多种小麦种子储藏蛋白的电泳分析

采用不同的提取液，对１０个小麦品种的非酶功能性种子储藏蛋白进行提取，分别进行梯度凝胶电泳分析。电泳依据提取液的不同，分别采用酸性或碱性系统。对酸性凝胶催化系统，采用Ａｐ－Ｖｃ－ＦｅＳＯ４系统代替Ｈ２Ｏ２－Ｖｃ－ＦｅＳＯ４系统，克服了酸性凝胶的不足，提高了凝胶的性能并使之容易操作。应用新的催化系统配制的酸性梯度胶，提高了分辨率。并初步尝试以酸性系统分析种子谷蛋白，获得了成功。经过对不同提取液蛋白质的分析，发现除盐溶蛋白品种间存在较小的差异外，其它提取液提取蛋白间存在较大的差异。

利用种子储藏蛋白电泳分析小麦材料SY95-71及其亲本的遗传变异

运用种子储藏蛋白电泳方法 ,对来源于六倍体小黑麦Eronga83和普通小麦品种凡 6杂交培育的小麦材料SY95 - 71进行了遗传变异分析。酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (APAGE)对种子醇溶蛋白的组成分析认为 ,与小麦亲本相比 ,SY95 - 71缺少了 1D染色体上的Gli-D1带 ,这在普通小麦品种 (系 )中较为少见 ,其他醇溶蛋白带均来自双亲 ,而与小黑麦亲本更为接近。SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)对高分子谷蛋白亚基的组成分析认为 ,SY95 - 71的位点Glu -A1和Glu -D1与两个亲本不同 ,而Glu -B1来自Eronga83,这些遗传变异是来源于培育过程中的基因重组。另外对SY95 - 71的感条锈病性与储藏蛋白位点的变异的关系以及六倍体小黑麦对小麦种质创新的价值进行了讨论。

苦荞全基因组11S种子储藏蛋白基因的鉴定及表达分析

以苦荞(Fagopyrum tataricum(L.)Gaertn)全基因组数据为平台,采用生物信息学方法,挖掘出9个11S种子储藏蛋白基因,并对其定位、蛋白结构、系统发育及表达模式进行了分析。结果表明,苦荞9个11S种子储藏蛋白基因编码的蛋白长度为189~914 aa,等电点位于5.18~9.82之间,分子量为21.27~103.33 kD;定位分析结果显示,这些成员位于苦荞基因组的6条连锁群上(Megascaffold2/5以及scaffold77/344/395/861);序列比对分析发现,除了1个11S种子储藏蛋白sample1_00009513-RA具有1个cupin保守结构域外,其余8个都含有2个cupin结构域,并且在cupin保守结构域中,苦荞和拟南芥(Arabidopsis thaliana(L.)Heynh)共有14个保守的氨基酸残基;蛋白结构预测表明,苦荞11S种子储藏蛋白的结构具有2种类型;苦荞与其它6个物种[拟南芥、花生(Arachis hypogaea Linn.)、大豆(Glycine max(Linn.)Merr.)、杏仁(Armeniaca vulgaris Lam.)、胡桃(Juglans regia L.)和芝麻(Sesamum indicumLinn.)]11S种子储藏蛋白以及苦荞过敏蛋白(TBb和TBt)系统发育分析结果表明,这些蛋白可以分为3类,共具有4对旁系同源蛋白和3对直系同源蛋白;与已报道的苦荞过敏性储藏蛋白以及其它5个物种(花生、大豆、杏仁、胡桃和芝麻)的11S过敏蛋白比较发现,5个11S种子储藏蛋白(sample1_00013128-RA、sample1_00013130-RA、sample1_00021677-RA、sample1_00021668-RA和sample1_00021674-RA)与苦荞2个过敏蛋白的同源性较高,同时它们与胡桃11S过敏蛋白的同源性最高,但尚需进一步实验来确定这5个成员是否为食物过敏原;RNA-Seq转录组数据显示,4个基因(sample1_00018411-RA、sample1_00026786-RA、sample1_00021674-RA、sample1_00022718-RA)在2种荞麦属植物的灌浆期种子中表达水平较高,且在‘大苦1号’中的表达水平要高于‘大甜1号’。

含6X小黑麦血缘的抗病小麦新材料的种子储藏蛋白分析

:6 X小黑麦品种 Venus和 2个普通小麦品种杂交回交 ,选育出 NR9849等 8个系群 94个株系 ,其中大部份抗条锈病或 (和 )白粉病。应用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (APAGE)分析了 NR9849等系群的 6 4个株系及其亲本 Venus、小偃 6号和川育 12号的醇溶蛋白 ,结果表明 ,5 0 .0 0 %的株系具有 1RS/1BL所特有的 G1 d1 B3位点 ,2 0 .31%的株系在 Gli- 2位点发生了普通小麦与 6 X小黑麦遗传物质重组 ;6 4个株系中出现了 1种亲本类型 ,3种重组类型和 3种突变重组类型 ,突变率 15 .6 2 %。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)指出 ,大多数株系 Glu- 1位点与普通小麦亲本相同 ,即由 Glu- A1 编码的亚基1,Glu- B1 编码的亚基 7+ 8、14+ 15 ,Glu- D1 编码的亚基 5 + 10、2 + 12。文中还讨论了 6

应用A-PAGE技术研究玉米自交系资源种子蛋白的遗传多样性

采用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)技术对260份玉米自交系种质资源的种子储藏蛋白进行检测,分析了这组种质在蛋白水平上的遗传多样性。结果表明,在供试自交系中,种子盐溶和酸溶蛋白电泳谱带均显示出较高的多态性,并存在一致性。其中盐溶蛋白电泳谱带数目多于酸溶蛋白,且95%为多态性谱带,表明盐溶蛋白在供试自交系资源中具有丰富的多样性。利用盐溶蛋白多态性完成的聚类分析结果和自交系系谱及杂种优势群之间没有明显的对应关系,表明储藏蛋白A-PAGE方法对于大规模玉米种质资源的遗传多样性分析和类群划分可能存在局限性。