秦皮甲素和秦皮乙素的药理研究进展

秦皮为一种传统中药,其毒性低、临床应用范围广,常被运用于治疗目赤肿痛、湿热泻痢、赤白带下、血崩不止等病症。药理研究发现香豆素类化合物是秦皮的主要活性成分,其中秦皮甲素和秦皮乙素最具代表性。众多的研究显示,秦皮甲素和秦皮乙素在抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等方面展现出丰富的药理学活性,其潜在的开发利用价值日益受到关注。该文通过查阅国内外相关文献,对秦皮甲素和秦皮乙素的主要药理作用研究进行归纳,以期为秦皮的研发及临床运用提供参考依据。

秦皮乙素对人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响

目的探讨秦皮乙素(AES)对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响及相关机制。方法采用MTT法检测细胞增殖活性;采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;葡萄糖摄取量测定和乳酸含量测定实验检测细胞糖酵解情况;Western blot法检测迁移、侵袭及糖酵解相关蛋白的表达水平。结果AES能够抑制SGC-7901细胞的增殖活力,且这种抑制效果与AES的剂量成正相关。随着AES剂量的梯度增加,SGC-7901细胞的迁移、侵袭及糖酵解能力逐渐降低(P<0.05)。AES可以下调SGC-7901细胞HIF-1α、MMP-2、MMP-9、GLUT1、LDHA蛋白的表达水平(P<0.05)。结论AES对人胃癌SGC-7901细胞增殖活性及迁移、侵袭能力有抑制作用,通过抑制人胃癌SGC-7901细胞的葡萄糖摄取及乳酸生成降低糖酵解水平。AES可能通过影响缺氧诱导因子HIF-1α抑制SGC-7901细胞迁移、侵袭及有氧糖酵解过程。

秦皮水煎液干预类风湿性关节炎的作用研究

目的:观察秦皮水提取物对类风湿关节炎(RA)大鼠关节肿胀情况及组织形态、血清TNF-α、IL-1β和RF水平的影响。方法:50只雄性SD大鼠,依据随机数字表按体质量随机分为正常组、模型组、双氯芬酸钠组[3 mg/(kg·bw)]、秦皮高剂量组[1.4 g/(kg·bw)]和秦皮低剂量组[0.7 g/(kg·bw)]。以牛Ⅱ型胶原蛋白诱导建立RA大鼠模型,正常组、模型组灌胃15 mL/(kg·bw)蒸馏水;双氯芬酸钠组、秦皮高剂量组、秦皮低剂量组分别灌胃给予对应的受试药物。分别在实验第28、35、42天测量大鼠关节直径,第42天实验结束后处死大鼠,腹主动脉取血,离心取血清,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中TNF-α、IL-1β、RF水平,取踝关节组织HE染色观察病理变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠第35、42天关节直径水平显著升高(P <0.01),血清TNF-α、IL-1β、RF水平显著升高(P <0.01,P <0.05),炎性细胞浸润,骨膜增厚;与模型组比较,双氯芬酸钠组大鼠第42天关节直径水平显著降低,TNF-α、RF水平显著降低(P <0.05,P <0.01),踝关节炎性浸润改善,秦皮高剂量组大鼠第35天关节直径水平显著降低(P <0.01),血清IL-1β水平显著降低(P <0.01),踝关节炎性浸润缓解,秦皮低剂量组第35、42天关节直径水平显著降低(P <0.05),血清TNF-α、IL-1β、RF水平显著降低(P <0.05),踝关节炎性浸润减轻。结论:秦皮水煎液可改善大鼠类风湿关节炎,其作用可能与降低TNF-α、IL-1β、RF水平,改善踝关节病理组织形态有关。

重构本草——秦皮

通过古籍文献调研、中医药现代研究成果的梳理,结合中医临床及中药学等学科领域内知名专家学者的认识及应用经验,归纳出秦皮:功效主要为清热燥湿,收涩止痢,止带,明目。症靶为腹泻、痛风、目赤肿痛等。标靶为高尿酸。现代药理研究发现,秦皮及其有效成分具有抗菌抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降低血尿酸等作用。本品无毒,但脾胃虚寒者慎服。临床常用剂量为6~30 g,内服时当根据不同疾病,或同一疾病的不同阶段进行辨证使用,并积极探索秦皮用量与症靶、标靶的量效关系构建。

