河南省首例人感染H5N6禽流感病例的流行病学及临床特征

目的:分析河南省首例人感染H5N6禽流感病例的流行病学及临床特征。方法:2022年3月24日,河南省首次报告一例人感染H5N6禽流感确诊病例。参照《人感染动物源性流感预防控制技术指南(试行)》,疾控机构专业人员对病例开展现场流行病学调查,对涉及的工作场所、病例居住地以及禽类来源地等开展环境标本病原检测。结果:患者临床表现主要为高热、咳嗽、呼吸困难,后因呼吸衰竭死亡;病例有明确的禽肉相关暴露史,早期肺泡灌洗液、禽肉及工作场所环境标本H5N6禽流感病毒核酸均为阳性。结论:该例人感染H5N6禽流感病例通过职业暴露感染,未发现人传人的证据。

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型Re-6株)对散养鸭免疫效果的研究

为评估政府采购重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型Re-6株)对水禽的临床免疫效果,在县级疫苗储备库中,选取6家企业生产的重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型Re-6株)免疫散养鸭,结果显示,试验疫苗免疫安全性良好,能产生明显的免疫反应,除有1家企业疫苗效果较差外,其他5个企业生产的疫苗对鸭免疫效果良好,免疫接种后最早14d即产生合格抗体,免疫有效期最长达151d以上。

H5N1亚型Re-6株禽流感病毒灭活疫苗对散养鸡的免疫效果

为评估H5N1亚型Re-6株禽流感病毒灭活疫苗的临床免疫效果,在县级疫苗储备库中,随机提取7家企业生产的H5N1亚型Re-6株禽流感病毒灭活疫苗免疫农户散养鸡。结果显示,试验疫苗安全性好,均能产生明显的免疫反应,但不同企业的疫苗免疫效果有差异,免疫后最早21 d可产生合格抗体,免疫有效期最长可达142 d以上。

重组鸡白细胞介素6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用的观察

为评价重组鸡白细胞介素6(rChIL-6)在商品鸡体内对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用,将rChIL-6与重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)采用肌肉注射方式免疫57日龄麻鸡,分别在疫苗接种前和接种后第7、14、21、35、42天,检测H5N1亚型禽流感病毒(Re-6、Re-7)血凝抑制(HI)抗体水平。结果表明:与灭活疫苗同时注射rChIL-6组比单一注射疫苗组的H5N1 Re-6抗体滴度可提高1.6 log2,Re-7抗体滴度可提高1.8 log2。提示rChIL-6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)有显著的免疫增强作用。

家禽H5亚型禽流感(Re-6株)疫苗免疫抗体消长规律研究

为了解H5亚型重组禽流感Re-6株灭活疫苗在鸡、鸭免疫后的抗体消长规律,本实验分别选择一个鸡场和鸭场开展了临床免疫实验.实验鸡群于14日龄首免单价疫苗（Re-6株）和H5亚型二价疫苗（Re-6株＋Re-4株）后,在30日龄～200日龄不同时间点采血检测Re-6抗体,结果表明,二价疫苗比单价疫苗免疫后的Re-6免疫抗体产生早、效价高、抗体整齐度好;40日龄二免后20 d,二价疫苗和单价疫苗的Re-6免疫抗体消长规律趋于一致.实验鸭群于17日龄分别采用禽流感（H5＋H9）双价灭活疫苗和单价灭活疫苗（HSN1亚型,Re-6株）进行免疫,免后45日龄～205日龄不同时间点检测Re-6抗体,结果表明,双价疫苗与单价疫苗均可以诱导免疫鸭产生高水平抗体,而且两种疫苗的消长规律相似.此外,45日龄二免Re-6株疫苗的免疫程序要优于70日龄二免的免疫程序.本研究评估Re-6疫苗的防控效果,为家禽H5亚型禽流感免疫防制提供了实验依据.

