重组禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗对商品蛋鸡免疫程序优化

为优化商品蛋鸡场禽流感的免疫程序,掌握商品蛋鸡场H5亚型禽流感母源抗体的消长规律和不同首免日龄免疫禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)疫苗的抗体效价消长情况,本试验将商品蛋鸡分成5组,1~4组为试验组,分别于7、10、14和21日龄免疫禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗,第5组为空白对照组,于14日龄肌注生理盐水,然后进行禽流感抗体检测。结果表明:蛋鸡2日龄时母源抗体水平最高,平均效价都在6 log2以上,且群体抗体合格率都在99%以上。随后,逐渐下降,在10日龄时处在6 log2附近,这表明鸡群面临禽流感病毒感染风险较大;首免日龄在7日龄、10日龄时,接种疫苗到鸡只产生具有保护作用的抗体大概在14~17 d,此间母源抗体水平也较低,疫苗刺激机体产生的抗体不足以保护鸡只。如果首免日龄在14日龄以后则更不利于鸡群禽流感的防控。建议该蛋鸡场雏鸡H5亚型禽流感疫苗首免时间在7日龄最佳。

重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗免疫黄鸡抗体水平分析

H5或H7亚型高致病性禽流感是一种高度致死性传染病,它不仅给养禽业造成了巨大的危害和损失,还威胁着人类的生命健康安全。为了分析重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株+H5N1 Re-12株和H7N9 H7-Re3株)免疫抗体水平,本研究对如皋市内14个养殖场近2万只黄鸡进行重组禽流感病毒三价灭活疫苗肌肉注射,免疫三周后,随机采集420份血液样品进行HI抗体效价检测。结果表明,免疫后的鸡群均无明显不良反应,可以诱导黄鸡产生良好的抗体,检测时具有较高的抗体效价,H5亚型Re-11株平均抗体效价为7.8log2,Re-12株平均抗体效价为8.2log2,H7亚型Re-3株的平均抗体效价为6.8log2,并且免疫抗体合格率均达到70%以上,对黄鸡具有良好的安全性和免疫保护效果,研究结果为有效地控制高致病性禽流感提供参考依据。

玉林市重组禽流感病毒三价灭活疫苗的免疫效果探究

高致病性禽流感属于一类动物疫病,也是人畜共患病,其病毒毒株为H5和H7血清亚型。高致病性禽流感自2021年在欧美及亚洲国家肆虐以来,对我国乃至世界养禽业都造成了巨大损失,其中危害最严重的是H5N8亚型禽流感[1]。为降低H5N8亚型禽流感对我国家禽的危害,农业农村部经过多重评估和临床试验,对禽流感H5+H7亚型三价灭活疫苗毒株进行了调整,并于2022年将新疫苗投入使用。

H5、H7亚型二价灭活疫苗悬浮培养工艺及免疫效果研究

为获得高质量禽流感灭活疫苗候选株,研究其遗传稳定性与免疫原性。将利用反向遗传技术构建的H5N2亚型(rD8株)和H7N9亚型(rGD76株)AIV分别在MDCK悬浮细胞上传代培养,检测各代病毒液的血凝效价,并制备二价油乳剂灭活疫苗免疫4周龄SPF鸡。免疫后21d检测两种亚型抗体的HI效价,分别用H5N1亚型和H7N9亚型效检毒株对免疫鸡群进行攻毒保护实验。两株病毒传代后其血凝效价rD8株可达8log2,rGD76株可达9log2,与亲本毒株基本一致。对传代后的第1、5、15代病毒液进行HA、NA基因测序分析,各代次序列同源性较高,关键位点氨基酸序列未发生变异,与亲本毒株保持一致。实验鸡免疫后21d,血清中H5亚型HI抗体几何平均值为8.0log2,H7亚型HI抗体几何平均值为 8.4log2,攻毒后5d各组试验鸡均未检测到有排毒现象。两株病毒经传代后逐渐适应了悬浮培养的MDCK细胞,血凝效价稳定,且均具有较好的免疫原性,可作为禽流感疫苗种毒。

