“禽疫苗免疫增强剂”对鸡新城疫疫苗免疫增强作用研究

“禽疫苗免疫增强剂”与鸡新城疫IV系活疫苗同时免疫雏鸡后 ,其血液中的HI抗体效价和ANAE+ T淋巴细胞百分比持续性高于单独使用IV系活疫苗免疫雏鸡 ,且在大部分时间内差异显著 (P <0 0 5 )。在攻毒试验中 ,加免疫增效剂组保护率为 93 3% ,单独免疫组保护率为 80 %。

DNA疫苗研究进展及在禽用疫苗中的应用

DNA疫苗是第三代核酸疫苗的领军者,因其比传统疫苗有着多种优势,近年来重新进入科研工作者的研究路线中。相比mRNA疫苗,DNA疫苗的研究更加深入广泛,并有受市场检验的产品及多款临床产品,未来将作为人类及动物疫病防控的重要技术手段。疫苗作为家禽养殖业始终依赖的基石,多年来随着疾病的发展传统疫苗已无法满足其防治要求,而DNA疫苗正好可填补此空缺。本文概述了DNA疫苗在人用疫苗及禽用疫苗中的研究应用,相比人用疫苗近年来的深入探索,禽用DNA疫苗起点虽早,但随着新技术的更新,其发展后继乏力。期望未来,研究者参考人用DNA疫苗中的新技术、新手段,对禽用DNA疫苗进行更深入广泛的研究。

中药免疫佐剂在禽用疫苗应用中的研究进展

疫苗是预防动物传染病的重要方式,为增强类毒素疫苗和亚单位疫苗的免疫效果,有效的方法之一是选择研制添加合适的免疫佐剂。免疫佐剂是一种非特异性的免疫增生剂,其本身并无抗原性。研究发现某些中药作用动物机体后有双向调节、低毒性的特点,提取某些中药添加配合疫苗能增强其免疫效力。本文主要描述当前常用的中药免疫佐剂,针对中药免疫佐剂作用机理、中药免疫佐剂种类,强调禽常用中药免疫佐剂类型、特点和中药免疫佐剂的过去、未来,并对其优缺点进行分析与综合性阐述,为今后更好的研究和合理的利用禽用疫苗佐剂提供相关理论基础,旨在为中药免疫佐剂在禽病疫苗中的应用提供参考。

禽用疫苗在临床中应用概述

我国目前是世界上禽养殖量最大的国家,随着养殖量的不断增加,养殖场(户)之间的饲养管理水平参差不齐,导致禽病频发。我国对于禽病主要的防控政策是以预防为主、治疗为辅,疫苗免疫是预防疾病发生的最重要的方法,也是最为有效的方法。

猪脾转移因子增强几种重要禽疫苗免疫效果的测试研究

为研究猪脾转移因子(TF)对禽疫苗的免疫增强作用,采用血凝抑制(HI)试验和琼脂凝胶扩散沉淀(AGP)试验方法测试了TF分别与鸡新城疫(ND)病毒活疫苗、禽流感(AI)病毒灭活疫苗、鸡传染性支气管炎(IB)病毒灭活疫苗、鸡传染性法氏囊病(IBD)病毒活疫苗联合接种SPF鸡后抗体效价(log2x)动态变化(共4个试验组),同时运用ELISA法评估了所采用免疫程序(上述前3种疫苗与TF同时接种后第7天,进行上述第4种疫苗与TF的联合接种)对SPF鸡外周血IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的影响(试验组5),于接种上述第4种疫苗后的7,14,21,28,35,42d检测细胞因子,均设立对照组(上述禽疫苗单独接种)和空白组(非疫苗接种)。结果显示,接种后7,14,21,28,35,42d,试验组的ND血凝抑制(HI)、AI HI、IB HI和IBD琼脂扩散沉淀(AGP)抗体效价均显著高于对照组(P<0.05),分别提高了1.1~1.4,1.0~1.3,0.7~1.4,0.9~1.6;试验组的IL-2、IFN-γ和IL-4浓度分别于接种后7,14,21d显著高于对照组和空白组(P<0.05),各组的IL-10浓度差异不显著。研究结果表明,TF可增强NDV活疫苗、AIV灭活疫苗、IBV灭活疫苗和IBDV活疫苗的免疫效果。

