逆转录环介导等温扩增技术快速检测大豆花叶病毒

大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus，SMV）是一种在世界很多国家广泛分布并极具破坏性的植物病毒，导致大豆严重减产和种质衰退，每年都会给很多国家带来巨大的农业经济损失，为此，建立了一种逆转录环介导等温扩增（ Reverse-transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP）全新的SMV检测技术，利用该技术可以快速、准确与有效地检测大豆植株和种子中携带的SMV。根据GenBank数据库中大豆花叶病毒的外壳蛋白基因序列，设计并筛选到了SMV RT—LAMP特异性引物组，应用该引物组优化了RT—LAMP反应参数，灵敏度实验结果表明，RT-LAMP检测SMV比普通RT—PCR灵敏度高10～100倍。结合RNA粗提法，建立了一步法RT—LAMP快速、灵敏地检测到植物叶片中的SMV。加入荧光染料SYBR Green Ⅰ则可在反应管中直接观察检测结果，实现了检测的可视化。该RT-LAMP技术还可灵敏地检测到大豆种子中携带的SMV。RT-LAMP检测方法第一次应用于SMV的检测，具有灵敏度高、速度快和特异性强的优点，可应用于实验室和田间大豆样品SMV的快速检测。