H5N1亚型禽流感变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫原性研究

本实验对经反向遗传方法构建的重组禽流感H5N1亚型变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫效力进行研究。将Re-4株接种SPF鸡胚后37℃培养72h,鸡胚存活,无病变,HA滴度达29;以0.1mL(106.0EID50/0.1mL)的剂量鼻腔感染4周龄SPF鸡7d后血清HI抗体转阳,无任何症状,也不排毒;SPF鸡静脉致病指数(IVPI)为0;以Re-4重组株为种毒制备灭活疫苗,免疫SPF鸡后,3周后平均HI抗体效价达8.75log2;免疫鸡对亲本强毒株CKSX/06,以及变异株CKNX/06和流行株GSGD/96攻击提供完全保护。以上结果表明变异株灭活疫苗种毒Re-4株对SPF鸡胚和SPF鸡无致病性、适合鸡胚增殖、抗原针对性强,并且以该毒株制备的灭活疫苗具有良好的免疫效力,是研制预防H5N1亚型禽流感病毒山西变异株的理想疫苗种毒株。

禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究

为系统评估禽流感病毒(AIV)H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对家禽的免疫效果,本研究将Re-4株油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡和商品蛋鸡、商品鸭及商品鹅。免疫后每周采集血清测定HI抗体,绘制抗体消长曲线,免疫SPF鸡在免疫后2周、3周和50周时以105EID50剂量的强毒株(CK/SX/2/06)进行攻毒。研究结果显示,该疫苗对蛋鸡、鸭、鹅均具有良好的免疫效果,而且SPF免疫鸡血清HI抗体在4log2以上时能够完全抵抗CK/SX/2/06强毒的攻击。因此,根据实验结果推荐该油乳剂灭活疫苗的对上述禽类的免疫程序:商品蛋鸡10日龄颈部皮下注射0.3mL,60日龄和110日龄(开产前)时依次胸肌注射0.5mL和1.0mL进行免疫;商品鸭、鹅在2周龄均以0.5mL首免,5周龄和4月龄左右时以1mL的剂量肌肉注射方式进行加强免疫。

1株H6N5亚型禽流感病毒A/duck/Yangzhou/013/2008的全基因测序及遗传进化分析

在对华东地区家养水禽中流感病毒的带毒状况进行流行病学监测的过程中,采用常规的血清学试验和特异性RT-PCR方法,分离鉴定出1株H6N5亚型禽流感病毒A/duck/Yangzhou/013/2008(简称Dk/YZ/013/08)。为了探讨该亚型病毒在流感病毒生态分布中的作用,作者对Dk/YZ/013/08进行了全基因序列测定,并结合Gen-Bank中已收录的所有H6N5亚型病毒的基因组序列及其它参考序列进行了遗传进化分析。结果表明Dk/YZ/013/08的血凝素基因(HA)与近年中国台湾分离的鸭源毒株A/duck/Kingmen/E322/2004(H6N2)的核苷酸一致性最高(94%),推导的氨基酸剪切位点序列为"P-Q-I-E-T-R-G",为典型低致病性禽流感病毒的特征序列;神经氨酸酶基因(NA)与瑞士分离株A/mallard/Switzerland/WV4060167/2006(H3N5)的亲缘关系最近(核苷酸一致性96.9%);而碱性聚合酶2(PB2)基因则与A/duck/Zhejiang/11/2000(H5N1)的遗传距离最近,可能由H5N1亚型流感病毒提供,提示该毒株可能是一株重组病毒。

H5N6亚型禽流感病毒反向遗传疫苗株的构建及免疫保护试验

为应对抗原性已发生变异的第2.3.4.6分支H5N6亚型禽流感病毒(AIV)引发的潜在流行,本研究利用反向遗传操作技术,以A/Puerto Rico/8/34(PR8)的内部基因为骨架,以H5N6亚型AIV A/Chicken/SC/6/2014(C6)的基因组为模板,经RT-PCR扩增其HA及NA基因,并对HA基因进行分子修饰,去除与H5亚型AIV致病力有关的HA蛋白裂解位点处的多个碱性氨基酸,使其获得低致病性AIV的分子特征(即将-PLRERRRKR-突变为-PQRETR-),成功构建了H5N6亚型AIV疫苗候选株r C6。免疫效力试验表明,r C6重组灭活疫苗可以诱导产生高水平的血凝抑制抗体。免疫攻毒保护试验表明,r C6重组灭活疫苗可以提供SPF鸡抵抗同源和异源H5N6病毒100%的保护,而针对第2.3.4分支的Re-5疫苗仅能提供大约10%的保护。利用反向遗传技术构建的r C6重组疫苗候选株为该分支病毒的防控提供了有益的尝试。

禽流感病毒新疆分离株1/96(H14N5)非结构蛋白基因克隆及序列分析

研究应用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒分离株 A/ Chicken/ Xinjiang/ 1 / 96(H1 4 N5) ,提取病毒基因组及病毒感染鸡胚绒毛尿囊膜细胞信使 RNA,运用 RT-PCR技术扩增病毒分离株的 NS1和 NS2基因 c DNA,克隆后进行序列测定。序列测定后分析结果表明 。

