重组鸡白细胞介素-2对禽流感灭活疫苗的免疫增强效果评价

鸡白细胞介素-2(白介素-2、rCh IL-2、IL-2)是由T淋巴细胞分泌并参与机体免疫应答的一类细胞因子,具有多种生物学功能。IL-2可提高辅助性T细胞数量和活性,活化巨噬细胞,诱导和增强自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)等多种杀伤细胞的分化和效应功能,增强机体的细胞免疫功能。

不同免疫剂量禽流感灭活疫苗对蛋种鸡产蛋率及抗体效价的影响

为评估不同免疫剂量禽流感灭活疫苗对父母代蛋种鸡产蛋率及抗体效价的影响,在河北省某海兰褐蛋种鸡场挑选产蛋稳定的720羽55周龄蛋种鸡,平均分为6组,每组4个重复,每个重复30羽;试验组分别胸部皮下注射0.2、0.3、0.5、0.7 mL/羽的重组禽流感病毒H5+H7三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株+Re-12株,H7N9 Re-3株),同时设0.5 mL生理盐水组及不免疫空白对照组;统计免疫前及免疫后1~4周各组的产蛋率,并分别在免疫前及免疫后3、6、10、14周采血,检测其抗体水平。结果显示:免疫后2周,0.7 mL组产蛋率下降幅度最大,与对照组差异极显著(P<0.01),而0.2 mL组下降幅度最小,与对照组差异不显著(P>0.05)。各免疫组免疫后3周的H5N1 Re-11抗体水平与免疫前相比均显著上升(P<0.05),免疫后14周0.2 mL组与0.7 mL组抗体滴度最高,均为8.60log2;免疫后3周的H7N9 H7-Re3抗体水平与对照组相比均显著上升(P<0.05),且各免疫组间的上升幅度差异均不显著(P>0.05),免疫后14周,0.7、0.3、0.2 mL组的抗体滴度较高,均在7.60log2以上。结果表明,0.2 mL/羽的免疫剂量对蛋鸡产蛋性能影响最小,且诱导的抗体水平及其维持时间均与0.7 mL/羽相当,适于作为产蛋期禽流感的最佳免疫剂量。本研究为养鸡场产蛋期禽流感最适加强免疫剂量的选择提供了依据。

高致病性禽流感灭活疫苗的认知和应用误区

高致病性禽流感(HPAI)是一种致命性较高的禽流感病毒,对家禽养殖业和人类健康都具有极大威胁。为了预防和控制HPAI的传播,人们研发出了HPAI灭活疫苗,但是在其认知和应用过程中也存在一些误区。

禽流感灭活疫苗对鸡群的免疫防控

1禽流感病毒特性禽流感病毒是一种禽类流感病毒,目前已知有甲、乙、丙、丁、戊等多种亚型,其中最常见的是A型和B型两种,根据其病毒抗原差异,可将禽流感病毒分为A/BK/A和B/BK/B等几种亚型。在感染禽类过程中,禽流感病毒可通过呼吸道或消化道进入人体,进而在人体内扩散蔓延。其中,A型禽流感病毒致病性最强,在临床上表现为高致病性,同时也是造成禽流感疫情的主要原因。

重组鸡白细胞介素-2对禽流感灭活疫苗免疫增强作用的研究

为研究重组鸡白细胞介素-2(IL-2)对H5N1亚型禽流感灭活苗的免疫效果,将重组IL-2蛋白和禽流感灭活疫苗联合免疫14日龄SPF鸡,免疫后每周测定一次血清抗体效价﹑脾脏T淋巴细胞亚群,最后计算攻毒保护率。试验结果表明:重组IL-2蛋白具有增强禽流感疫苗免疫效果的作用,提高了血清中的抗体水平﹑增加了脾脏T淋巴细胞CD4+﹑CD8+亚群数量。

实时荧光PCR技术快速鉴别检测H5、H9、H7亚型禽流感灭活疫苗的研究

选取H5、H9、H7亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,利用PrimerExpress2.0软件设计了各自亚型的特异性引物和Taqman MGB探针,利用实时荧光RT-PCR一步法建立了H5、H9、H7亚型禽流感灭活疫苗的鉴别检测方法,该方法特异性好,重复性佳,对其他疫苗无交叉反应。结果表明实时荧光PCR方法为禽流感灭活疫苗提供了一种特异、敏感、快速和简洁的鉴别检测方法。

