人用H7N9禽流感病毒疫苗临床研究进展及预防控制

从2013年我国确诊首例人感染H7N9禽流感病毒至今,中国经历了5波疫情流行,该病毒对人表现出高致病性和致死性,严重威胁了人类生命健康安全。接种疫苗可明显降低病毒感染率和死亡率,本文就目前国内外已完成的对人用H7N9流感病毒疫苗免疫效果评价的临床试验作一综述。

重组禽流感病毒H5亚型灭活疫苗的质量分析及发展方向

对主要用于我国高致病性禽流感防控的重组禽流感病毒H5亚型灭活疫苗的种类和使用情况,以及国内高致病禽流感流行株的主要分支情况作一介绍。随着病毒抗原性的不断变异,疫苗毒株也需随之进行更换,因此必须使用匹配相应分支的疫苗才能取得理想的防控效果。目前国内重组禽流感病毒H5亚型灭活疫苗的生产现状是共有10家生产企业,其中2个厂家采用悬浮细胞工艺生产,其余8个厂家均采用鸡胚工艺进行疫苗生产。笔者根据企业上报的产品批签发报告情况,以2016年至2017年农业部规定的高致病性禽流感强制免疫疫苗重组禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)为例,着重从疫苗的安全性和效力两方面对4家重组禽流感灭活疫苗生产企业共计488批次产品的批签发检验数据进行了质量分析。从Re-6株、Re-7株、Re-8株不同组分效价的比较可以看出,所有批次疫苗抗体效价几何平均滴度(GMT)至少高于国家标准1个滴度以上,而Re-6株和Re-8株组分抗体效价(GMT)高于国家标准2个滴度以上。虽然产品的效价都超过了国家标准,但抗体水平还是参差不齐,较高产品的3个组分抗体效价(GMT)比较低的要高出1.5个滴度以上。各生产企业产品批间差异较大,这虽有生产工艺不断成熟和优化的因素,但对于相近批次产品批间差异出现较大差异,则说明企业生产工艺并不十分稳定。4个企业在2017年生产的疫苗各组分抗体效价GMT整体水平均比2016年有所提高,说明生产工艺的不断成熟和优化,企业对产品质量的进一步严格把关。我国禽流感病毒灭活疫苗含有的甲醛和细菌内毒素是造成疫苗副反应的直接原因,因此通过生产工艺改进,降低疫苗中甲醛和细菌内毒素的含量,可以降低疫苗的副反应。核酸疫苗是当前禽流感疫苗研究发展的前沿技术,是现阶段禽流感疫苗硏制中最具理想前景的疫苗,也是禽流感疫苗研究的一大热点。另外,具有交叉保护性的广谱免疫原性的通用疫苗可以有效的解决抗原漂移这一难题,是现阶段流感疫苗研究的一个重要研究方向。

对重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)在家禽免疫效果方面的调研

2006-2007年，通过检测免疫注射H5N1重组禽流感病毒灭活疫苗（Re-1株）后3～4周的444个鸡场、66个鸭场和28个鹅场共计16140份血清中H5亚型禽流感血凝抑制抗体水平，比较A、B、c、D、E5个不同厂家的疫苗对鸡、鸭、鹅免疫效果。结果显示：重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1株）对鸡的免疫效果明显好于鸭和鹅；不同厂家疫苗质量和免疫效果有差异，其中A厂疫苗质量和免疫效果最好。

传染性法氏囊病活疫苗对重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1)免疫效果的影响

为评价鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗对重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1)免疫效果的影响,分别对蛋雏鸡和麻花肉雏鸡于14日龄同时接种鸡传染性法氏囊病活疫苗(B87株)和重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1),设空白对照组(均不免疫禽流感和传染性法氏囊病疫苗)和免疫对照组(只免疫重组禽流感病毒灭活疫苗),进行法氏囊病理变化观察和血清H5N1亚型禽流感病毒抗体检测。结果显示,鸡传染性法氏囊病活疫苗均可对蛋雏鸡和麻花肉雏鸡引起法氏囊炎性反应,但对重组禽流感病毒灭活疫苗免疫抗体的产生无显著影响。