高效液相色谱紫外等吸收波长法快速测定秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素

研究建立了一种快速、环保和节约对照品的秦皮化学成分含量测定方法。秦皮样品采用25%(v/v)乙醇水溶液超声提取5 min。样品提取溶液采用Poroshell 120 EC-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm, 2.7μm)进行分析,0.1%甲酸水溶液-乙腈(94∶6, v/v)等度洗脱,流速1.5 mL/min。采用紫外分光光度仪对等浓度的秦皮甲素和秦皮乙素进行紫外光谱扫描,初步筛选得到2个对照品的等吸收波长,并用高效液相色谱仪对筛选得到的等吸收波长进行确证,从而获得2个对照品的等吸收检测波长341 nm。新建立的高效液相色谱紫外等吸收波长法的方法验证结果显示,秦皮甲素和秦皮乙素在各自的浓度范围内具有良好的线性关系(r=1.000 0),检出限和定量限分别为1.5μmol/L和3.0μmol/L,平均加标回收率分别为99.0%(RSD=1.4%)和97.5%(RSD=0.9%)。通过比较高效液相色谱紫外等吸收波长法和传统高效液相色谱外标法对10批秦皮样品中秦皮甲素和秦皮乙素的含量测定结果,显示两种方法测定结果一致。此外还采用t检验对该方法与《中国药典》2020版方法的含量测定结果进行比较,对比结果表明两种测定方法无显著性差异(P>0.05)。该方法耗时10 min,有害溶剂消耗0.5 mL,只使用1个对照品,具有快速、简便、环保和对照品消耗少的特点,适用于秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量测定,为秦皮质量评价的技术提升提供了依据。

秦皮的药理作用研究进展

秦皮(Cortex Fraxini)为常用中药,种类繁多,资源丰富,价格低廉,具有多种药理活性,且临床应用范围广,是极其重要并有很大开发利用价值的道地中药材。现代药理研究表明,秦皮具有抗病原微生物作用、抗炎镇痛作用、抗肿瘤作用、抗氧化作用以及神经保护和血管保护等作用。临床上秦皮主要用于治疗多种炎症、细菌性痢疾等疾病,并可用于清热解湿、止咳平喘。作者对秦皮的药理作用及其临床应用的国内外最新研究现状作一综述,为我国道地药材秦皮的新药开发研究提供参考。

HPLC法测定秦皮4种有效成分的含量

目的采用高效液相色谱法建立秦皮药材中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素的含量测定方法,为建立秦皮饮片质量评价体系提供含量测定方法学依据。方法制备秦皮供试品溶液,采用Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%甲酸水为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱。检测波长:254 nm测定秦皮甲素、秦皮苷和秦皮乙素,340 nm测定秦皮素。进样量:10μL,柱温:30℃,流速:0.8 mL·min^-1,依次进样分析。结果秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素质量浓度分别在78.60~1572、23.90~487.0、6.900~138.5、1.240~24.80 mg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9996、0.9996、0.9995、0.9996;秦皮供试品中,四者的平均回收率分别为98.1%、98.9%、98.1%和98.5%;RSD分别为1.5%、1.6%、1.2%和0.90%(n=6)。结论建立的方法适用于研究秦皮药材中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素的含量测定。

正交试验法优选秦皮香豆素醇提工艺

研究了秦皮主要活性成分秦皮香豆素的最佳醇提工艺,并采用了毛细管区带电泳(CZE)快速分析了秦皮苷、秦皮甲素、秦皮乙素的含量。以3种秦皮香豆素含量作为考察指标,采用L9(34)正交表,通过考察乙醇体积分数、提取次数、提取时间和料液比4个因素对醇提效果的影响,得到秦皮最佳提取条件为:以体积分数65%的乙醇为提取溶剂,在料液比1∶9(g∶mL)的条件下,回流提取3次,每次1h,秦皮总香豆素的得率为3.61%。

