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禽戊型肝炎病毒CaHEV-GDSZ01株ORF3蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备
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作者 张玉倩 李长乐 +2 位作者 吕志航 姚鑫炎 张雪莲 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期224-229,共6页
旨在对禽戊型肝炎病毒的ORF3蛋白进行原核表达,并制备其多克隆抗体,为进一步研究aHEV ORF3蛋白生物学功能新型疫苗提供生物材料。通过RT-PCR方法扩增CaHEV-GDSZ01株ORF3基因,连接pET-32a(+)表达载体以构建重组原核表达质粒,并转化BL21(D... 旨在对禽戊型肝炎病毒的ORF3蛋白进行原核表达,并制备其多克隆抗体,为进一步研究aHEV ORF3蛋白生物学功能新型疫苗提供生物材料。通过RT-PCR方法扩增CaHEV-GDSZ01株ORF3基因,连接pET-32a(+)表达载体以构建重组原核表达质粒,并转化BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达;利用SDS-PAGE凝胶电泳分析ORF3蛋白的表达形式后进行纯化,并免疫新西兰白兔以获得兔抗ORF3蛋白多克隆抗体,利用间接ELISA试验检测多克隆抗体的效价,利用Western Blot试验和间接免疫荧光试验(IFA)检测多克隆抗体特异性。结果显示,成功构建了pET-32a-ORF3重组原核表达质粒,并通过原核表达系统成功诱导表达了27 ku不可溶性的aHEV ORF3重组蛋白;Western Blot试验和IFA试验结果显示,制备的多克隆抗体可以特异性识别ORF3蛋白,ELISA结果显示,多克隆抗体效价为1∶51 200。成功表达CaHEV-GDSZ01株的ORF3蛋白,并制备了其多克隆抗体。 展开更多
关键词 肝炎病毒 多克隆抗体 原核表达 免疫 ORF3蛋白
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人、猪和鸡血清中抗禽戊型肝炎病毒抗体的检测与鉴定 被引量:1
2
作者 荆胜涛 张红霞 +4 位作者 孙培明 董施伟 赵钦 张璐 周恩民 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第1期89-92,共4页
通过对人、猪和鸡血清中的抗禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)ORF2抗体的检测以及对阳性血清抗体特异性的鉴定,本研究结果表明,人、猪和禽血清中抗禽HEVORF2抗体阳性率为0.91%~62.5%。因为禽与哺乳动物HEV ORF2抗原具有共有的... 通过对人、猪和鸡血清中的抗禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)ORF2抗体的检测以及对阳性血清抗体特异性的鉴定,本研究结果表明,人、猪和禽血清中抗禽HEVORF2抗体阳性率为0.91%~62.5%。因为禽与哺乳动物HEV ORF2抗原具有共有的抗原表位,而阳性血清中抗禽HEV ORF2特异性抗原表位抗体的阳性率为41.3%~92.1%,提示人、猪和鸡都有感染禽HEV的可能性,这为进一步验证禽HEV可能造成的人兽共感染提供新的科学依据。 展开更多
关键词 肝炎病毒 肝炎病毒 禽戊型肝炎病毒特异性抗体 血清学调查
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禽副粘病毒2型(PMV-2)群特异性单克隆抗体的研究 被引量:2
3
作者 张国中 赖志 赵继勋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期188-190,共3页
禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )鸡胚成纤维细胞适应毒经差速离心和蔗糖密度梯度离心法提纯 ,免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,经间接ELISA方法筛选 ,有限稀释 3次克隆 ,获得了两株分泌PMV 2单克隆抗体的杂交瘤细胞株 6E... 禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )鸡胚成纤维细胞适应毒经差速离心和蔗糖密度梯度离心法提纯 ,免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,经间接ELISA方法筛选 ,有限稀释 3次克隆 ,获得了两株分泌PMV 2单克隆抗体的杂交瘤细胞株 6E9和 7E5。经鉴定两株单抗均为IgG1亚类 ,杂交瘤细胞的平均染色体分别为 96条和98条。细胞培养上清及腹水效价分别为 1∶2 5 6 0 0、1∶5 12 0 0和 1∶10 5、1∶10 7。 6E9和 7E5单抗能稳定分泌抗体且与NDV、AIV、EDSV无交叉反应。间接ELISA实验表明 4株PMV 2 (Yucaipa株、F4 株、F6株和F8株 )均含有单抗6E9和 7E5所针对的位点。 展开更多
关键词 副粘病毒2 单克隆抗体 异性