三种禽流感灭活疫苗对农村散养鸭的免疫效果比较

采用重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)、禽流感灭活疫苗(H5亚型,N28株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗三种疫苗免疫农村散养鸭,结果表明,在一次免疫和加强免疫中,重组禽流感灭活疫苗、禽流感灭活疫苗的抗体效价都分别明显高于H5-H9二价灭活疫苗同期的H5抗体效价,因此对水禽免疫宜使用重组禽流感灭活疫苗或禽流感灭活疫苗;加强免疫明显比一次免疫效果好,应用禽流感灭活苗对散养鸭免疫,必须加强方可达到理想的免疫效果。

山东省2011年春季中标禽流感灭活疫苗质量检测及抗体消长规律分析

为了摸清山东省高致病性禽流感疫苗的质量情况,对2011年春季山东省3个中标厂家生产的重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)进行了质量检验和疫苗的抗体消长规律的跟踪。试验结果显示:除L厂家的2011010批次、G厂家的2011012批次有菌外,3个厂家的其余33批次灭活疫苗的物理性状、灭活检验和无菌检验均全部合格。免疫SPF鸡3周后,除Q厂家2011005批次疫苗外,其余34批疫苗HI抗体效价均≥6.0log2,产品达到质量标准要求。抗体消长规律实验表明,3个厂家的疫苗免疫SPF鸡4周即可达到高峰值,Re-4 HI抗体水平≥9.5log2,Re-5 HI抗体水平≥8.0log2,至25周时,仍维持在高抗体水平:Re-4 HI抗体水平≥9.0log2,Re-5 HI抗体水平≥7.8log2。从总的趋势看,L厂家的疫苗免疫抗体效价好于Q厂家和G厂家。

鼻腔免疫禽流感灭活疫苗对鸡呼吸道肥大细胞分布的影响

用添加CpG的禽流感病毒(H5亚型)灭活疫苗对7日龄罗曼公鸡进行鼻腔免疫,14日龄加强免疫一次;分别于首免后第3、5、7周剖杀,取鼻腔、喉部、气管、气管叉及肺组织,通过甲苯胺蓝染色法显示肥大细胞,观察呼吸道各部位肥大细胞的分布及数量变化。结果显示,首免后第3周气管和气管叉黏膜中的肥大细胞数量显著增加(P<0.05),第5周时喉部和气管叉黏膜中的肥大细胞数量显著增加(P<0.05),气管黏膜中肥大细胞数量也极显著增加(P<0.01),第7周肺中的肥大细胞数量显著增加(P<0.05);肥大细胞的数量在喉部最多,气管叉次之,气管和肺较少。试验结果表明,局部黏膜免疫可增加呼吸道肥大细胞的数量,肥大细胞可能参与黏膜免疫反应。

禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)与同类产品对鸭和鸡免疫后血清学比较试验

为评价禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)与同类产品对不同日龄鸭及SPF鸡的免疫效果,将该疫苗与国内两家禽流感生产企业的2批重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-5株)分别免疫鸭和SPF鸡,免疫后14、21、28、42d采血测定各免疫组的HI抗体效价。禽流感灭活疫苗(D7株)以0.25 mL剂量免疫鸭后14 d,所有免疫组鸭的HI抗体几何平均滴度(GMT)即能达到6log2以上,28d HI抗体GMT达到峰值9.1log2,而两批重组禽流感灭活疫苗以0.5 mL剂量免疫鸭21 d后HI抗体GMT均没有达到6 log2;两种疫苗分别免疫21日龄SPF鸡21 d后各免疫组的HI抗体GMT基本相似。试验结果表明,禽流感灭活疫苗(D7株)对鸭的免疫效果要明显优于重组禽流感灭活疫苗(Re-5株),而对鸡的免疫效果相似。