禽痘疫苗病毒中网状内皮组织增生病病毒5′LTR整合位点序列分析

参照国外发表的禽网状内皮组织增生病病毒（REV）5’长末端重复序列（LTR）在禽痘病毒（FPV）疫苗株基因组上的整合位点及相关序列，合成一对来自FPV的引物，从国内5个不同厂家生产的禽痘疫苗中经PCR均扩增到REV-5’LTR。通过序列比较发现，我国5个FPV疫苗毒株中REV-5’LTR整合位点与美国和澳大利亚的天然重组禽痘疫苗完全一致。其中，有3个的REV-5’LTR插入序列也与美国的Vac-3-Am株和澳大利亚的Vac-M3-Au株有100％的同源性。另2个中国疫苗毒株中的REV．LTR插入序列与美国疫苗毒株Vac-1-A。中的REV-LTR插入序列有99．6％的同源性。但是，这5个中国禽痘疫苗毒株中整合的REVLTR与中国近年分离到的REV野毒株HA9901的5’LTR的同源性只有75．4％-92．4％。

SYBR GreenⅠ实时荧光PCR法检测禽活疫苗中禽网状内皮组织增生症病毒

为快速、准确检测禽活疫苗中的禽网状内皮组织增生症病毒（REV）,根据REV p30基因上的一段保守序列,利用Primer Premier 5.0软件设计合成了1对特异性引物,建立了基于SYBR Green I模式的实时荧光PCR方法,并以常规PCR产物为标准品绘制了标准曲线,对方法的特异性、敏感性、重复性、与经典方法的符合率进行了评价。结果表明：扩增产物片段大小为222 bp,与预期片段大小相符,测序结果证实为REV靶序列;标准曲线具有良好的线性关系,相关系数为1.0,扩增效率为94.2%,溶解温度Tm=（86.0±0.50）℃,无引物二聚体;该方法只从REV阳性样本检出扩增信号,其他病原无扩增信号,特异性好;最低可检测26.97拷贝数的阳性标准品,比常规PCR敏感1000倍;组内变异系数、组间变异系数分别为0.79%-5.36%,1.61%-5.25%。运用建立的实时荧光PCR方法对17批禽用活疫苗进行检测,并与间接免疫荧光法（IFA）进行同步比较试验,结果两者符合率为100%。且实时荧光PCR法更快捷、更方便,结果判定更为直观可用于疫苗中REV污染情况的监测。

禽痘病毒感染对禽流感重组禽痘病毒疫苗免疫效力的影响

表达禽流感病毒 (AIV)HA和NA基因的重组禽痘病毒rFPV_HA_NA能够诱导鸡体产生 10 0 %抵抗高致病性禽流感病毒 (HPAIV)H5N1的攻击。而当鸡群已进行禽痘疫苗免疫或者感染了禽痘病毒的情况下 ,此重组疫苗的免疫效力如何 ?首先用禽痘病毒S_FPV_0 17人工感染SPF试验鸡 ,既而在感染后的不同间隔时间接种重组疫苗 ,免疫后检测鸡群的HI抗体水平 ,同时用 10 0LD50 的HPAIVH5N1进行攻击。结果重组疫苗免疫与禽痘病毒人工感染时间间隔在 4周 (或以上 )时 ,预先感染禽痘病毒对重组疫苗的免疫效力不构成影响 ,对禽流感的保护力为 10 0 % ,而间隔时间在 1、2、3周时 ,重组疫苗的免疫保护效力则受到不同程度的影响。

禽痘病毒活疫苗中网状内皮组织增生病病毒的分离鉴定及其序列比较

为了从怀疑污染禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)的禽痘病毒(Fowlpoxvirus,FPV)活疫苗中分离病毒,将市场上购买的某些厂家的禽痘弱毒疫苗接种7日龄SPF雏鸡。在5d后采其抗凝血浆接种鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast,CEF),在连续传2代后,用REV特异性单抗做间接免疫荧光试验,确认REV感染,命名为JS0809。提取感染细胞的DNA,采用PCR扩增env基因。测序分析表明,该毒株的env基因开放阅读框同大部分REV毒株一致,为1 761 bp。JS0809的囊膜蛋白基因(envelope protein gene,env)与国内已发表株的同源性高达96.0%～99.%。相对而言,它与早年分离到的毒株的同源性只有96%～97.3%,但与近几年的分离珠的同源性则均高达99.5%～99.8%。它与整合进FPV野毒株中的全基因组REV的env基因同源性很高为99.8%,而与整合进FPV疫苗株中全基因组REV的env基因同源性较低仅为97.3%。本研究证实了在我国生产的某些FPV疫苗中存在REV污染,所污染的REV的env基因更接近最近的流行野毒,这是国内第一次报道从禽痘弱毒疫苗中分离到REV活毒。

