绵羊痘种毒保存期试验

鸡胚化绵羊痘羊体反应细胞毒(以下简称“绵羊痘种毒”)是制备绵羊痘活疫苗的基础种子,对于预防和控制绵羊痘疫情具有重要意义,定期对其检定十分必要。2000年版《中华人民共和国兽用生物制品规程》(以下简称“《规程》”)规定:绵羊痘种毒在-30℃以下,保存期为10年。为进一步探究绵羊痘种毒的保存期,本试验选取1981年1月、1983年1月、1990年4月和2006年2月冻干并于-70℃保存至今的4株绵羊痘种毒,进行病毒含量测定和最小发痘量测定。结果显示,4株绵羊痘种毒的最小发痘量均达到10^(-5)/0.5 mL,符合《规程》之规定;病毒含量分别为10^(3.3)、10^(3.8)、10^(4.8)和10^(5.5) TCID_(50)/0.1 mL,且与最小发痘量在一定范围内呈正相关。结果表明,冻干绵羊痘种毒在-70℃条件下保存39年仍符合生产活疫苗的免疫原性标准,因此可将绵羊痘种毒的保存期延长至-70℃保存30年,本试验为绵羊痘种毒的保藏检定和疫苗生产提供数据支撑。

H9N2亚型禽流感流行株灭活疫苗种毒的筛选

为筛选出具有良好免疫原性的禽流感病毒(AIV)H9N2亚型灭活流行株种毒,选择2008年中国大陆8个省份15株H9N2亚型AIV分离株进行抗原性分析,选取代表流行株进行鉴定并制备灭活疫苗,进行免疫效力评估。实验结果显示,2008年分离株之间抗原性比较接近,与2000年前分离株的抗原性相差较大;2008年分离的8株病毒HA基因核苷酸同源率在93.2%～98.6%之间,而CK/SH/10/01毒株与这8株病毒的同源率仅在91.9%～93.5%之间;CK/ZJ/17/08、CK/SD/2CZ/08、DK/FJ/560/08、CK/FJ/521/08、CK/HuN/174/08和CK/HuN/33/08候选株病毒在SPF鸡胚上连续传15代HA价及致病性等均未改变,SPF鸡鼻腔感染106EID50各毒株后均无任何症状和死亡出现;候选株灭活疫苗免疫SPF鸡3周时,产生针对疫苗株抗原检测的HI抗体介于10.35log2～11.811log2,以106EID50剂量鼻腔感染途径攻毒后,只有CK/HuN/174/08和CK/HuN/33/08株灭活疫苗免疫鸡不仅可以对同源毒株的攻击提供良好的免疫保护,而且对2008年分离的异源毒株的攻击也能提供比较理想的免疫保护,可作为适合我国大部分地区应用的H9N2亚型禽流感灭活疫苗种毒株。

口蹄疫疫苗效检模型动物测毒及口蹄疫种毒冻干试验

应用豚鼠作为口蹄疫疫苗效检模型动物检测口蹄疫病毒对模型动物的病原性。用体重400g左右的豚鼠,将猪O型口蹄疫灭活疫苗效检攻毒毒株ORMF8经后肢部皮内注射途径进行测毒。测毒结果表明,口蹄疫病毒可引起豚鼠出现典型发病,并产生明显病变,ORMF8种毒对豚鼠的毒价可达105.5ID50/0.2mL。将乳鼠中和试验用种毒OMII按一定比例加入5%蔗糖脱脂牛奶稳定剂进行冷冻真空干燥试验,3次冻干试验结果表明,种毒冻干后病毒含量有一定程度的下降,但下降程度不显著。

IB(M41株)种毒代次和免疫原性的关系

评估不同代次IBV M41株种毒是否可以作为生产用种子。将M41株种毒用SPF胚连传8代,从中选出第3、第5、第7代,测定其EID50。并用此3代M41株鸡胚尿囊液制毒的油乳苗免疫易感鸡,以HI试验检测其抗体水平。3种疫苗免疫鸡均保护9/10以上,对照鸡全发病;对免疫后与免疫前HI抗体水平的比较表明,免疫后抗体平均滴度提高3倍以上。不同代次的M41毒株的免疫原性仍然保持良好,可以正常用来制造疫苗和建立种子批。