2006年人禽流感H5N1毒株PA基因特性、变异和进化

目的通过对人禽流感H5N1毒株PA基因序列的变异分析,揭示毒株PA基因特征、变异与进化。方法检测广东地区人禽流感H5N1毒株PA基因核苷酸序列,同时检索全球人禽流感H5N1毒株PA基因序列,采用MEGA4.0软件对检索的人禽流感H5N1毒株PA基因核苷酸序列进行比对和分析;并结合流行病学资料对变异毒株进行进化速度分析。结果PA蛋白呈酸性,等电点pH5.4。1997-2006年52株毒株PA基因核苷酸序列同源性分成两组,1997年毒株为第一组(G1),2003-2006年香港、越南、泰国、印尼、中国大陆毒株、土耳其、伊拉克、阿塞拜疆、埃及毒株为第二组(G2)。PA基因114个氨基酸位点置换,占15.9(114/716),其中2003-2006年毒株PA基因有17个氨基酸位点不同于1997年毒株。PA基因Ks值为30.9×10-6～46.1×10-6Nt/d,Ka值为4.50×10-6～8.13×10-6Nt/d;而PA基因的同义突变速度是错义突变速度的5.7～6.9倍,显示PA基因受到机体免疫压力较小;检验发现PA基因进化存在负选择性压力。PA基因中潜在的7个糖基化位点基本稳定,毒株IDNS-569H-06的PA基因半胱氨酸发生置换(S224C)。结论PA基因进化分成两系列,PA基因进化特点是自发突变较快,而受到机体免疫机制压力较小;A基因与其它多聚酶基因(PB2和PB1)比较,核苷酸序列同源性和进化在时间特征和地区特征方面具有一致性;来自中国大陆的毒株进化值得关注。人禽流感H5N1毒株PA基因在自然界变异频繁,可能影响HN毒株致病性和在人-人传播能力。

H5N1亚型重组禽流感病毒灭活疫苗(Re-6株)田间试验效果观察

为验证重组禽流感病毒(H5N1亚型)灭活疫苗(细胞源,Re-6株)对家禽的安全性和免疫效果,通过注射3个鸡群7 580只,注射疫苗后连续2周观察鸡只的精神状态、采食量、粪便及鸡群死亡率,均未发生异常情况,与注射之前无明显差异。对其中2群35日龄凤翔麻鸡疫苗注射前后采血,按照《高致病性禽流感免疫技术规范》(NYT769-2004血凝抑制(HI)试验操作进行HI抗体效价测定。结果显示,第1、2群疫苗免疫后15、21、30、45、60、75 d的免疫抗体合格率分别为18.64%、51.02%、84.21%、91.07%、88.68%、75.00%与24%、100.0%、97.92%、100.0%、95.38%。表明在田间试验条件下,重组禽流感病毒(H5N1亚型)灭活疫苗(细胞源,Re-6株)安全性高、副反应小,免疫效果相对较好。

规模化旱养肉鸭禽流感疫苗H5N1(Re-6)株免疫程序的研究与推广

高致病性禽流感是由正黏病毒科、流感病毒属A型H5或H7等亚型流感病毒引起的,以禽类为主的高度接触性传染病,近年来在全球范围内已呈多发态势,造成了相当大的经济损失和政治影响,并直接威胁到人类生命及公共卫生安全。

对重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)在家禽免疫效果方面的调研

2006-2007年，通过检测免疫注射H5N1重组禽流感病毒灭活疫苗（Re-1株）后3～4周的444个鸡场、66个鸭场和28个鹅场共计16140份血清中H5亚型禽流感血凝抑制抗体水平，比较A、B、c、D、E5个不同厂家的疫苗对鸡、鸭、鹅免疫效果。结果显示：重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1株）对鸡的免疫效果明显好于鸭和鹅；不同厂家疫苗质量和免疫效果有差异，其中A厂疫苗质量和免疫效果最好。