重组禽流感病毒二价灭活疫苗对H5N1亚型7.2分支病毒的攻毒保护性研究

为有效防控2006年以来出现的H5亚型7.2分支禽流感病毒(AIV)引起的免疫鸡群高致病性禽流感(HPAI)的流行,我们构建了重组AIV Re-4疫苗株,研制出含有重组AIV Re-4株的H5亚型二价系列灭活疫苗,并在我国北方地区使用,有效地控制了其流行。2012年我国北方地区再次出现7.2分支病毒引起的HPAI疫情。为评估现有H5亚型二价系列灭活疫苗对该分支病毒的免疫保护效力,本研究首先通过SPF鸡进行免疫攻毒试验评估。结果表明,分别以每羽份(0.3 mL/只)的Re-5+Re-4株和Re-6+Re-4株重组AIV H5二价油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡,免疫3周后针对重组AIV Re-4株的HI抗体均达到8 log2以上;经鼻腔接种7.2分支AIV CK/NX/2/12株(100 LD50)攻毒后,免疫鸡均获得完全保护,即无任何临床症状和排毒现象,而对照组SPF鸡全部发病死亡。此外,以哈尔滨当地养殖场中免疫H5亚型AIV灭活疫苗的48只商品蛋鸡进行攻毒试验,结果显示,商品蛋鸡血清中针对重组AIV Re-4株HI抗体平均滴度为8.3 log2,采用相同方式攻毒后也获得完全保护。本研究结果表明,Re-5+Re-4株和Re-6+Re-4株重组AIV H5二价灭活疫苗均能够对H5亚型7.2分支病毒的攻击提供良好的免疫保护效果。

重组鸡白细胞介素6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用的观察

为评价重组鸡白细胞介素6(rChIL-6)在商品鸡体内对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用,将rChIL-6与重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)采用肌肉注射方式免疫57日龄麻鸡,分别在疫苗接种前和接种后第7、14、21、35、42天,检测H5N1亚型禽流感病毒(Re-6、Re-7)血凝抑制(HI)抗体水平。结果表明:与灭活疫苗同时注射rChIL-6组比单一注射疫苗组的H5N1 Re-6抗体滴度可提高1.6 log2,Re-7抗体滴度可提高1.8 log2。提示rChIL-6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)有显著的免疫增强作用。

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-4+Re-6)试验报告

高致病性禽流感是人畜共患病，在特定环境下，可感染人，当人感染高致病性禽流感后，死亡率较高，并且严重危害公共安全卫生。由于禽流感毒株的不断变异，为了有效地防控禽流感疫情的发生，2012年农业部推出重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-4＋Re-6），为了保证新疫苗的安全使用，昌平区动物疫病预防控制中心在新疫苗大批使用前先做小范围试验。

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗免疫效果试验

禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类急性败血性、高度接触性传染病。对家禽进行禽流感疫苗的预防接种是我国采取防制禽流感的主要措施之一，可以通过检测血清免疫抗体的血凝抑制效价来反映机体的免疫状态和抵抗力。为了了解重组禽流感病毒H5二价灭活疫苗（H5N1，Re-4株＋Re-5株）免疫抗体的消长规律，特制定本试验方案，具体如下：

鸭免疫重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗抗体消长规律观察

疫苗免疫仍是预防禽流感的有效手段之一，被一些国家和地区采用。有关禽流感疫苗的免疫效果及抗体消长规律国内学者做了一些研究工作，但作为我国现阶段使用的主要疫苗，重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（HSN1，Re-5株＋Re-4株）免疫鸭的抗体动态变化尚未见报道。