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re1株)有效期的探讨

禽流感是一种严重危害养殖业发展并对人类健康存在巨大威胁的传染病。近几年在世界范围内发生了多起禽流感疫情，在国内也有部分省市发生过禽流感疫情。由于我国政府采取了积极有效的防疫措施，禽流感没有给我国养殖业造成较大的损失。而在这些积极有效的防治措施里面，高覆盖率的免疫接种是其中最为有效的措施之一，是阻止禽流感疫情发生的重要防线。由于我国禽类养殖量非常巨大，需要的禽流感疫苗的数量也就非常大，就经常需要各个疫苗生产厂家进行满负荷式的生产，即使是这样也经常满足不了市场的需要，这样各个厂家不得不进行前瞻性的战略储备。由于疫情紧张的时候市场供应经常出现断货现象，各地的兽医防疫部门为了防止疫情出现时没有足够的疫苗，也都留有一定量的储备。由于目前禽流感疫苗绝大多数为油乳剂灭活疫苗，标注的有效期为一年，在疫苗需求不紧张时期所生产的禽流感疫苗经过各个阶段的储备之后，往往就到了一年的有效期。有的省份招标疫苗要求有效期在6-8个月以上，厂家的疫苗生产计划安排十分困难，对于有效期短的禽流感灭活疫苗根本无法销售出去，不得不进行报废销毁处理，这样就造成了很大的疫苗浪费和经济损失。

H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株灭活疫苗的研制

利用H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的免疫效果进行评价,为家禽H7N9亚型流感的防控提供科学数据及手段。将AIV-rGD76株用灭菌生理盐水作104倍稀释后,接种11日龄非免疫鸡胚,37℃孵育72h后收获感染鸡胚尿囊液,经甲醛灭活后,加矿物油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗,对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验。结果显示,制备的3批重组禽流感病毒灭活疫苗(H7N9亚型,rGD76株)均为油包水型,黏度均在50cP以内,对3批疫苗取样,样品经3000r/min离心15min,管底无水相析出。安全性试验结果显示,将疫苗按1mL/只超剂量接种3周龄SPF鸡,试验鸡在观察期内全部健活,未出现局部或全身不良反应,表明疫苗对SPF鸡具有良好的安全性;免疫效力及攻毒保护试验结果显示,用疫苗按0.3mL/只的剂量免疫接种3周龄SPF鸡1次,免疫接种后21d试验鸡血清中rGD76株的HI抗体平均效价可达8log2以上,使用H7N9亚型高致病性禽流感病毒GD16株滴鼻接种0.2mL/只(含100LD50)对免疫鸡进行攻毒,疫苗对免疫鸡的保护率均为100%。在实验室条件下研制出重组禽流感病毒灭活疫苗(H7N9亚型,rGD76株),疫苗的各项指标均符合标准。

蛋鸭重组禽流感病毒(H5N1亚型)灭活疫苗免疫试验

采用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型，Re-6株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株＋Re-4株）进行蛋鸭免疫试验，监测免疫鸭的抗体消长动态，旨在为鸭禽流感免疫程序的制定提供理论依据。基于试验结果，提出鸭禽流感免疫程序：2周龄首免，4～5周龄二免，开产前2～3周三免，此后每隔4～5个月加强免疫一次。

重组禽流感病毒灭活疫苗生产工艺的优化

禽流感是禽流行性感冒的简称,它是由甲型流感病毒的一种亚型(也称禽流感病毒)引起禽发生急性出血性的传染性疾病,以引发呼吸道发病或隐性感染为特点。目前疫苗免疫接种是预防本病的主要措施。在产业化灭活疫苗生产过程中,传统灭活工艺(使用2%的甲醛作为灭活剂)存在着局限性,其中甲醛含量虽未超过国家标准,但多余的游离甲醛醛基不断降解病毒的抗原,致使抗体效价降低、保存期缩短以及动物机体副反应的发生。

基于Box-Behnken实验设计与响应面法优化禽流感疫苗生产工艺?

为优化基于MDCK细胞无血清悬浮培养生产禽流感病毒的工艺以提高禽流感病毒血凝素(HA)滴度,采用部分析因实验设计考察了病毒生产工艺中接毒时细胞密度、TPCK-胰酶浓度、培养温度、感染复数和病毒收获时间对病毒HA滴度的影响,确定了接毒时细胞密度、TPCK-胰酶浓度、和病毒收获时间作为影响病毒HA滴度的显著因子,并进一步采用3因素3水平的Box-Behnken实验设计和响应面法,对3个显著因子作用条件进行了优化,获得了最优的工艺条件。结果显示:当接毒时细胞密度为7.0×10~6 cells×m L^(-1)、TPCK-胰酶浓度为17 mg×L^(-1)、病毒收获时间为60 h时,病毒HA滴度最高可达10.85 log_2 HAU/25μL。以上研究结果为禽流感疫苗高效大规模工业化生产提供了有力的数据支持。

