移植异体血管内皮祖细胞向大鼠损伤皮肤的趋化

背景:目前关于移植异体内皮祖细胞参与机体缺血组织血管改建的研究正成为热点。目的:观察移植的同种异体内皮祖细胞向大鼠皮肤损伤区趋化的情况。方法:以BrdU标记体外培养的大鼠外周血内皮祖细胞,通过尾静脉回输于背部皮肤有切割伤的大鼠(实验组)体内,以正常大鼠为对照,采用免疫荧光染色观察细胞移植后1,3,7,14d时受体大鼠皮肤损伤区BrdU阳性内皮祖细胞的数量变化情况,苏木精-伊红染色观察受体大鼠脾脏淋巴滤泡数量和体积变化情况。结果与结论:移植的内皮祖细胞可以向大鼠皮肤损伤区趋化,3,7d时内皮祖细胞数量最多(P<0.05),14d时在损伤区血管内壁中仍可见BrdU阳性细胞。实验组大鼠脾脏淋巴滤泡的数量和体积与对照组相比没有明显差异,证实移植同种异体内皮祖细胞没有引起明显的免疫排斥反应。

微粒皮移植异体皮覆盖治疗大面积深度烧伤的应用体会(附6例报告)

微粒皮移植异体皮覆盖治疗大面积深度烧伤的应用体会（附６例报告）何士平高庆祥王万东姚明大面积深度烧伤病人的治疗关键在于创面修复。过去两年中我们采用张明良报道〔１〕的微粒皮移植治疗大面积深度烧伤６例取得良好效果，现报告如下。１临床资料１．１一般资料：本组...

小鼠骨髓间充质干细胞移植异体睾丸的研究

目的:研究小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)移植异体睾丸.方法:①分离5～6周龄的BALB/c小鼠胫骨、股骨,冲出骨髓,用Percoll密度梯度离心法和贴壁法分离、培养、纯化MSCs.②取第3代MSCs,用Hoe-chest33342标记并观察,制备细胞悬液.③用睾丸网注射法将标记的MSCs移植入异体小鼠睾丸内,于各时相点取睾丸组织,在3个位点连续制作快速冰冻切片,镜下观察.结果:①传至3代即可得到数量较多的纯化的MSCs.②在荧光显微镜下,标记的MSCs细胞核呈亮黄色.③用睾丸网注射法行小鼠MSCs移植异体睾丸成功,未见免疫排斥反应发生.移植后1、3 d,只在中间的切片上见到MSCs,细胞核呈亮黄色,两侧的切片未查到MSCs,移植后1 d细胞较集中,移植后3 d细胞散在分布;移植后6、9、12 d,3个位点的切片均见MSCs,部分MSCs排列呈管状;移植后15、18 d,MSCs的核荧光有所减弱;移植后21 d,荧光消失.结论:用睾丸网注射法将小鼠MSCs移植异体睾丸获得成功,未见免疫排斥反应发生,移植后的MSCs存活.

同种异体腓骨移植联合锁定加压钢板固定治疗老年粉碎性肱骨近端骨折的临床研究

探究老年粉碎性肱骨近端骨折中,应用同种异体腓骨移植联合锁定加压钢板固定的价值。方法 研究样本共计60例,均纳入于我院2023.07-2024.07期间,诊治肱骨近端3、4部分骨折患者,分组情况方面,按照完全随机设计方法,将样本划分为移植组(n=30,锁定钢板+异体腓骨移植)、单纯组(n=30,单纯锁定钢板),对比其在围手术期、随访、经济指标以及并发症方面的差异。结果 手术时间方面,两组对比情况基本一致,在统计学方面,无意义(P>0.05),其他指标,移植组均优于单纯组(P<0.05);随访评估指标方面,移植组均优于单纯组(P<0.05);术后并发症方面,移植组低于单纯组(P<0.05);经济指标方面,移植组均低于单纯组(P<0.05)。结论 老年骨折中,将同种异体腓骨移植进行灵活应用,同时辅以锁定加压钢板固定的价值较为理想,可以让患者一般指标、随访评估指标方面获得改善,降低并发症发生情况,减轻经济压力。