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我国家禽戊型肝炎病毒感染情况的调查 被引量:5
4
作者 耿彦生 张硕 +3 位作者 赵晨燕 汪葆玥 田克恭 王佑春 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期429-432,共4页
目的了解我国家禽戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法自我国15个省份采集鸡和鸭血清共计1647份,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测血清中HEV抗原和抗体;通过Nested PCR对陕西、西藏和海南的全部血清样本及其它抗原阳性样本分别进行HEV... 目的了解我国家禽戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法自我国15个省份采集鸡和鸭血清共计1647份,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测血清中HEV抗原和抗体;通过Nested PCR对陕西、西藏和海南的全部血清样本及其它抗原阳性样本分别进行HEV及禽HEV核酸检测。结果 1507份鸡血清中有54份为HEV抗体阳性,26份为HEV抗原阳性,抗原和抗体的阳性率分别为3.58%和1.73%;140份鸭血清中10份为HEV抗体阳性,2份为HEV抗原阳性,阳性率分别为7.14%和1.43%;鸡和鸭HEV抗原、抗体阳性率无统计学差异。在鸡、鸭血清标本中没有检测到HEVRNA。结论我国家禽存在HEV感染,但还需要进一步研究以确定感染的病毒是否为禽HEV或1-4型HEV跨种感染。 展开更多
关键词 肝炎病毒 肝炎病毒 HEV-抗原 HEV-抗体 血清学调查
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1982~1992年间印度浦那甲型和戊型肝炎病毒抗体在不同年龄组的检出率
5
作者 李军 《传染病信息》 1995年第2期54-54,共1页
本文对印度浦那甲型肝炎和戊型肝炎病毒抗体的年龄特异性检出率进行了研究,发现十年过程中 HAV 和 HEV 仍然是浦那的地方病、大多数 HAV 感染者为3岁到5岁,相反,HEV 感染极少发生在童年期,到成年早期才达到检出率高峰(33%~40%)。
关键词 肝炎病毒抗体 检出率 肝炎 流行病学 印度 地方病 异性 童年期 感染者 不同年龄组
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人工合成肽抗原检测戊型肝炎病毒IgM方法的建立与应用
6
作者 何红霞 貌盼勇 +4 位作者 洪世雯 白燕平 楼敏 朱雷 杨建洋 《传染病信息》 1997年第2期77-78,共2页
本课题采用合成多肽抗原建立了检测抗戊型肝炎病毒(HEV)-IgM的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,成本低、操作简便、快速、重复性好、特异性强。与抗甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)的IgM抗体无交叉反应,排除了RF... 本课题采用合成多肽抗原建立了检测抗戊型肝炎病毒(HEV)-IgM的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,成本低、操作简便、快速、重复性好、特异性强。与抗甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)的IgM抗体无交叉反应,排除了RF的干扰,且可被β- 展开更多
关键词 肝炎病毒抗体 酶联免疫吸附试验 肝炎病毒 肝炎病毒 肝炎病毒 交叉反应 建立与应用 重复性 异性 抗原检测
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鹅Ⅰ型禽副黏病毒F基因重组质粒的构建及其DNA免疫 被引量:1
7
作者 陈金顶 廖明 +1 位作者 赵明秋 辛朝安 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期7-11,共5页
通过RT PCR扩增出鹅Ⅰ型禽副黏病毒GPMV/QY97 1株F蛋白基因的cDNA ,并将F基因cDNA克隆到含CMV启动子的pCI载体上 ,构建这一基因的真核表达质粒pC GPMVF ,以此质粒肌肉注射 3周龄非免疫鸡 ,并分别于免疫后第 2、4、6周通过ELISA方法检测... 通过RT PCR扩增出鹅Ⅰ型禽副黏病毒GPMV/QY97 1株F蛋白基因的cDNA ,并将F基因cDNA克隆到含CMV启动子的pCI载体上 ,构建这一基因的真核表达质粒pC GPMVF ,以此质粒肌肉注射 3周龄非免疫鸡 ,并分别于免疫后第 2、4、6周通过ELISA方法检测抗体水平。结果证明 ,用重组质粒pC GPMVF免疫鸡 。 展开更多
关键词 副黏病毒 F基因 重组质粒 DNA免疫 异性抗体 免疫应答 基因工程疫苗
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丙型肝炎病毒感染标志检测的临床意义
8
作者 任丽君 阮秀花 《适宜诊疗技术》 1997年第4期1-3,共3页
随着丙型肝炎病毒(HCV)全基因序列及其基本结构的研究深入,应用分子生物学技术相继建立了多种HCV感染标志的检测方法,为HCV感染的实验室诊断、病程预后及抗病毒治疗评价提供了重要的科学依据.