重组禽流感病毒灭活疫苗不同注射方法抗体效果的研究

最近几年，高致病性禽流感在世界一些地区流行，给养禽业造成了巨大的损失。疫苗免疫接种是有效防控禽流感的重要措施之一。重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型，Re-6株）在预防控制高致病性禽流感方面发挥了重要的作用。已有试验和很多应用实践证明，该疫苗对禽类均有良好的免疫效果。

H7亚型重组禽流感病毒灭活疫苗研制成功

从农业部获悉，国家禽流感参考实验室成功研制出重组禽流感病毒灭活疫苗（H7亚型，H7N9／PR8株），并通过了新兽药评价，作为应急技术储备。

H7亚型重组禽流感病毒灭活疫苗研制成功

近日，从农业部获悉，国家禽流感参考实验室成功研制出重组禽流感病毒灭活疫苗（H7亚型，H7N9／PR8株），并通过了新兽药评价，作为应急技术储备。

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）的不同免疫剂量对融水香鸭免疫效果分析

为研究重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)的不同免疫剂量对融水香鸭免疫的效果。选取120只14日龄的商品融水香鸭,按照随机原则将其划分为试验一组、试验二组以及对照组,试验一组和试验二组融水香鸭分别在14日龄进行首次免疫,试验一组首次免疫接种0.5 mL,颈部皮下注射,试验二组首次免疫接种1 mL颈部皮下注射,分别在免疫接种后的第21、28、60和90天采集试验组和对照组融水香鸭新鲜血液进行H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株抗体水平检测。检测结果显示,不同疫苗注射剂量抗体水平存在一定差异,其中试验二组的抗体水平比试验一组要好,但两者之间对比差异性不大。试验二组的融水香鸭在进行第1次免疫接种后所产生的副反应相对较高,因此,建议在进行首次免疫接种时,免疫注射剂量控制在0.5 mL。同时,试验二组的融水香鸭在免疫接种90 d后,抗体水平下降较为严重,要保证总体免疫效果需要对融水香鸭进行第2次强化免疫接种。

8日龄与15日龄雏鸡首免禽流感病毒灭活疫苗试验

用8日龄和15日龄雏鸡免疫注射禽流感病毒灭活疫苗,30 d后,进行(HI)抗体水平检测,通过(HI)抗体水平高低对比分析,对雏鸡首免禽流感病毒疫苗有重要意义。

H7亚型重组禽流感病毒灭活疫苗研制成功

近日,从农业部获悉,国家禽流感参考实验室成功研制出重组禽流感病毒灭活疫苗（H7亚型,H7N9/PR8株）,并通过了新兽药评价,作为应急技术储备。

H7亚型重组禽流感病毒灭活疫苗研制成功

从农业部获悉，国家禽流感参考实验室成功研制出重组禽流感病毒灭活疫苗（H7亚型，H7N9／PR8株），并通过了新兽药评价。试验结果显示，该疫苗安全．免疫效果良好，可对H7N9禽流感病毒攻击提供有效保护，能够100％阻止病毒复制和排泄，对有效阻断病毒传播、降低病毒高致病力突变风险具有重要意义．一旦疫病防控需要，即可马上使用该疫苗对家禽实施免疫，确保H7N9禽流感可防可控。

H7亚型重组禽流感病毒灭活疫苗研制成功

日前．经农业部新闻办公室披露，国家禽流感参考实验室成功研制出了重组禽流感病毒灭活疫苗（H7亚型．H7N9／PR8株），并通过了新兽药评价，作为应急技术储备。经试验验证．该疫苗安全。免疫效果良好，能有效阻断H7N9病毒传播、降低病毒高致病力，并能100％阻止病毒复制和排泄。一旦暴发疫情，可立即用该疫苗对家禽实施紧急接种，及时阻击H7N9禽流感扩散。

禽流感病毒灭活疫苗对蓝孔雀禽流感的免疫效果检测

由于目前没有专门用于预防禽流感病毒引起的蓝孔雀禽流感的疫苗,而现有疫苗生产厂家禽流感病毒疫苗主要针对鸡、鸭、鹅等家禽,为有效预防禽流感在孔雀养殖场的发生,本中心于2016年12月对重庆同立珍禽养殖有限公司养殖的600余只蓝孔雀,2017年12月对900余只蓝孔雀分别用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）、