长链CpG寡脱氧核苷酸DNA重组质粒对禽流感灭活疫苗免疫应答的影响

为明确导入长链CpG寡脱氧核苷酸3个DNA重组质粒对禽流感H5亚型灭活疫苗的免疫应答的影响,将21日龄试验雏鸡随机分为6组,即健康对照组(A组)、疫苗对照组(B组)、空载体对照组(C组)、pUC26免疫促进组(D组)、pUC30免疫促进组(E组)及pUC44免疫促进组(F组),对6组雏鸡在首免后1～8周(WPI)检测其HI抗体水平并在1、4及8WPI测定脾脏、法氏囊及胸腺免疫器官指数。研究结果表明:在2WPI,D(P<0.01)、F(P<0.01)及E组(P<0.05)HI抗体水平极显著或显著高于C组;在3WPI,F组HI抗体水平分别显著高于B(P<0.05)、C(P<0.05)及E组(P<0.05);在5WPI,F(P<0.01)和D(P<0.05)组HI抗体水平极显著或显著高于C组;在6WPI,F组HI抗体水平显著高于C组(P<0.05);在8WPI,F组HI抗体水平极显著高于B(P<0.01)或C组(P<0.01)。在4WPI,A组胸腺指数极显著或显著高于C(P<0.05)及D组(P<0.01),E组胸腺指数显著高于D组(P<0.05);在8WPI,E组脾脏指数显著高于A组(P<0.05)。

不同厂家不同品种禽流感灭活疫苗免疫效果评价

高致病性禽流感对养禽业的危害非常严重，世界动物卫生组织（OIE）将高致病性禽流感列为必须报告的动物传染病和A类传染病，我国将其列为一类动物疫病。为了有效预防和控制禽流感，减少对养禽业的危害，我国对高致病性禽流感实行强制免疫政策。为了解不同厂家禽流感疫苗的免疫效果，

白羽肉鸭免疫重组H5亚型禽流感灭活疫苗后体液抗体和细胞因子水平变化研究

选取健康无免疫白羽肉鸭160羽分为A、B、C、D、E五组。A组～D组分别免疫0.5mL、0.5mL、0.8mL、1mL重组H5亚型禽流感油乳剂灭活疫苗,E组为非免疫对照组。在39日龄,B组1mL剂量进行二免。免疫后,每隔5d用血凝抑制试验和酶联免疫吸附测定分别监测体液抗体和细胞因子(r-IFN、IL-2、IL-4和IL-8)浓度水平。结果表明,A、B、C、D各组试验鸭在疫苗免疫后体液抗体和细胞因子均出现增长并呈一定相关性,E组无增长趋势。

禽流感灭活疫苗接种不同日龄樱桃谷肉鸭免疫效果比较

使用重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1株）免疫我市广泛养殖的樱桃谷肉鸭，把该鸭分成A（8日龄）、B（10日龄）、C（15日龄）三组，结果表明，不同日龄该品种鸭1次性接种疫苗后其产生的免疫抗体滴度日龄大的比日龄小的高，在疫苗接种后21d采样，免疫抗体平均滴度在1：30以上，1：16以上的合格率都达到了85％以上。建议在防控高致病性禽流感中，对8～15日龄的樱桃谷肉鸭接种该疫苗，就可达到要求的免疫效果。

禽流感灭活疫苗(H5N2,N28株)和重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫鸡和鸭后抗体消长规律的比较研究

禽流感灭活疫苗（H5N2，N28株）和重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re-1株）各3批，以重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re．1株）推荐的免疫程序和剂量分组免疫5周龄SPF鸡和5周龄非免疫鸭。免疫后定期采集血样，测定血清HI抗体效价，分别计算各免疫组鸡和鸭HI抗体效价的几何平均数，绘制各批疫苗免疫鸡和鸭后HI效价消长曲线，并分别对两种疫苗免疫鸡和鸭后各时期的HI抗体效价进行t检验。结果为：①免疫后1周，各免疫组均未测到HI抗体；②鸡免疫后4～5周，HI抗体效价达到峰值1：2^6.0～1：2^7.0，随后2周下降相对较快，平均每周下降0．3—0．7个滴度，之后HI抗体效价缓慢下降，直到试验结束，平均每周下降0．04～0．17个滴度；③鸭首次免疫后第3周各免疫组HI抗体效价达到1：2^4.0～1：2^5.3，加强免疫（首次免疫后第3周）后，HI抗体效价迅速升高。加强免疫后第3周（首次免疫后第6周）HI抗体效价达到最高值1：2^10.6-1：2^11.7，且在峰值水平维持3周，之后1周下降相对较快，平均下降1．2～2．7个滴度，然后缓慢下降，到首免后24周平均每周下降0．28～0．39个滴度，24周除049H5N2批疫苗免疫组外，其他各批免疫鸡HI抗体效价均小于1：2^4.0；④免疫后3周内，两种疫苗刺激鸡产生的HI抗体效价均高于相应批次疫苗免疫鸭产生的HI抗体效价，免疫后第2周相差1．9—2．3个滴度，免疫后第3周相差1．6～2．0个滴度；⑤两种疫苗免疫鸡和鸭后，各时期HI抗体效价t检验差异均不显著（P〉0．05）。以上结果表明，两种疫苗免疫SPF鸡和非免疫鸭后，HI抗体效价消长规律一致，两种疫苗免疫后各个时期的HI抗体效价在统计学上差异均不显著（P〉0．05）。