重组禽流感病毒H5亚型灭活疫苗的质量分析及发展方向

对主要用于我国高致病性禽流感防控的重组禽流感病毒H5亚型灭活疫苗的种类和使用情况,以及国内高致病禽流感流行株的主要分支情况作一介绍。随着病毒抗原性的不断变异,疫苗毒株也需随之进行更换,因此必须使用匹配相应分支的疫苗才能取得理想的防控效果。目前国内重组禽流感病毒H5亚型灭活疫苗的生产现状是共有10家生产企业,其中2个厂家采用悬浮细胞工艺生产,其余8个厂家均采用鸡胚工艺进行疫苗生产。笔者根据企业上报的产品批签发报告情况,以2016年至2017年农业部规定的高致病性禽流感强制免疫疫苗重组禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)为例,着重从疫苗的安全性和效力两方面对4家重组禽流感灭活疫苗生产企业共计488批次产品的批签发检验数据进行了质量分析。从Re-6株、Re-7株、Re-8株不同组分效价的比较可以看出,所有批次疫苗抗体效价几何平均滴度(GMT)至少高于国家标准1个滴度以上,而Re-6株和Re-8株组分抗体效价(GMT)高于国家标准2个滴度以上。虽然产品的效价都超过了国家标准,但抗体水平还是参差不齐,较高产品的3个组分抗体效价(GMT)比较低的要高出1.5个滴度以上。各生产企业产品批间差异较大,这虽有生产工艺不断成熟和优化的因素,但对于相近批次产品批间差异出现较大差异,则说明企业生产工艺并不十分稳定。4个企业在2017年生产的疫苗各组分抗体效价GMT整体水平均比2016年有所提高,说明生产工艺的不断成熟和优化,企业对产品质量的进一步严格把关。我国禽流感病毒灭活疫苗含有的甲醛和细菌内毒素是造成疫苗副反应的直接原因,因此通过生产工艺改进,降低疫苗中甲醛和细菌内毒素的含量,可以降低疫苗的副反应。核酸疫苗是当前禽流感疫苗研究发展的前沿技术,是现阶段禽流感疫苗硏制中最具理想前景的疫苗,也是禽流感疫苗研究的一大热点。另外,具有交叉保护性的广谱免疫原性的通用疫苗可以有效的解决抗原漂移这一难题,是现阶段流感疫苗研究的一个重要研究方向。

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗的鹅免疫试验

为探究重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗对鹅的免疫特性,将100只27日龄四季鹅,随机分成3组:一免组40只,接种剂量0.5 mL/只;二免组40只,二次接种剂量分别为0.5 mL/只、1.5 mL/只;对照组20只,不免疫。结果显示:一免后21 d H5(Re-8株)免疫抗体平均滴度为5.85 log2,抗体合格率为85%,28 d为7 log2,抗体合格率为100%,但60 d后平均滴度降为5.95 log2;二免后7 d为7.15 log2,39 d为7.95 log2,抗体合格率均保持100%。一免后21 d H7N9免疫抗体平均滴度为5.2 log2,抗体合格率为85%,28 d为6.6 log2,抗体合格率达到100%,60 d后降为3.15 log2;二免后7 d为6.8 log2,39 d为7.05 log2,抗体合格率均保持在100%。结果表明:该疫苗能够有效刺激鹅产生免疫保护抗体,适用于鹅的禽流感免疫;为增强免疫保护效果,建议进行二次免疫。

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-4+Re-5)免疫肉鸽效果试验

随机选择1月龄以上肉鸽640只,进行分组隔离试验,分别注射0.2、0.3、0.4、0.5、1.0、1.5、2.0 mL重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-4+Re-5),免疫后第3周,0.2、0.3、0.4、0.5 mL疫苗试验组肉鸽半数再进行同剂量第二次免疫。定期采集血样,应用血凝抑制试验方法检测禽流感抗体。结果表明:初次免疫,Re-4比Re-5抗体形成效果好,相对高出1个抗体滴度;第二次免疫,二者效果相近,都比初次免疫整体效果好。免疫1次,至少接种0.4 mL;免疫2次,至少接种0.3 mL,才能形成较好免疫效果。

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗田间免疫效果观察

为了解不同厂家重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗现地免疫效果及抗体消长规律,指导实践应用,特进行本试验。1材料和方法1.1疫苗哈药集团生物疫苗有限公司（A公司）重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-5株＋Re-4株）,

鸭免疫重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5+ Re-4)后抗体水平分析

一禽流感（AI）是由A型流感病毒引起的一种禽类传染病。根据致病性的不同将禽流感分为高致病性禽流感（HPAI）和低致病性禽流感（IPAI），HPAI被世界动物卫生组织（0IE）列为A类传染病，我国将其列为一类动物疫病[1]。

重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗对麻鸭和番鸭免疫效果观察

为评价重组禽流感病毒三价灭活疫苗(H5N1 Re-11+Re-12株、H7N9 Re-2株)对麻鸭和番鸭的免疫特性,优化商品麻鸭和番鸭养殖场禽流感免疫程序,开展了麻鸭、番鸭现场免疫试验。以推荐的免疫程序和剂量分组免疫21日龄麻鸭和番鸭,免疫后定期采血测定抗体效价。结果显示:一免组麻鸭在35、49、63日龄产生的H5N1(Re-11、Re-12株)和H7N9 Re-2株HI抗体效价均低于5.70log2,抗体合格率为73%~89%;二免组麻鸭针对三种抗原的抗体滴度均大于6.00log2,抗体合格率均大于86%。一免组番鸭在35日龄的H5N1(Re-11、Re-12株)和H7N9 Re-2株HI抗体效价和合格率分别为5.54log2和90%,5.61log2和90%,5.63log2和90%;49日龄分别上升至6.01log2和100%,6.07log2和100%,6.15log2和100%;63日龄分别为5.66log2和100%,5.79log2和100%,5.81log2和100%;二免组番鸭在35~63日龄时,各毒株抗体滴度都较高,抗体效价均高于6.40log2,抗体合格率均为100%。对照组麻鸭与番鸭在35、49、63日龄抗体合格率均较低。结果表明,二次免疫可增强免疫保护效果。本研究为广大养殖户制定水禽高致病性禽流感免疫程序提供了数据支撑。