秦皮滴眼液抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路缓解兔自身免疫性干眼的实验研究

目的研究秦皮滴眼液改善兔自身免疫性干眼泪液学指标及眼表慢性炎症的机制。方法健康成年雌性新西兰大白兔随机分为对照组(CG)、模型组(MG)和秦皮组(QP),各12只。MG、QP组通过耳缘静脉回输激活的自体外周血淋巴细胞(PBL)建立兔自身免疫性干眼模型。CG、MG组兔予磷酸盐缓冲液滴眼,QP组兔予秦皮滴眼液滴眼,连续给药6周。给药完成后检测兔泪液学指标,包括泪液分泌量(SⅠT)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(FL)评分;取兔右眼泪腺进行称重,苏木精-伊红(HE)染色观察泪腺、角膜结构,过碘酸雪夫(PAS)染色观察结膜杯状细胞形态及密度;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western Blot法分别检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关的蛋白激酶B(Akt)、叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)、维甲酸核孤儿受体-γt(ROR-γt)mRNA和蛋白的表达水平。结果(1)泪液学指标:与CG组比较,MG组给药6周后兔的SⅠT、BUT降低(t_(SⅠT)=9.493,t_(BUT)=7.889,均P=0.000),FL评分升高(t=8.751,P=0.000);与MG组比较,QP组给药6周后兔的SⅠT、BUT升高(t_(SⅠT)=2.800,P=0.009;t_(BUT)=2.976,P=0.005),FL评分降低(t=2.586,P=0.014),差异均有统计学意义。(2)泪腺重量和组织形态:与CG组比较,MG组泪腺重量降低(t=6.038,P=0.000);与MG组比较,QP组泪腺重量升高(t=2.175,P=0.037),差异均有统计学意义。MG组泪腺腺泡结构破坏、大量淋巴细胞浸润,QP组泪腺淋巴细胞聚集较MG组少。(3)角膜组织形态:与CG组比较,MG组角膜增厚、细胞形态及排列不规则,QP组较CG组无明显改变。(4)结膜组织形态:与CG组比较,MG组结膜上皮细胞破坏,杯状细胞数降低(t=4.808,P=0.000);与MG组比较,QP组结膜上皮细胞排列整齐、杯状细胞数升高(t=2.295,P=0.028),差异有统计学意义。(5)PI3K/Akt/mTOR信号通路:与CG组比较,MG组Akt、ROR-γt的mRNA和蛋白表达水平升高(mRNA:t_(Akt)=11.810,t_(ROR-γt)=10.520,均P=0.000。蛋白:t_(p-Akt)=2.494,P=0.018;t_(ROR-γt)=2.325,P=0.026),Foxp3的mRNA和蛋白表达水平降低(:t_(mRNA)=11.350,t_(蛋白)=11.210,均P=0.000);与MG组比较,QP组Akt、ROR-γt的mRNA和蛋白表达水平降低(mRNA:t_(Akt)=5.879,t_(ROR-γt)=6.698,均P=0.000。蛋白:t_(p-Akt)=5.276,t_(ROR-γt)=6.232,均P=0.000),Foxp3的mRNA和蛋白表达水平升高(t_(mRNA)=5.003,t_(蛋白)=7.474,均P=0.000),差异均有统计学意义。结论秦皮滴眼液可以通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路缓解兔自身免疫性干眼。

秦皮乙素对大鼠心肌组织抗氧化能力的影响

目的:探讨秦皮乙素(esculetin,ESC)对多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导心肌细胞氧化应激的影响。方法:将SD大鼠分为对照组、DOX组、ESC低、高剂量+DOX组,检测各组大鼠心肌组织中SOD、MDA及血清心肌酶变化;通过Masson染色,比较各组心肌组织中胶原纤维的量的变化;Western blot法检测抗氧化相关蛋白的表达。结果:ESC可升高DOX诱导后心肌组织中SOD水平,同时降低由DOX所致心肌酶及MDA升高(P<0.05);DOX干预后心肌组织中胶原纤维明显增多,而ESC预处理后的心肌组织胶原纤维明显减少;ESC可降低由DOX引起P53含量的增多(P<0.05),并上调心肌组织中的抗氧化酶HO-1(P<0.05)、MDM2(P<0.05)和Nrf2(P<0.05)的表达。结论:秦皮乙素可改善多柔比星诱导的心肌组织氧化应激损伤,并对心肌组织起保护作用。

秦皮乙素/蛇床子素的晶体结构研究

报道了香豆素类药物秦皮乙素的两种同质异晶和蛇床子素的晶体结构,这三种晶体结构(同质异晶1-2和蛇床子素3)同属单斜晶系,其中,同质异晶1和蛇床子素3属C2/c空间群,而同质异晶2则属P21/c空间群.同质异晶1-2中的秦皮乙素分子分别以不同类型的传统O—H…O强氢键构建出沿不同方向延伸的一维链状结构,而蛇床子素3则主要靠C—H…O弱氢键与范德华力结合形成稳定的晶体结构.

