电脑绣花机移框机构及其分析

通过对同步齿形带、扇齿轮摇杆机构及钢丝柔性传动三种不同传动方式的绣花机移框机构对比分析，明确了它们各自的适用范围。

框支剪力墙结构的设计与分析

通过对框支剪力墙高层结构主要设计的介绍,重点讨论了结构选型、分析计算。并针对抗侧移构件在高层建筑设计中的重要作用进行了讨论。为减少转换层刚度突变给结构抗震带来的不利影响,设计中合理调整了转换层及各层的构件布置及尺寸,并采取各种抗震构造措施来改善结构的抗震性能。

一种人神经母细胞瘤辅酶II-依赖性视黄醇脱氢酶cDNA的克隆及特征分析

背景与目的:检测神经母细胞瘤中新的辅酶II_依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)_dependen tretinold ehydrogenase/reductase,NRDR]选择性剪接亚型。材料与方法:我们用NRDR特异引物,从人神经母细胞瘤细胞系SK_N_SH和SK_SY_5YcDNA中分别经PCR扩增出635bp和429bpDNA片段,测序证实635bp片段是NRDR,而429bp片段是选择性剪接新亚型。再用快速cDNA末端扩增(Rapidamplification of cDN Aends,RACE)方法得到429bp片段cDNA全长序列。用绿色荧光蛋白与新亚型的融合蛋白做亚细胞定位。结果:得到新亚型全长并命名为humanNRDRA2(hum NRDRA2)(AY616182)。已知NRDR有8个外显子,而新亚型hum NRDRA2由选择性剪接造成了第4和第6外显子丢失,从第5外显子开始读码框架前移1bp,导致随后的编码区框码漂移(frameshift),同时蛋白翻译终止信号提前出现,产生仅有188个氨基酸的蛋白,其中第137氨基酸以后的序列相对于NRDR完全发生改变,同时C_末端的过氧化物酶体定位信号_SRL丢失,却在160～176氨基酸处出现了一个细胞核定位信号。我们在ESTs库中未找到与其相同的剪接形式,提示它可能是神经母细胞瘤特有的一种NRDR剪接亚型。用GFP_NRDRA2融合蛋白做该蛋白的亚细胞定位,发现发绿色荧光的细胞均已悬浮,但悬浮状态不佳,而作为对照的NRDR另一亚型则能定位成功,提示NRDRA2蛋白可能具有一定的细胞毒性。结论:人神经母细胞瘤NRDRA2选择性剪接亚型羧基端框移突变并有核定位序列;该蛋白可能是一种细胞毒性蛋白。

蛋白质序列与EST序列的反翻译联配

随着大规模测序技术的进步 ,收录到数据库中的序列增长很快 ,其中大多是未知功能的ESTs(表达序列标签 ,ExpressedSequenceTags)。一般通过蛋白质 -EST序列联配来实现EST的功能提示。由于EST含有5 %左右的测序误差 ,特别严重的是其中的移框误差 ,用通常的方法将EST按6个阅框翻译为蛋白质序列再进行联配难以处理移框误差问题。通过考虑EST序列各种可能的测序误差 ,将氨基酸序列反翻译为核苷酸序列 ,在核酸水平直接进行序列联配 ,用以实现蛋白质与EST序列的精确匹配 ,并对EST序列的移框误差进行识别与校正。

结节性硬化症的两个TSC2基因新发框移突变

该研究采用高通量测序对两个结节性硬化症(TSC)家系先证者外周血DNA行TSC相关基因(TSC1、TSC2)及其拼接序列检测,确定基因突变位点,针对突变位点设计扩增引物,采用聚合酶链反应和Sanger测序法对先证者及其父母外周血DNA行一代测序验证。两家系先证者分别存在TSC2基因c.3981-3982ins A(p.Asp1327Aspfs X87)、c.4013-4014 delCA(p.Ser1338Cysfs)杂合突变。家系1先证者父母该位点均未见异常;家系2先证者母亲检出TSC2基因c.4013-4014 delCA杂合突变,先证者父亲、先证者外祖父母该位点未见异常。c.3981-3982 insA突变会导致氨基酸序列在第1413位提前终止编码,c.4013-4014 delCA突变导致氨基酸序列在第1412位提前终止编码,二者分别为家系1、家系2的致病突变,且均为新发框移突变,但与疾病的关系仍需要突变蛋白功能细胞模型和动物模型的进一步验证。