关键词 肝炎病毒感染 检测方法 异性抗体 IgM抗HCV 感染标志 异性抗原
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采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体 被引量:3
9
作者 潘金顺 周镇先 +2 位作者 毕永春 吴超 周乙华 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第11期2500-2502,共3页
目的:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体。方法:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽,制备ELISA检测试剂,同时使用北京万泰生物药业公司生产的抗-HEV IgM抗体诊断试剂,分别检测33例戊型肝炎患者血清和344例普通人群血清... 目的:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体。方法:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽,制备ELISA检测试剂,同时使用北京万泰生物药业公司生产的抗-HEV IgM抗体诊断试剂,分别检测33例戊型肝炎患者血清和344例普通人群血清抗-HEV IgM,并对部分阳性标本用免疫印迹法(Western blot,WB)确认。结果:用本室ELISA试剂检测33例戊型肝炎患者血清,抗-HEV IgM均阳性,符合率为100%;用万泰公司试剂检测阳性31例,符合率为93.9%。344例普通人血清中,本室试剂检测抗-HEV IgM阳性11例,而用万泰试剂检测仅其中6例显示阳性;对本室试剂阳性而万泰试剂阴性的5例进一步用WB检测,抗-HEV IgM均阳性。结论:本室制备的ELISA试剂可准确高效地检测血清抗-HEV IgM。 展开更多
关键词 肝炎 主要免疫表位 酶联免疫吸附测定 异性IGM抗体
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抗-HEVIgA在急性戊型肝炎诊断中的临床应用评价 被引量:1
10
作者 孙传俊 《中国实用医药》 2015年第24期65-67,共3页
目的探讨急性戊型肝炎患者进行特异性Ig A抗体(抗-HEV Ig A)检测的临床价值和意义。方法采集48例疑似急性戊型肝炎患者的血清样本,同时采集同期进行体检的54例健康人群的血清样本,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定所有血清样本中抗-HEV Ig ... 目的探讨急性戊型肝炎患者进行特异性Ig A抗体(抗-HEV Ig A)检测的临床价值和意义。方法采集48例疑似急性戊型肝炎患者的血清样本,同时采集同期进行体检的54例健康人群的血清样本,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定所有血清样本中抗-HEV Ig A和特异性Ig M抗体(抗-HEV Ig M)水平。结果 48例疑似急性戊型肝炎患者中检测出43例(89.58%),抗-HEV Ig M阳性45例(93.75%),二者联合检测呈47例(97.92%);54例健康人群中检测出抗-HEV Ig A阳性3例(5.56%),抗-HEV Ig M阳性2例(3.70%),二者联合检测呈阳性4例(7.41%)。结论抗-HEV Ig A的检测灵敏度稍低于抗-HEV Ig M,但其作为抗-HEV Ig M的补充检测指标,二者联合检测时能够提高急性戊型肝炎诊断的灵敏度。 展开更多
关键词 急性肝炎 异性Ig A抗体 异性Ig M抗体
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合成肽作抗原酶免疫技术检测非甲-戊型肝炎病人血清中抗HGV
11
作者 程云 郭仁锋 +2 位作者 张建宗 曹阳 貌盼勇 《传染病信息》 1996年第3期91-91,共1页
本文应用人工合成肽作抗原建立了检测庚型肝炎病毒(HGV)抗体的酶免疫技术(EIA),最适抗原包被浓度为4ug/ml。在特异性验证的基础上检测34例非甲-戊5型肝炎病人血清和32例丙型肝炎感染病人血清。结果表明。
关键词 人血清 肝炎病毒 合成肽 抗原 酶免疫技术 肝炎 肝炎 异性 技术检测 抗体
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戊型肝炎是工业化国家的本土疾病:法国西南部历时超过13个月的23例患者分析并与甲型肝炎的比较
12
作者 Péron J.-M. Mansuy J.-M. +1 位作者 Poirson H. 纪泛扑 《世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册)》 2006年第11期20-20,共1页