重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗的樱桃谷肉鸭免疫优化试验

为探究重组禽流感病毒三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株+Re-12株,H7N9 H7-Re2株)对樱桃谷肉鸭的免疫特性,同时优化免疫方案以使其尽早产生免疫保护,将300只1日龄樱桃谷肉鸭随机分成3组,每组100只:一免组于7日龄免疫1次,剂量为0.5 mL/只;二免组于1日龄、7日龄各免疫1次,剂量分别为0.2、0.4 mL/只;对照组不免疫。采用血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)进行抗体检测。结果显示:一免组肉鸭在21日龄Re-11、Re-12和H7-Re2平均抗体水平和抗体合格率均较低,分别为2.8log2和33%,2.6log2和31%,2.5log2和30%;28日龄分别上升至4.5log2和87%,4.1log2和83%,4.0log2和80%;38日龄分别为4.4log2和90%,4.2log2和87%,4.1log2和83%。二免组肉鸭在21日龄各毒株平均抗体水平和抗体合格率分别达到4.5log2和80%,4.3log2和77%,4.1log2和73%;28日龄分别为6.0log2和97%,5.6log2和93%,5.2log2和93%;38日龄分别为6.1log2和100%,5.4log2和97%,5.0 log2和97%。对照组肉鸭在21日龄母源抗体已很低,各毒株平均抗体水平和抗体合格率分别为1.2log2和3%,1.3log2和3%,1.6log2和7%;28日龄、38日龄抗体水平均为0。结果表明:该疫苗能够有效刺激肉鸭产生免疫保护抗体,适用于禽流感免疫;在1日龄、7日龄各免疫1次的效果更佳,因此在发病日龄较早的高风险区域,建议采用该方案加以防控。

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re1株)有效期的探讨

禽流感是一种严重危害养殖业发展并对人类健康存在巨大威胁的传染病。近几年在世界范围内发生了多起禽流感疫情，在国内也有部分省市发生过禽流感疫情。由于我国政府采取了积极有效的防疫措施，禽流感没有给我国养殖业造成较大的损失。而在这些积极有效的防治措施里面，高覆盖率的免疫接种是其中最为有效的措施之一，是阻止禽流感疫情发生的重要防线。由于我国禽类养殖量非常巨大，需要的禽流感疫苗的数量也就非常大，就经常需要各个疫苗生产厂家进行满负荷式的生产，即使是这样也经常满足不了市场的需要，这样各个厂家不得不进行前瞻性的战略储备。由于疫情紧张的时候市场供应经常出现断货现象，各地的兽医防疫部门为了防止疫情出现时没有足够的疫苗，也都留有一定量的储备。由于目前禽流感疫苗绝大多数为油乳剂灭活疫苗，标注的有效期为一年，在疫苗需求不紧张时期所生产的禽流感疫苗经过各个阶段的储备之后，往往就到了一年的有效期。有的省份招标疫苗要求有效期在6-8个月以上，厂家的疫苗生产计划安排十分困难，对于有效期短的禽流感灭活疫苗根本无法销售出去，不得不进行报废销毁处理，这样就造成了很大的疫苗浪费和经济损失。

三黄鸡免疫重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗抗体检测实验探讨

为进一步了解三黄鸡免疫重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活苗的免疫效果。随机选取了4个三黄鸡养殖培育场开展了三价灭活疫苗以及血清保护作用的抗体蛋白质检测实验。通过实验不仅能够进一步了解三黄鸡养殖培育场的H5及H7亚型禽流感的抗体水平,还能够根据检测结果,进一步认知抗体消长规律,从而指导养殖场制定合理的免疫程序,为有效地防控禽流感的发生以及流行提供参考。