一个遗传性出血性毛细血管扩张症家系的基因分析

目的研究一个遗传性出血性毛细血管扩张症（HHT）家系的ENG、ACVRL1、SMAD4基因突变情况，探讨其分子发病机制。方法对1例HHT患者进行临床诊断和家系调查。采集先证者及其长子外周血标本，应用芯片捕获高通量测序法进行ENG、ACVRL1、SMAD4基因分析，对检出的突变以Sanger测序法进行验证。结果71名家系成员中有9名被临床诊断为HHT，均以反复鼻腔出血为主要表现。基因分析结果显示，先证者及其长子ENG基因9号外显子存在框移突变c．1502—1503insGG（p．Gly501GlyfsX18），未检出ACVRL1、SMAD4基因突变。结论ENG基因框移突变c．1502．1503insGG（p．Gly501GlyfsX18）是这个HHT家系致病的遗传学基础。

鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白与细胞增殖抑制

鸟胺酸脱羧酶抗酶(ornithine decarboxylase antizyme,OAZ)基因通过特殊的阅读框移机制翻译全长有功能的抗酶蛋白,结合并降解鸟氨酸脱羧酶,使细胞内多聚胺浓度下降,抑制细胞增殖。抗酶还能结合cyclinD1,阻滞细胞周期。此外,OAZ还能够引起肿瘤细胞逆分化。它在多种肿瘤细胞中呈低表达,对肿瘤细胞的基因治疗有重要意义。

昆虫线性单链DNA病毒表达策略研究进展

昆虫线性单链DNA(linear single-stranded DNA,linear-ssDNA)病毒感染的昆虫种类很广泛。它们主要归属于细小病毒科(Parvoviridae)的浓核病毒亚科(Densovirinae)和二分DNA病毒科(Bidnaviridae)。近年来,随着宏基因组学方法的发展,越来越多的昆虫linear-ssDNA病毒被发现,其基因组转录模式也逐渐被解析。昆虫linear-ssDNA病毒的基因组具有双义和单义两种类型,因此,该文将阐述双义和单义两种类型基因组的表达策略特征。总结来讲,其主要是通过未剪接(unsplicing)、选择性剪接(alternative splicing)、选择性多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation)等转录方式产生多种转录本,采用选择性起始(alternative initiation)、漏扫描(leaky scanning)或移框(frameshifing)等方式表达蛋白质。现综述昆虫linearssDNA病毒的表达模式类型和研究进展,为研究其他的linear-ssDNA病毒的表达策略提供理论参考。

一个杂合缺失变异致遗传性蛋白C缺陷症家系的表型和基因型分析

目的分析1个遗传性蛋白C(protein C,PC)缺陷症家系的表型和基因变异。方法对先证者及家系成员(共4代11人)采用发色底物法检测血浆蛋白C活性(protein C activity,PC:A),酶联免疫吸附法检测蛋白C抗原(protein C antigen,PC:Ag)含量。PCR法对先证者蛋白C基因(protein C,PROC)的9个外显子及侧翼序列进行扩增,PCR产物纯化后进行直接测序;对发现的疑似变异用克隆测序予以验证,并对家系其他成员相同变异位点进行检测。分别用生物信息学软件Mutation Taster和ClustalX-2.1-win分析变异的致病性和保守性;用Swiss-PdbViewer软件分析蛋白质三维模型和变异氨基酸之间的相互作用。结果先证者PC:A和PC:Ag分别降至46%和50%,其奶奶、大姑、表姐和弟弟的PC:A和PC:Ag也有不同程度的下降,为正常参考值的50%左右。基因分析显示,上述5名成员PROC第9外显子均存在c.1212-1212delG(p.Met364Trp fsX15)杂合缺失变异,该缺失变异导致第364位的甲硫氨酸(Met)变成色氨酸(Trp)后框移了15个氨基酸,并在第378位产生提前的终止密码子,最后形成截短蛋白。MutationTaster评分结果为1.000,预示该杂合缺失变异为致病变异;保守性分析显示15个框移的氨基酸在9种同源物种中均位于保守区域;蛋白质模型分析显示该缺失变异破坏了PC的催化结构域,从而影响PC的功能。结论先证者PROC第9外显子存在c.1212-1212delG(p.Met364Trp fsX15)杂合缺失变异,可能是导致该家系PC:A和PC:Ag减少的主要原因。