鸡新城疫活疫苗种毒HB1株和F株保存期试验

对不同保存年代的鸡新城疫活疫苗种毒HB1株(Ⅱ系)和F株(Ⅲ系)各3批进行了病毒含量测定和免疫原性试验。3批不同保存年代的鸡新城疫病毒HB1株和F株病毒含量均≥108.4EID50/0.1 mL,最小免疫量均≤2500 EID50。结果表明,鸡新城疫病毒HB1株和F株毒种在-70℃分别保存16年和19年,病毒含量和免疫原性仍符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》(二〇〇〇年版)规定。

鸡传染性支气管炎病毒H120株和H52株种毒的制备与鉴定

鸡传染性支气管炎病毒H120株、H52株种毒由中国兽医药品监察所制备和供应,种毒的保存期为10年,为了保证种毒的质量和供应,需要定期制备种毒。将H120株、H52株毒种接种SPF鸡胚进行传代培养,收获鸡胚尿囊液,与50 g/L牛乳蔗糖溶液等体积混匀,进行分装和冷冻真空干燥。对其进行剩余水分测定、真空度测定、病毒含量、安全性、免疫原性、纯净(无菌检验、支原体检验、外源病毒)和特异性检验,检验结果表明,各项检验均符合规定。同时为了区分H120株、H52株种毒,用实验室已建立的RT-PCR和酶切方法对两种种毒进行鉴别检验,结果表明能准确区分H120株和H52株种毒。试验结果为疫苗生产提供了能长期保存且稳定性好、高滴度的生产用种毒,也可为其他禽源病毒种毒的制备提供借鉴。

火鸡疱疹病毒种毒的保存期试验

火鸡疱疹病毒种毒的保存期试验李慧姣孙荣改吴贤福缪从容刘效文李启红中国兽药监察所，北京１０００８１收稿日期：１９９７－０９－１８根据中华人民共和国兽用生物制品规程（１９９２年版）规定，鸡马立克氏病冻干疫苗的毒种（火鸡疱疹病毒ＦＣ－１２６株）在－１５℃以...

新支二联苗种毒联合培养和联合免疫的研究

用不同毒株鸡传染性支气管炎病毒 (F3株、肾型J株、H1 2 0 -2 8/ 86株、H52 、H1 2 0 株 )分别按不同浓度 ( 1 0 0倍、4 0 0倍、70 0倍和 1 0 0 0倍 )与 1 0 0倍稀释的Lasota鸡新城疫病毒联合接种到 1 0日龄鸡胚尿囊腔 ,同时设单独培养作对照 ,96h后收取尿囊液 ,用对流免疫电泳法检测鸡传染性支气管炎病毒效价 ,用血球凝集试验检测尿囊液鸡新城疫病毒效价。结果表明 ,以NDV1 0 0倍和IBV1 0 0 0倍稀释混合作用后联合培养对二者病毒效价均无明显影响 ,NDV血凝效价可达 1b1 1 ,IBV对流免疫电泳沉淀效价可达 1b1 1 ,效果最佳。然后将上述培养液 ,用福尔马林溶液对其进行灭活 ,通过常规途径制备鸡新支二联油乳剂灭活苗。将此苗接种于 2 1日龄雏鸡 ,接种后 0 ,7,1 4 ,2 1 ,2 8,3 5 ,4 2 ,4 9d分别检测雏鸡NDV抗体和IBV抗体 ,检出的抗体平均值分别为 2 ,3 6 ,4 8,5 8,6 2 ,6 5 ,6 8,6 5和 2 ,3 3 ,4 6 ,5 9,6 2 ,6 4 ,6 6 ,6 4 ;攻毒保护率为 1 0 0 %。实验证明 ,以NDV1 0 0倍与IBV1 0 0

应用电镜技术对犬五联疫苗种毒的检查

应用电镜技术对犬五联疫苗种毒的检查李成（中国农科院哈尔滨兽医研究所哈尔滨，１５０００１）李六金，阎庆润（中国人民解放军第四军医大学，西安）（辽宁省营口市兽医站，营口）犬五联疫苗种毒包括犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒、狂犬病病毒。犬瘟热...