Objectives -Hepatitis E virus (HEV) is responsible for acute hepatitis predominantly in developping countries. In Western Europe and in the US, cases of acute HEV infection are uncommon and occur primarily in traveler... Objectives -Hepatitis E virus (HEV) is responsible for acute hepatitis predominantly in developping countries. In Western Europe and in the US, cases of acute HEV infection are uncommon and occur primarily in travelers returning from endemic countries. The aim of this study was to describe patients with acute hepatitis E in South West France and compare them with patients with acute hepatitis A. Methods -23 consecutive patients over 13 months were analysed. Acute hepatitis E was diagnosed on the presence of specific serum antibodies or viral RNA detection in serum or stools. Real time PCR products from viraemic patients were sequenced. Results -All the HEV sequences belonged to genotype 3. Two patients (8%) died during their hospital stay, both suffered from severe underlying disease. Only 3 patients (13%) had travelled outside of Europe, within 3 months of the onset of disease. When compared to 23 patients with acute hepatitis A at the same hospital and during the same time frame, HEV-infected patients were older (54.4 ±16.6 vs 24.5 ±16.6, P < 0.05), had lower ALT levels (55.4 ×upper normal limit±48.6 vs 107.8 ×upper normal limit ±82.8, P < 0.05) and had lower incidence of recent travel outside of Europe (13%in the hepatitis E group vs 60%in the hepatitis A group, P < 0.05). Conclusions -Hepatitis E can be considered an autochthonous infection in South West France. All strains sequenced were related to genotype Ⅲ. When compared to hepatitis A, HEV-infected patients were older, had lower ALT levels and had a lower incidence of travel outside of Europe. 展开更多
关键词 肝炎 法国西南部 冶游史 正常值上限 急性肝炎 病毒感染 血清抗体 异性
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抗戊型肝炎病毒E2 IgM诊断急性戊型肝炎的敏感性和特异性 被引量:9
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作者 郑玲 柳丽娟 +6 位作者 胡莹盈 王艳丽 温珠妹 张宇 陈惠聪 张启云 江家骥 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期590-593,共4页