H5亚型禽流感(Re-4+Re-5株)疫苗对不同禽群的免疫效果比较

为了摸清H5亚型禽流感(Re-4+Re-5株)疫苗对不同禽群的免疫效果,以及时发现、分析免疫中存在的问题,发现免疫不合格的及时进行补免,确保山东省不发生疫情,本研究使用H5亚型禽流感(Re-4+Re-5株)灭活疫苗免疫鸡、鸭、鹅等不同家禽,测定其免疫抗体合格率。结果表明,加强免疫H5亚型禽流感(Re-4+Re-5株)灭活疫苗可使鸡群达到100%免疫抗体合格率,但鸭群的免疫抗体合格率不理想。

湖北省部分地区规模化蛋鸡场H5N1 Re-6亚型禽流感疫苗免疫效果调查

禽流感（avian infl uenza,AI）是由A型流感病毒（Avian infl uenza virus,AIV）感染禽类引起的一种从呼吸系统到全身严重败血症等多种症状的高度接触性传染病。目前,对我国家禽产业危害最大的高致病性禽流感病毒是H5禽流感病毒,几乎所有的规模化蛋鸡场都进行了H5禽流感疫苗的预防接种。为了解湖北省规模化蛋鸡场H5N1 Re-6亚型疫苗免疫后抗体滴度,本研究于2014年1～12月期间在湖北省13个地区选择不同规模化蛋鸡场,随机采集2079份蛋鸡血样,用血凝抑制（hemagglutination inhibition,HI）实验检测了H5N1 Re-6亚型禽流感抗体,并对测定结果进行了统计与分析。结果显示,规模化蛋鸡场H5N1 Re-6亚型抗体滴度在6 log2以上的样品数占89.2%,能够保护鸡群抵抗同型病毒的感染。但H5N1 Re-6亚型禽流感抗体滴度整体不高,且仍有少量地区H5N1 Re-6亚型禽流感免疫合格率为60%～80%,提示部分鸡群一旦感染该型病毒,仍然存在发病的危险。

1例H5N6禽流感并发重度ARDS患者行ECMO联合俯卧位通气治疗的护理

总结1例患者感染H5N6禽流感并发重度急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者应用体外膜肺氧合(extracorporeal membrane oxygenation,ECMO)联合俯卧位通气治疗的成功救治护理经验。护理要点包括:组建多学科MDT特医特护团队,制定个性化诊疗方案;做好ECMO运行监测;实施精细化俯卧位通气治疗、严格肺保护策略;严密隔离,做好感染预防;加强营养支持及促进早期康复。经过40 d的积极抢救,患者成功转出ICU,治愈后出院。

一起人感染H5N6流感病毒事件引发的禽间流行病学调查

2022年3月24日,河南省卫健委通报,台前县一名鸭屠宰分割人员感染H5N6亚型流感病毒。为调查可能的传染源、传播途径,降低禽间疫情发生风险和公共卫生风险,重点对该病例工作的台前县某食品公司及周边3 km范围内易感动物开展了禽流感紧急流行病学调查和抽样监测,并对全县禽养殖场户开展了禽流感流行病学调查和监测。在该食品公司的鸭头和环境样品中检出H5N6亚型流感病毒核酸阳性,但在养殖场及野鸟栖息地的所有样品中均未检出病原阳性。分析认为:该病例通过密切接触携带病毒的鸭体而感染的可能性较大;病例所感染病原很有可能是通过带毒野禽引入的,同时也不排除家禽跨区域调运引入的可能。当地家禽发生高致病性禽流感疫情的风险较低,但不能忽视对禽流感的防控。

沂南县某蛋鸡场新城疫、禽流感H_5亚型(Re-5株)抗体水平的监测

新城疫、禽流感作为危害养禽业的主要传染病,通过其抗体水平监测,分析免疫状态,对鸡群合理饲养,确保养鸡业健康发展。本次检测沂南县某蛋鸡场血样50份,分离血清,通过微量血凝及血凝抑制试验(HI)进行新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体水平监测。试验结果表明,新城疫平均HI抗体效价为9.4 log 2,禽流感H5亚型(Re-5株)平均HI效价为7.64 log 2,说明整场免疫合格,但鸡群需要补种禽流感H5亚型二联油乳剂灭活苗。

费县养鸡场新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体监测

本次检测费县某蛋鸡场血样30份,分离血清,通过微量血凝及血凝抑制试验(HI)进行新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体监测。结果表明,该鸡场新城疫HI抗体效价≥5log2的占87%,新城疫免疫合格;而禽流感抗体效价≥5log2的占67%,禽流感H5亚型免疫失败,鸡场必须补免或重免禽流感H5亚型二联油乳剂灭活苗。