12株禽痘疫苗毒中禽网状内皮组织增生病病毒5′LTR整合位点的比较研究

为探究近年来禽痘（FP）疫苗中禽网状内皮组织增生病病毒（REV）5′长末端重复序列（LTR）的整合情况,收集2012—2014年不同地区不同批次的12株FP疫苗,稀释后接种鸡胚成纤维细胞（CEF）,提取细胞DNA,扩增REV相关基因并测定序列。结果表明,12个禽FP疫苗株均扩增出含REV-5′LTR和FPV片段在内的产物,其中2株国外疫苗扩增序列长度为745bp,10株国产疫苗扩增序列长度为485bp。经DNA-Star比对分析,2株国外疫苗整合了446bp的几乎完整的REV-LTR序列,另外10株国产疫苗整合的REV-LTR片段相对较小,仅为194bp。这12个FP疫苗株中整合的REV-LTR与中国近年分离到的REV野毒株HA1101的LTR的相似性为70.3%-82.6%,与国外已发表的FP毒株AY255632整合的REV-LTR的相似性高达98.6%-100%。结果提示,国内外FP疫苗整合有REV-LTR序列的现象普遍存在。本研究检测的12个FP疫苗株均整合有REV-LTR序列,一部分疫苗株整合了几乎完整的REV-LTR序列,而大部分疫苗株整合片段则相对较小,并且与国外已分离到的FP毒株的序列同源性更接近。

禽用疫苗免疫方法与注意事项

家禽疫苗的接种方法一般有：点眼、滴鼻、饮水、注射、刺种、气雾等,具体采用什么方法,应根据疫苗的类型、疫苗的特点及免疫程序来选择。一般来讲,灭活疫苗也就是俗称的死苗,不能经消化道接种,一般用肌肉或皮下注射,疫苗可被机体缓慢吸收,维持较长时间的抗体水平;弱毒疫苗一般用点眼、滴鼻免疫效果较好,

禽用活疫苗外源病毒污染情况的调查研究

为对禽用活疫苗污染外源病毒的情况进行彻底摸底调查,抽取了目前使用量大、覆盖面广的禽用活疫苗重点品种共8种28批,涉及18家国内生产企业、7家国外企业,疫苗生产用SPF鸡胚来自国内8家企业。按照《中国兽药典》2010年版三部鸡检查法和《欧洲药典》对抽检的禽病活疫苗进行了外源病毒污染和禽腺病毒污染检验。结果显示所抽检的禽用活疫苗均无外源病毒污染和禽腺病毒污染,表明我国禽用活疫苗的质量控制和安全性良好。

我国禽用疫苗的质量标准与质量现状

禽病流行严重制约养禽生产的发展,传染病必须使用符合标准的各种疫苗。疫苗生产的原材料质量现状、检测标准,以及疫苗的质量标准,其生产、管理、使用、运输、标签规范等规则,均影响疫苗的质量以至畜产品质量和产品出口、人体健康。此文使人获益匪浅。

中国禽用疫苗的研发与生产现状

1中国禽用疫苗的研究与生产现状 2006年畜牧业总产值约1．4万亿元。占农业总产值的34％。肉、蛋、奶产量分别达到7980万t、2940万t和3290万t，比2000年分别增长58．8％、25．8％和193％，我国肉、蛋总产量已名列世界首位。奶产量跃居世界第5位。疫苗是控制畜禽疫病的重要手段。

我国禽用疫苗的质量标准与质量现状

改革开放以来我国养禽业持续稳定发展,产品产量显著提高.2001年我国养禽数量已达947167.38万羽,跃居世界第二;禽肉总产量为1415.8万吨,占肉类总产量的20.1%;蛋类产量达2531.1万吨,居世界第一位.这些成就的取得与我国禽病防制水平的提高密不可分.

浅谈禽用疫苗的应用

疫苗免疫是控制动物传染性疾病最重要的措施之一，尤其是在病毒病的防控中，由于缺乏有效的治疗药物，免疫预防就显得更为重要。