目的评价抗戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白重组抗原E2 IgM(抗-E2 IgM)诊断急性散发性戊型肝炎的敏感性和特异性。方法用酶联免疫吸附法检测176份急性散发性戊型肝炎和191份急性散发性非甲~非戊型肝炎患者血清中抗-E2 IgM,与国产传统试剂和... 目的评价抗戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白重组抗原E2 IgM(抗-E2 IgM)诊断急性散发性戊型肝炎的敏感性和特异性。方法用酶联免疫吸附法检测176份急性散发性戊型肝炎和191份急性散发性非甲~非戊型肝炎患者血清中抗-E2 IgM,与国产传统试剂和新加坡Genelabs试剂检测的IgM(GL-IgM)作比较;对抗-E2 IgM阳性血清检测血清中HEV RNA,采用logistic回归分析检测抗-E2 IgM和HEV RNA的相关因素。结果在176份急性戊型肝炎患者血清中,抗-E2 IgM的检出率为68.75%,国产传统试剂抗-HEV IgM检出率为56.25%,X2IgM=6.49,P<0.05。在191份急性非甲~非戊型肝炎血清中有37例(19.37%)抗- E2 IgM阳性,其中11例GL-IgM同时阳性;在158份抗-E2 IgM阳性血清中,有81例HEV RNA阳性(51.27%), 其中急性戊型肝炎的阳性率为57.02%,急性非甲~非戊型肝炎的阳性率为32.43%,23例抗-E2 IgM阴性的急性戊型肝炎患者的血清,无一例检测到HEV RNA。Logistic多因素回归分析发现,抗-E2 IgM的检出率与发病至入院时间、年龄、血清胆红素、血清氨基转移酶水平无关,血清丙氨酸氨基转移酶水平与HEV RNA水平呈正相关(P=0.024)。结论抗-E2 IgM是HEV急性期感染敏感性和特异性强的血清学指标;HEV感染仍是部分临床诊断为急性非甲~非戊型肝炎的病因;持续HEV病毒血症可能是影响急性戊型肝炎病情的重要因素。 展开更多
关键词 肝炎病毒E2 IGM 急性肝炎 敏感性 异性 肝炎抗体 血清学
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鸭肝炎Ⅰ型琼脂扩散试验的研究 被引量:9
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作者 张济培 冼琼珍 +2 位作者 黎雄亮 司兴奎 陈建红 《佛山科学技术学院学报(自然科学版)》 CAS 2002年第3期74-77,共4页
本试验用不同的鸭肝炎病料 ,通过氯仿去脂和反透析法进行病毒的提纯浓缩 ,研究鸭肝炎的琼脂扩散试验。结果显示用抗原检测抗体或用抗体 (血清 )检测病毒病原 ,均可达到 80 %的阳性检出率。试验中还发现 ,试验最佳的凝胶配方为 p H为 7.2... 本试验用不同的鸭肝炎病料 ,通过氯仿去脂和反透析法进行病毒的提纯浓缩 ,研究鸭肝炎的琼脂扩散试验。结果显示用抗原检测抗体或用抗体 (血清 )检测病毒病原 ,均可达到 80 %的阳性检出率。试验中还发现 ,试验最佳的凝胶配方为 p H为 7.2 ,w(Na Cl)为 8%和琼脂糖的质量分数为 1 % ,病雏鸭肝浓缩抗原最为理想。 展开更多
关键词 肝炎I 琼脂扩散试验 鸭病 抗原 抗体 免疫监测试验 异性试验 肝炎病毒
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人血清中抗禽戊型肝炎病毒抗体的检测与鉴定 被引量:4
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作者 张红霞 荆胜涛 +3 位作者 周恩民 孙培明 董施伟 李艳菊 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第8期1741-1744,共4页
目的:检测与鉴定人血清中抗禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体。方法:应用禽HEV ORF2基因重组抗原(ORF2-1)和肽抗原(Pep-8和Pep-9)以间接ELISA和Western blot方法检测和鉴定7234份人血清中抗禽HEVORF IgG抗体。结果:从7234份人血清中检出66份(阳... 目的:检测与鉴定人血清中抗禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体。方法:应用禽HEV ORF2基因重组抗原(ORF2-1)和肽抗原(Pep-8和Pep-9)以间接ELISA和Western blot方法检测和鉴定7234份人血清中抗禽HEVORF IgG抗体。结果:从7234份人血清中检出66份(阳性率0.91%)抗禽HEV ORF2抗体ELISA阳性血清,进行Western blot方法验证为特异性抗禽HEV ORF2抗体,其中28份血清(阳性率42.4%)含有特异性抗禽HEV肽抗原Pep-8或Pep-9抗体,其中女性21人,男性7人,HBsAg阳性3人。结论:青年人群血清中存在特异性抗禽HEV抗体,阳性率为0.387%,女性抗禽HEV ORF2抗体阳性率为男性的3倍,说明青年女性比青年男性更有可能感染禽HEV。 展开更多
