研究。结果表明:大肠杆菌对多种抗生素均产生了耐药性,对β-内酰胺类药物的耐药性也相当严重,对在药敏试验中检测出对头孢菌素类药物不敏感的菌株进行TEM基因检测,发现这些菌株均含有耐β-内酰胺酶耐药基因,与Genebank上登录的其他耐β-内酰胺酶耐药基因序列的同源性达到97%以上,仅存在个别的碱基突变。通过研究以期探明地区鸡源性大肠杆菌病的流行情况和细菌的耐药现状,从而为有效控制鸡大肠杆菌病的发生流行提供可靠的理论依据,以便制订出较为科学合理的预防和治疗措施,以提高养殖效益。

中草药对禽大肠杆菌病的防治研究

禽大肠杆菌病是全球范围内影响养禽业发展的一种重要的细菌病。禽感染后，急性者可表现为体温上升，腹泻而大量死亡，经卵感染或在孵化后感染的鸡胚，出壳后几天即大量死亡；慢性者可表现为剧烈腹泻。该病主要通过呼吸道感染或经孵种蛋裂缝使胚胎感染。该病可用疫苗进行预防，但由于其血清型繁多等原因，

沙拉沙星对人工感染禽大肠杆菌病和鸡白痢沙门氏杆菌病的治疗试验

盐酸沙拉沙星分别以５０、２５和１２．５μｇ／ｍｌ（以沙拉沙星碱基计）的浓度配备于饮水中，让鸡连续饮用６ｄ对致死量的大肠杆菌（Ｏ１３８）人工感染的３周龄肉鸡的保护率分别为８３．３％、７３．３％和６０％，与感染接种不治疗组存活率２０％比较差异均极显著（Ｐ＜０．０１）。按上述剂量与疗程用药对致死量的鸡白痢沙门氏杆菌人工感染１日龄肉鸡的保护率分别为１００％、９３．３％、８０％，５０μｇ／ｍｌ环丙沙星治疗对照组的存活率为９０％，感染发病不治疗组的存活率为４０％，检验结果表明沙拉沙星各用药组的存活率均比发病不治疗组高，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。

禽大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

鸡的大肠杆菌病是由大肠杆菌中的某些致病菌株引起的一类疾病的总称，是近年来养鸡业发病率最高、危害最为严重的疾病之一，各品种和年龄的鸡均可发生。本试验首先根据病死鸡的临床症状和病理变化等作出初步诊断，并通过实验室检查确诊。通过药物敏感试验选择大肠杆菌敏感的药物．提出治疗方案，推荐给广大养殖户，来减少发病后死亡带来的经济损失。