枯草杆菌蛋白酶与3,4-二羟基-2-蒽醌磺酸钠的作用机理

用UV光谱法研究了枯草杆菌蛋白酶 (BSP)在pH =4 2 0的酸性溶液中与 3,4 二羟基 2 蒽醌磺酸钠(ARS)的相互作用。测得生成的缔合物的最大吸收峰为 5 15nm ,与试剂相比红移 95nm。应用平衡透析法、摩尔比法和双波长法进行测定 ,结果表明 ,表观摩尔吸光系数εB1=5 89× 10 3 L/ (mol·cm) ,εB2 =4 6 8×10 3 L/ (mol·cm) ,结合数n1=13和n2 =4 5 ,积累平衡常数 β1=5 2 7× 10 4L/mol和 β2 =3 5 4× 10 5L/mol。第 1类结合数完全符合BSP空间构象中活性中心的作用原子数。研究发现 ,该反应基本符合Scatchard模型 ,BSP与ARS之间的作用以电荷力为主、疏水力为辅。