秦巴虫草的人工培养研究

经过 3 a调查研究 ,从秦巴山区的野生虫草中分离出新的虫草菌种 ,通过在家蚕蛹和 5龄蚕体上培养 ,获得了与天然虫草形态相似的家蚕蛹虫草和 5龄蚕虫草 ,暂定名为秦巴虫草。试验证明其生物转化率在80 %以上 ,定向培养子座发生率在 48%左右 ,家蚕蛹虫草干重为 0 .2 1～ 0 .2 8g/个 ,5龄蚕虫草单个体重为0 .3 2～ 0 .40 g/条。

秦巴蛹虫草原生质体的制备及再生条件研究

【目的】研究秦巴蛹虫草原生质体制备及再生的最适条件,建立高效制备和再生原生质体的方法。【方法】以秦巴蛹虫草无性型菌株CM-16为材料,研究细胞壁裂解酶种类、酶解时间、酶解温度、菌丝体菌龄及稳渗剂种类对原生质体制备及再生效果的影响,并在单因素试验结果基础上进行正交优化试验。【结果】(1)以0.6mol/L NaCl为稳渗剂,用混合酶(质量分数1%纤维素酶和质量分数0.5%蜗牛酶按1∶1体积比混合)在(26±1)℃对菌龄6d的菌丝酶解3h,原生质体的产量最高。(2)以0.6mol/L甘露醇为稳渗剂,用混合酶(质量分数1%纤维素酶和质量分数0.5%蜗牛酶按1∶1体积比混合)在(26±1)℃对菌龄5d的菌丝酶解2h,原生质体的再生率最高;验证试验结果表明,在此条件下,原生质体再生率平均为25.7%,此时原生质体平均产量为83.42×105 mL-1。【结论】对酶解温度、酶解时间、菌丝体菌龄、稳渗剂及酶系种类等条件的优化,可提高秦巴蛹虫草原生质体的产量及再生率。