关键词 肝炎 肝炎病毒 人抗肝炎病毒抗体 血清学调查
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丙型肝炎病毒1b型F蛋白抗原和抗体特异性表达的研究 被引量:2
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作者 高得勇 娄小丽 +5 位作者 王迎迎 汪妍妍 徐国荣 吴剑琴 夏利萍 刘亮明 《中国病毒病杂志》 CAS 2016年第1期22-26,共5页
目的研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)1b型F蛋白抗原在慢性HCV感染者中产生的特异性抗原和抗体的表达并检测其流行率。方法应用人工合成HCV 1b型的双框移动F蛋白多肽,采用ELISA方法,对其在慢性HCV感染者中F蛋白的流行率进行分析... 目的研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)1b型F蛋白抗原在慢性HCV感染者中产生的特异性抗原和抗体的表达并检测其流行率。方法应用人工合成HCV 1b型的双框移动F蛋白多肽,采用ELISA方法,对其在慢性HCV感染者中F蛋白的流行率进行分析;合成并纯化抗HCV 1b型F蛋白的抗体,采用Western blot方法验证抗体的特异性,包被纯化的F蛋白的特异性抗体,检测慢性HCV患者血清中F蛋白抗原的表达及其流行率。结果 HCV 1b型F蛋白的抗体在32例HCV 1b型慢性感染者中有19例可以检测到抗体的表达,其流行率为59.38%,而非HCV 1b型慢性感染者、健康对照及慢性HBV感染者中未检测到HCV 1b型F蛋白的抗体,其流行率为0;Western blot方法鉴定了人工合成的HCV 1b型F蛋白抗体的特异性及纯度;ELISA方法检测32例HCV 1b型感染者中有6例检测到HCV 1b型F蛋白抗原的表达(18.75%),而非HCV 1b型慢性感染者、健康对照及慢性HBV感染者中未检测到HCV 1b型F蛋白抗原的表达。结论丙型肝炎病毒F蛋白抗体的产生具有型免疫特异性的特点,不同基因型F蛋白产生的抗体不同,且慢性HCV感染者中有F蛋白抗原的特异性表达。 展开更多
关键词 肝炎病毒 1bF蛋白 抗原 抗体 异性表达
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禽戊型肝炎病毒衣壳蛋白多克隆抗体的制备及其在乳酸乳球菌中的表达
17
作者 黄宇晨 张跃 +5 位作者 马春丽 王芬 张丽丽 高铭扬 周恩民 马德星 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期197-201,共5页
将编码禽戊型肝炎病毒(a HEV)衣壳蛋白的ORF2基因片段克隆入原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组质粒p ET-30a(+)-ORF2。质粒经鉴定正确后转化入大肠杆菌Rosseta中筛选阳性菌,阳性菌经IPTG诱导后检测目的蛋白表达情况。用表达的重组蛋... 将编码禽戊型肝炎病毒(a HEV)衣壳蛋白的ORF2基因片段克隆入原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组质粒p ET-30a(+)-ORF2。质粒经鉴定正确后转化入大肠杆菌Rosseta中筛选阳性菌,阳性菌经IPTG诱导后检测目的蛋白表达情况。用表达的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,应用间接ELISA检测抗体效价。将衣壳蛋白主要抗原区域ORF2Δ250(251~606 aa)基因片段克隆入乳酸菌表达载体p TX8048中获得阳性质粒p TX8048-ORF2Δ250,质粒电转化入宿主菌Lactococcus lactis NZ9000中筛选阳性菌p TX8048-ORF2Δ250/L.lact is NZ9000。阳性菌经Nisin诱导后采用West ern-blot检测目的蛋白表达情况。结果表明,a HEV衣壳蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,制备的多克隆抗体效价为1∶216。重组菌p TX8048-ORF2Δ250/L.lactis NZ9000经Nisin诱导后,Western-blot检测到约55 ku的目的蛋白。上述研究结果将为鸡戊型肝炎乳酸菌疫苗研究提供参考。 展开更多
关键词 肝炎病毒 ORF2 多克隆抗体 乳酸乳球菌
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戊型肝炎病毒抗体检测的现状、问题与展望 被引量:6
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作者 周潇滢 孟继鸿 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期106-112,共7页
戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)感染是包括我国在内发展中国家成人急性肝炎的主要原因,在发达国家戊型肝炎的发病率也在不断升高,且在免疫抑制患者中可引起慢性感染,因此对HEV感染的诊断受到广泛重视。血清学检测,包括抗-HEV Ig... 戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)感染是包括我国在内发展中国家成人急性肝炎的主要原因,在发达国家戊型肝炎的发病率也在不断升高,且在免疫抑制患者中可引起慢性感染,因此对HEV感染的诊断受到广泛重视。血清学检测,包括抗-HEV IgM和IgG,仍是诊断HEV感染的主要手段,但目前存在的最大问题是检测抗-HEV抗体的试剂之间的敏感性和特异性差异很大,检测结果的符合率差。本文着重综述了国内外常用抗-HEV抗体检测试剂的组成以及检测结果,提出了今后可能有利于提高检测敏感性和特异性的研究构思。 展开更多
关键词 肝炎病毒(HEV) 血清学检测 敏感性 异性
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戊型肝炎病毒嵌合基因疫苗的初步研究
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作者 洪艳 阮冰 +3 位作者 杨连华 经络 王怡婷 陈勇 《浙江省医学科学院学报》 2005年第2期38-40,共3页
目的构建含戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框架(ORF2)和ORF3嵌合基因的重组质粒,并探讨其作为DNA疫苗的可能性。方法利用PCR方法获得约0.8kb的戊型肝炎ORF2片段和ORF3的完整片段,同时将2段片段克隆到同一真核表达载体pcDNA3中,构建出含... 目的构建含戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框架(ORF2)和ORF3嵌合基因的重组质粒,并探讨其作为DNA疫苗的可能性。方法利用PCR方法获得约0.8kb的戊型肝炎ORF2片段和ORF3的完整片段,同时将2段片段克隆到同一真核表达载体pcDNA3中,构建出含有ORF2和ORF3嵌合基因的质粒pcHEV23;该重组质粒作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,观察其在小鼠体内诱发的体液免疫应答和细胞免疫应答。结果质粒DpeHEV23免疫组小鼠特异性抗体水平明显高于对照组。T细胞增殖反应显著强于空质粒对照组(P<0.05),与生理盐水对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论重组质粒pcHEV23可诱发小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答,可为戊型肝炎DNA疫苗的研制提供依据。 展开更多
关键词 肝炎病毒 基因疫苗 步研究 BALB/c小鼠 细胞免疫应答 异性抗体水平 T细胞增殖反应 DNA疫苗 重组质粒 开放读码框架 PCDNA3 真核表达载体 体液免疫应答 嵌合基因 ORF2 PCR方法 显著性差异 异性体液 对照组 疫苗免疫
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HEV在猪群中的传播动力学:对人感染HEV的潜在影响 被引量:2
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作者 曹婕(摘译) 张占卿(审校) 《世界感染杂志》 2007年第5期440-440,共1页
戊型肝炎是一种人畜共患病,猪为主要存储宿主和传染源。人类可能通过摄入生猪肝脏而感染戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)。明确HEV在养猪场传播的精细机制有助于理解HEV感染,特别是在屠宰之前感染的年龄别模式。本文对日本养... 戊型肝炎是一种人畜共患病,猪为主要存储宿主和传染源。人类可能通过摄入生猪肝脏而感染戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)。明确HEV在养猪场传播的精细机制有助于理解HEV感染,特别是在屠宰之前感染的年龄别模式。本文对日本养猪场的一项大规模血清流行病学调查数据进行再分析,探讨HEV在猪群中的传播动力学。感染力(force of infection)以年龄别血清特异性抗体流行率表示,基本再生数(basic reproduction number)定义为一个初级感染个体引起的次级感染个体的平均数。 展开更多
关键词 HEV感染 传播动力学 猪群 infection) 血清流行病学调查 肝炎病毒 血清异性抗体 人畜共患病
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