PCR-DGGE结合种特异性PCR技术检测市售酸奶中乳酸菌

应用多聚酶链式反应结合变性梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE),并结合种特异性PCR技术检测酸奶中的乳酸菌组成。优化DGGE检测相关条件,结果表明最佳DGGE条件为:凝胶变性梯度范围30%～60%,电泳时间300min。利用上述条件能有效区分植物乳杆菌、乳双歧杆菌,但是无法区分保加利亚乳杆菌与嗜酸乳杆菌,嗜热链球菌、鼠李糖乳杆菌与干酪乳杆菌;在此结果基础上,再采用种特异性PCR技术,能够有效区分上述存在共迁移现象的菌株。采用上述技术检测6种市售酸奶中乳酸菌,发现6种产品中均包含保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌;3种产品含有干酪乳杆菌;1种产品标识有双歧杆菌,但未检测到。通过选择性培养基分离计数酸奶样品中乳酸菌,两种方法所得的检测结果相同,验证检测上述方法的可靠性。研究表明,PCR-DGGE与种特异性PCR技术结合可有效检测酸奶中乳酸菌组成。