自拟芩连秦皮汤对小儿细菌性腹泻的疗效及肠道屏障功能、血清炎症因子的影响

目的:研究自拟芩连秦皮汤辅助改善小儿细菌性腹泻的效果及其对肠道屏障功能和血清炎症因子的影响。方法:选取2018年10月~2021年10月我院小儿细菌性腹泻患儿104例,采用随机数字表分为观察组和对照组各52例,对照组给予常规治疗,观察组此基础上应用自拟芩连秦皮汤辅助治疗,两组疗程均为5d,比较治疗前后患儿症状体征、肠黏膜屏障功能和血清炎症因子水平。结果:治疗5d时,观察组显效率为76.92%,高于对照组57.69%,且观察组中医证侯积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后腹泻、腹痛和发热消失时间低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗5d时观察组血清D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、内毒素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和降钙素(PCT)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:自拟芩连秦皮汤辅助治疗小儿细菌性腹泻脾虚湿热证可促进患儿症状缓解,缩短病程时间,改善肠黏膜屏障功能和机体炎症反应,对提升临床疗效具有积极作用。

秦皮药材的质量评价

目的 评价秦皮药材的质量 ,为药典标准修订及新药研究提供依据。方法 采用紫外分光度法定量分析秦皮有效部位的总香豆素 ;高效液相色谱法定量分析香豆素中的主要成份秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷及秦皮亭。结果 秦皮中的总香豆素及其主要成份在枝皮中远较干皮高 ,并以枝条越细含量越高 ,干皮中含量较低 ,远不能达药典限度要求 ;秦皮饮片炮制过程中 ,“洗净 ,润透”过程对香豆素类成分影响较大。结论 建议药典将秦皮干皮与枝皮的含量限度分列 ,或者考虑干皮不作为其入药部位 ;炮制时不再洗与浸 ,直接干切。

HPLC测定秦皮胶囊的主要成分

目的建立同时测定秦皮胶囊中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮亭含量的方法.方法采用HPLC法,样品经甲醇溶解,超声处理后,采用Shimpack CLC-ODS(6.0 mm ×150 mm,5 μm )色谱柱,溶剂A [甲醇-乙腈 (2∶1)]-溶剂B [0.1%三乙胺溶液(磷酸调pH 3.0)](23∶77)为流动相,流速1.0 ml·min-1,检测波长348 nm,柱温30℃.结果秦皮甲素在0.145～0.726 μg、秦皮苷在0.112 ～ 0.560 μg、秦皮乙素在0.082 ～ 0.412 μg、秦皮亭在0.110 ～0. 552 μg范围内均呈良好的线性关系,秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮亭的加样回收率分为99.77%(RSD=0.48%)、99.67%(RSD=0.75%)、98.80 %(RSD=1.02%)、98.83 %(RSD=1.10%),n＝9.结论所用方法操作简便、重复性好,结果准确可靠,可满足其质量控制要求.

秦皮配方颗粒UPLC指纹图谱研究

目的：建立秦皮配方颗粒的超高效液相（UPLC）指纹图谱,为秦皮配方颗粒的鉴别及其质量控制提供实验依据。方法：采用UPLC法,以Zorbzx Eclipse XDB C18（2.1 mm×100 mm,1.8μm）为色谱柱;甲醇-0.4%醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 m L·min-1;检测波长为245 nm;柱温25℃。结果：建立了秦皮配方颗粒的UPLC指纹图谱,以秦皮甲素为参照,确定了15个共有峰为特征峰,并指认出1号峰为秦皮甲素、2号峰为秦皮乙素、3号峰为秦皮苷、4号峰为秦皮素,对照指纹图谱色谱峰丰富,相似性好。结论：该方法稳定、可靠,可用于秦皮配方颗粒的快速鉴别、质量评价与控制。

