河南省确山县禽源沙门氏菌分离鉴定及其耐药性研究

本研究旨在了解河南省确山县禽源沙门氏菌流行现状、血清型分布及其耐药性情况。采集来自不同家禽养殖场疑似沙门氏菌感染家禽的泄殖腔拭子、心血、肝等病料147份,通过细菌分离培养、生化鉴定、PCR扩增和血清分型试验进行鉴定,采用K-B纸片法对所有鉴定为沙门氏菌的菌株进行耐药性检测。结果显示:共获得53株沙门氏菌,检出率为36.05%,分属A、B、C1、D群7个血清型,其中鸡白痢沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌分别占比41.59%、28.30%;分离菌株对氨苄西林、阿莫西林、庆大霉素、阿米卡星、阿奇霉素、复方新诺明耐药性较高,分离菌株耐药种类介于1~10种之间,以4、5、6重耐药菌株最多,分别占比16.98%、22.64%、20.75%,多重耐药率为86.79%。试验结果表明,确山县禽源沙门氏菌血清型比较复杂,以鸡白痢沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌为优势流行血清型。禽源沙门氏菌耐药性严重,建议加强监测,开展综合防控措施。

安徽地区禽源沙门氏菌分离鉴定与耐药性研究

为了解安徽地区禽源沙门氏菌的流行菌株和耐药情况,本研究通过培养特性、镜检、生化试验、PCR和血清型鉴定等,对疑似发病禽的116份病料进行沙门氏菌分离鉴定,并采用Kindy-Bauer法对分离菌株进行耐药性分析。试验共分离到42株禽源沙门氏菌,其中包含5个大群11种血清型。B群30株、A群2株、D群7株、C1群2株、C2群1株,其中以B群鼠伤寒沙门氏菌为优势菌株。42株分离菌对阿米卡星、左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均低于20%,而对氨苄西林、链霉素、呋喃唑酮、大观霉素、复方新诺明和多西环素的耐药率达50%以上,其中对氨苄西林的耐药率达97.62%,且41株分离菌株存在多重耐药。结果表明,目前安徽地区禽源沙门氏菌优势流行株是鼠伤寒沙门氏菌,流行菌株呈现较严重的耐药性。本研究为指导临床用药及禽源沙门氏菌的综合防制提供数据支撑。

禽源沙门氏菌净化检测技术研究进展

沙门氏菌(Salmonella)是人类细菌性食源性疾病的主要来源之一,可引起胃肠炎和菌血症,也可导致临床并发症和死亡。美国疾病控制和预防中心(Centers for disease control and prevention,CDC)曾报道,仅在美国每年就发生约120万例沙门氏菌病病例[1-2]。在人类感染沙门氏菌的病例中,有近75%的感染是由于食用受污染的猪肉、禽肉和牛肉等引起的[3]。

宽裂解谱禽源沙门氏菌噬菌体的筛选及其裂解性能分析

为了筛选宽裂解谱禽源沙门氏菌噬菌体并分析其裂解性能,本试验首先对分离自不同年份、不同地区、不同宿主来源的238株禽源沙门氏菌(C01~C238株)进行药物敏感性检测和血清型鉴定,筛选出耐药率大于60.00%的抗生素;然后采用双层平板法测定50株沙门氏菌噬菌体(NP01~NP50)对238株禽源沙门氏菌的裂解谱并统计裂解率;最后选择裂解率最高的噬菌体,进一步统计其对筛选到的抗生素耐药的沙门氏菌菌株的裂解率及对不同分离年份、分离地区、宿主来源及血清型的沙门氏菌菌株的裂解率。结果表明:238株沙门氏菌对青霉素、阿莫西林、红霉素、利福平、复方新诺明的耐药率较高,均大于60.00%;其中对红霉素的耐药率最高,为88.24%;对头孢噻肟、氧氟沙星、庆大霉素、四环素的敏感率较高,为64.71%~86.13%。在238株被检沙门氏菌中,肠炎沙门氏菌有128株,鸡白痢沙门氏菌有95株,鼠伤寒沙门氏菌有6株,伤寒沙门氏菌有2株,甲型副伤寒沙门氏菌有1株,未定型沙门氏菌有6株。在50株沙门氏菌噬菌体中,有14株对238株沙门氏菌的裂解率在80.00%以上,有17株裂解率在20.00%以下;NP17的裂解率最高,为92.02%。NP17可裂解耐药沙门氏菌菌株,对2019,2020,2021年分离的沙门氏菌菌株的裂解率为90.00%~95.18%,其中2021年最高,2020年最低;对分离自黑龙江、山东、江苏、广西、广东地区的沙门氏菌菌株的裂解率为88.89%~94.62%,其中山东地区最高,广东地区最低;对鸡源、鸭源、鸽源沙门氏菌菌株的裂解率为86.36%~100%,其中对鸽源沙门氏菌菌株的裂解率最高,对鸭源沙门氏菌菌株的裂解率最低;对肠炎沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌菌株的裂解率均在80.00%以上,其中对肠炎沙门氏菌菌株的裂解率(97.66%)最高,其次为鸡白痢沙门氏菌菌株(裂解率为88.42%)。说明存在宽裂解谱沙门氏菌噬菌体,其裂解性能不受耐药性的影响,对不同分离年份、分离地区、宿主来源和血清型沙门氏菌菌株的裂解率略有差异。

禽源沙门氏菌的血清型分布与耐药性分析

对89株禽源沙门氏菌临床分离菌株进行了血清型鉴定,鉴定出肠炎沙门氏菌(S.enteri-tidis)17株,纽波特沙门氏菌(S.newport)1株,鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)6株和鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)65株。结果表明,89株禽源沙门氏菌中有24株(27.0%)为能够引起人的沙门氏菌感染的血清型,具有重要的公共卫生学意义,而且这24株沙门氏菌中多重耐药菌株有12株(50.0%)。用微量稀释法检测了89株禽源沙门氏菌对18种抗菌药物的耐药性。检测结果表明,所有分离菌株均对阿米卡星和头孢曲松敏感;在使用的其他16种抗菌药物中,89株禽源沙门氏菌分离菌株对链霉素耐药率最高,为43.8%,其次为四环素、头孢噻吩、头孢噻呋、氟苯尼考、奥比沙星、萘啶酸和氨苄西林,耐药率分别为30.3%、22.5%、22.5%、20.2%、20.2%、19.1%和19.1%;对氯霉素、环丙沙星、沙拉沙星、恩诺沙星、左氟沙星、庆大霉素、头孢噻肟和卡那霉素呈现轻度的耐药性,耐药率分别为10.1%、9.0%、9.0%、7.9%、7.9%、6.7%、6.7%和2.2%。

禽源沙门氏菌不同检测方法的比较及分型研究

本研究采集同一地区三家规模化蛋鸡场的饲料、肛拭子和病死鸡样品共813份,分别采用本实验室改进的环介导等温扩增技术(LAMP)、普通PCR技术以及美国农业部沙门氏菌分离培养标准(USDA MLG 4.05)进行沙门氏菌检测,并对分离株进行血清型鉴定及ERICPCR分型.结果,三种方法均检出沙门氏菌阳性16份,检出率同为1.97%.其中病死鸡、饲料和肛拭子中检出率分别为11.29%、3.03%和1.02%.16株禽源沙门氏菌中有7种血清型,其中12株沙门氏菌ERIC-PCR分型相似性均小于90%.结果表明,本实验室改进的LAMP方法与PCR方法检出率相同,与USDA MLG 4.05的符合率为100%.16株沙门氏菌血清型多样,分子分型的相似度低.