电镜技术对动物病毒性疫苗种毒的监测

电镜技术对动物病毒性疫苗种毒的监测李成（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨，１５０００）根据＂兽用新生物制品管理办法＂的规定，对病毒性疫苗毒种标准要求，在毒种中不应有支原体和外源性病毒。关于对这些非目的毒的检出，作者认为应用电镜技术是较好的方法。该...

鸡新城疫活疫苗(Lasota株)生产种毒的保存期试验

对3批置-70℃超低温冰箱的鸡新城疫(Lasota株)生产种毒进行保存期试验,检测结果表明,种毒在-70℃保存5年,病毒含量、免疫原性、安全性均达到规程要求,分别用该3批种毒生产9批鸡新城疫抗原病毒含量检测均≥108.83EID50/0.1ml,高于国家标准(国标>107.0EID50/0.1ml),因此鸡新城疫(Lasota株)生产种毒在-70℃存放保存期至少为5年。

影响口蹄疫贴壁种毒质量因素的研究

本文主要探讨影响种毒制备的一些因素,包括细胞状态、接毒量的改变及毒液保存条件对种毒质量的影响,研究得出如下结论:第一,细胞状态影响收毒时间的变化,同时一定程度上也影响LD50毒价的变化;第二,接毒含量增高收获时间缩短,而低剂量、正常剂量接毒传代试验均能获得合格的种毒支系,适宜的改变接毒量有助于提高种毒质量;第三,不论是4℃保存和还是-20℃冷冻保存,随着保存时间的延长,毒价匀有不同程度的损失,而且4℃保存的毒液下降率明显低于-20℃保存方式。因此,上述因素在生产中要细化研究对提高种毒质量起到指导意义。

牛口蹄疫AsiaⅠ型灭活疫苗研究——制苗用种毒的选择

用不同保存时期亚洲Ⅰ型口蹄疫 (AsiaⅠ ) 3株牛源强毒株回归牛体 ,经乳鼠传代、转适BHK 2 1传代细胞、用BEI灭活 ,制成双相油佐剂疫苗免疫豚鼠 ,对各个毒株的毒力、免疫原性、血清中和抗体、对抗原免疫应答的广谱性以及各种制苗材料的适应性进行综合分析 ,从中选出毒力强、免疫原性好和抗原谱较广的AsiaⅠCF3

Ⅰ型鸭肝炎病毒CRF98株生产用种毒的鉴定

将Ⅰ型鸭肝炎病毒CRF98株生产用种毒接种SPF鸡胚进行传代培养,收获鸡胚尿囊液。对其进行病毒含量、鸡胚毒力、免疫原性、特异性和纯净性进行检验,结果表明,各项检验均符合规定。试验结果为疫苗生产提供了病毒含量高、质量均一、稳定性好的生产用种毒。

PLC可编程控制器在种毒库管理方面的应用

生物制药厂和科研部门在种毒库的管理是非常重要的一个环节。它关系到生产的产品质量、后期的样品保存以及安全问题等。以往大多采用的是用通用仪表和巡检仪检测温度或报警,由值班人员定期巡检记录每台设备的温度。这种方式只能解决显示当前设备温度和超温报警等问题。

制猪瘟犊牛睾丸细胞苗用种毒的保存期试验

用犊牛睾丸细胞培养生产猪瘟活疫苗,猪瘟兔化弱毒种毒(脾毒)的保存期是保存于-15℃以下不超过15天。在实际大批量生产中,会受到多方面因素,特别是原材料供应等因素的影响,种毒的保存难免有时会超过15天的保存期。保存期超过了15天的脾毒继续应用于犊牛睾丸细胞苗的生产。

不同免疫水平的鸡胚生产鸡(ND、IB)二联苗使用不同剂量种毒的试验

两种病毒在同一胚体内培养,常出现两种情况:一是两种病毒互相促进,其结果两种病毒培养后的滴度比单一培养高。另一种是,两种病毒在同一鸡胚培养时,出现了互相干扰或某一种病毒对另一种病毒的干扰。NDV 和 IBV 两种病毒在同一鸡胚内培养,以上两种情况均可产生。如 IBV