藏药八味秦皮丸中秦皮甲素、秦皮乙素和麝香酮的定量测定

目的建立八味秦皮丸(秦皮、针铁矿、草莓、多刺绿绒蒿、寒水石、美丽风毛菊、朱砂、麝香)质量标准中的定量测定项。方法采用高效液相色谱法测定秦皮甲素和秦皮乙素,色谱柱为依利特C18柱(4.6mm×250mm);流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(27∶73);体积流量为1.0 mL/min;柱温为室温;检测波长为344.4 nm。采用气象色谱法测定麝香酮,色谱柱为HP-5毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);载气为氮气(99.99%);检测器温度为250℃;分流比为40∶1;程序升温150℃开始以10℃/min速度升温至170℃保持4 min,然后以15℃/min速度升温至230℃保持5 min。结果秦皮甲素、秦皮乙素进样量分别在0.200～2.502μg、0.120～1.503μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率分别为100.71%、100.38%,RSD分别为0.65%、0.87%(n=6);麝香酮进样量在15.20～152.0μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.27%,RSD为0.74%(n=6)。结论该方法灵敏、准确、专属性强,可用于八味秦皮丸中秦皮甲素、秦皮乙素、麝香酮的定量测定。

不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素、秦皮乙素的含量测定

目的 :测定不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素和秦皮乙素的含量。方法 :采用HPLC法 ,以乙腈 水 (15∶85 )为流动相 ,使用NovapakC18柱 ,检测波长 348nm ,外标法。结果 :进样量与峰面积线性关系良好 ,秦皮甲素与秦皮乙素的r值分别为 0 .9992 ,0 .9994 ,平均回收率分别为 98.2 % ,99.2 % ,RSD分别为 2 .2 4 % ,2 .15 %。因地理种源不同而造成的秦皮质量差异明显存在 ,陕西产秦皮质量上乘。结论 :本法操作快速、简便、易行 ,精密度、重复性、稳定性好 ,适用于秦皮含量的分析测定。

正交试验优选膝可保方中白芍和秦皮的提取工艺

目的优选膝可保方中白芍和秦皮的提取工艺。方法以芍药苷、秦皮甲素、秦皮乙素的含有量为评价指标,以加水量、煎煮时间、煎煮次数为影响因素,正交试验优选提取工艺。结果最佳条件为加水量10倍,煎煮3次,每次1 h,芍药苷的提取率为90.52%,秦皮甲素和秦皮乙素的总提取率为80.17%。结论该方法稳定可行,可用于提取膝可保方中的白芍和秦皮。

秦皮苷对肺炎克雷伯菌所致重症肺炎大鼠肺组织损伤及纤维化的作用及机制研究

目的探究秦皮苷对肺炎克雷伯菌所致重症肺炎大鼠肺组织损伤及纤维化的作用,并分析可能的机制。方法50只大鼠随机分为对照组、模型组及秦皮苷低、中、高剂量组(10只·组^(-1)),除对照组外其余各组大鼠均建立肺炎克雷伯菌所致重症肺炎模型,并于建模成功后,秦皮苷低、中、高剂量组大鼠给予10、20、40 mg·kg^(-1)秦皮苷溶液灌胃处理(连续7 d),模型组及对照组同时间给予等量生理盐水灌胃处理。采用全自动血气分析仪检测血清中动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、动脉血氧饱和度(SaO_(2))、动脉氧分压(PaO_(2));苏木精-伊红(HE)染色、胶原纤维(Masson)染色观察肺组织病理学变化并对小鼠肺纤维化程度进行评分;免疫印迹法检测各组大鼠肺组织中蛋白激酶B(Akt)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白水平。结果与对照组比较,模型组大鼠血液中PaCO_(2)活性、肺纤维化评分、肺组织中p-Akt/Akt、HIF-1α、CollagenⅢ蛋白水平均升高,SaO_(2)、PaO_(2)水平均降低(P<0.05);与模型组比较,秦皮苷低、中、高剂量组大鼠血液中PaCO_(2)活性、肺纤维化评分、肺组织中p-Akt/Akt、HIF-1α、CollagenⅢ蛋白水平均降低,SaO_(2)、PaO_(2)水平均升高(P<0.05)。结论秦皮苷能够改善肺炎克雷伯菌所致重症肺炎大鼠肺组织损伤及纤维化,可能是通过抑制Akt/HIF-1α通路活化抑制胶原沉积实现的。