重组SEA增强H5亚型禽流感灭活疫苗对肉鸡的免疫效果研究

为评价重组葡萄球菌肠毒素A(rSEA)对H5亚型禽流感病毒(AIV)灭活疫苗免疫效果的影响,本研究以原核表达的rSEA为免疫增强剂,制备成含有rSEA高(167μg/0.5 mL)、低(16.7μg/0.5 mL)两种剂量的AIV油乳剂灭活苗,分别免疫7 d龄肉鸡,通过检测免疫鸡AIV HI抗体滴度及外周血CD4+/CD8+值评价其免疫效果。HI抗体检测结果显示,免疫后2周高剂量组HI抗体平均滴度为5.6 log2,低剂量组为4.2 log2,而无rSEA疫苗对照组为2.9 log2(p<0.01);同时在免疫后前4周,rSEA免疫组的HI抗体平均滴度及峰值与对照组相比均差异显著(p<0.05)。T淋巴细胞亚群检测结果显示,肉鸡免疫高剂量rSEA的灭活苗后,其外周血CD4+百分含量及CD4+/CD8+值均显著高于对照组(p<0.05)。上述结果表明,rSEA作为AIV灭活苗免疫增强剂,能够快速诱导较高的HI抗体滴度,同时也可增强细胞免疫反应,有效缩短免疫空白期,使肉鸡短时间内产生较强的免疫应答反应。

禽流感-新城疫重组二联活疫苗与重组禽流感灭活疫苗组合免疫效果观察

为进一步了解、掌握禽流感-新城疫重组二联活疫苗及与重组禽流感灭活疫苗组合使用的免疫效果,本研究以麻花鸡作为试验对象,制定了4种不同的免疫程序,分别对4组试验鸡群进行免疫,通过测定各组鸡只产生的免疫抗体效价和免疫抗体合格率,以评价二联活疫苗及与禽流感灭活疫苗的免疫效果。试验结果表明:禽流感-新城疫重组二联活疫苗单独用于肉鸡禽流感H5免疫预防抗体效价低于4 log2;建议禽流感-新城疫重组二联活疫苗可以与重组禽流感病毒灭活疫苗组合使用,两种疫苗免疫时间间隔2周左右,以免抑制机体产生对新城疫的免疫应答。

禽流感灭活疫苗游离甲醛含量测定

近年来，禽流感灭活疫苗在预防禽流感的爆发和流行中起到重要作用，但是经常有产蛋鸡群免疫疫苗后出现不同程度的产蛋率不可逆下降现象，造成严重经济损失，有资料报道有可能与疫苗中甲醛含量超标有关。因目前禽流感灭活疫苗多采用甲醛溶液灭活处理，世界动物卫生组织（OIE）规定生物制品中甲醛浓度应在0．1％以下，但不同厂家的疫苗中甲醛含量可能存在差异，

重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫效果比较试验

选用2个厂家生产的重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫慢大型鸡群,于1、7、13、16、18日龄采用HI血凝抑制试验测定其母源抗体水平,确定其首免时间为18日龄;于23、28、36、42、56、70日龄采用HI血凝抑制试验测定其免疫后抗体水平,结果表明:对慢大鸡产生的H5抗体效价,A、B组差异显著(P<0.05);A、C组差异极显著(P<0.01);B、C组差异极显著(P<0.01);对慢大鸡产生的H9抗体效价,A、B组差异不显著(P>0.05);A、C组差异显著(P<0.05);B、C组差异极显著(P<0.01),但在同等免疫剂量条件下,一定时间内,两个厂家生产的重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)对慢大型鸡均能产生较快、较高水平的H5抗体效价。