小鼠颈部同种异体心脏移植模型学习曲线分析

目的探讨小鼠颈部同种异体心脏移植模型建立的学习曲线特点。方法回顾性分析课题组行60只小鼠颈部同种异体心脏移植模型制备的资料,分别记录手术过程中移植总时间、受体准备时间、供体准备时间、动静脉套管制成时间、供体心血管连接时间,采用累积和(CUSUM)分析法及最佳拟合曲线获取各阶段移植手术的学习曲线中渡过学习期所需最小手术样本数。以学习曲线最长手术阶段的最小手术样本数作为界限将小鼠分为学习阶段组和成熟阶段组,比较各组手术时间及手术失败率的差异。结果60只小鼠完成颈部心脏移植,移植总时间为(119.80±43.17)min,受体准备时间为(76.43±26.46)min,供体准备时间为(29.85±9.82)min,动静脉套管制成时间为(32.10±21.62)min,供体心血管连接时间为(17.47±8.43)min。对CUSUM学习曲线进行拟合,采用三次方时拟合度最高,各阶段手术时间学习曲线所对应的最小手术样本数依次是受体手术25,供体手术19,动静脉套管制成29,供体心血管连接24,手术全过程25。以学习曲线最长的手术阶段(动脉套管制成)的最小样本数29为分界点分为两组,与学习阶段组相比,成熟阶段组移植总时间[(156.80±32.80)min对(85.06±9.45)min]、受体准备时间[(95.41±18.89)min对(50.94±7.45)min]、供体准备时间[(37.03±9.51)min对(23.13±2.95)min]、动静脉套管制成时间[(50.41±16.65)min对(14.97±5.74)min]、供体心血管连接时间[(24.38±7.16)min对(11.00±1.55)min],均明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。成熟阶段组手术失败率较学习阶段组明显降低(48.28%对9.68%,P=0.0013)。结论建立小鼠颈部同种异体心脏移植模型的学习曲线在各手术阶段略有差异,手术样本数达29以后技术基本成熟。手术技术成熟后手术时间及成功率都会有明显改善。

同种异体骨软骨移植治疗软骨损伤的历史

随着体育运动的快速发展,膝关节局限性关节软骨损伤患者不断增多。由于软骨损伤不能自我修复,临床上对青壮年局限性较大软骨损伤的治疗尤为棘手。同种异体骨软骨移植是治疗青壮年大面积软骨损伤比较满意的治疗方法,美国及欧洲一些国家对同种异体骨软骨移植的研究较多,也取得了较好的临床疗效,但我国对其研究尚未得到重视和发展。鉴于此,本刊开设“同种异体骨软骨移植”专栏,将对同种异体骨软骨移植发展历史和现状、软骨组织的获取和保存及临床应用等内容进行系统介绍,以期推动我国同种异体骨软骨移植的应用与发展。

异体移植炎症因子1对草鱼白细胞活力及炎性因子释放的影响

为了阐明草鱼异体移植炎症因子1在宿主免疫应答中的作用,实验采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测了脂多糖刺激后草鱼外周血白细胞分泌异体移植炎症因子1的水平。将不同浓度草鱼异体移植炎症因子1重组蛋白加入到外周血白细胞培养液中。48 h后,利用CCK-8试剂盒检测白细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,活性氧和一氧化氮试剂盒检测细胞氧自由基和一氧化氮水平,ATP试剂盒和线粒体膜电位试剂盒检测线粒体功能状态,ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6释放。结果显示,脂多糖刺激了草鱼外周血白细胞异体移植炎症因子1的分泌,而过量的异体移植炎症因子1诱导了白细胞增殖,通过改善线粒体膜电位,增强了ATP的产生,从而抑制细胞凋亡。同时异体移植炎症因子1激发了白细胞产生炎性介质活性氧和一氧化氮及释放炎性细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6。本研究表明,草鱼异体移植炎症因子1增强了白细胞活力和炎性因子的释放。本实验首次证实草鱼异体移植炎症因子1是一个新的免疫细胞因子,参与了宿主细胞的免疫应答,同时阐明了异体移植炎症因子1诱导草鱼白细胞增殖并抑制其凋亡,且促进白细胞释放炎性因子,从而增强草鱼对外源物质的免疫抵抗作用,为草鱼免疫应答相关的研究提供了新的思路。

异体骨髓移植后早发性卵巢功能不全患者首疗程激素补充治疗月经预测模型的建立

目的:研究建立异体骨髓移植(allo-HSCT)后早发性卵巢功能不全(POI)患者首疗程激素补充治疗(HRT)的月经预测模型,为制定激素补充治疗方案提供一定参考价值。方法:选择2017年1月至2022年10月在苏州大学附属第一医院就诊的allo-HSCT后POI患者154例进行回顾性分析,根据首疗程HRT后月经来潮情况分为理想月经组(116例)和非理想月经组(38例)。单因素分析比较两组一般特征和临床资料差异后,选择纳入的预测因子。将纳入人群随机拆分为训练集和验证集后,利用随机森林算法构建训练集的月经预测模型,并通过验证集验证模型的预测效率。最后将模型制作成用户交互界面并部署至服务器共享。结果:单因素分析结果示,两组患者就诊年龄、体质量指数(BMI)、孕次、产次、血液病诊断、移植年龄、供体性别、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、腰椎骨密度(BMD)、HRT方案差异均有统计学意义(P<0.05)。依据平均准确度下降程度选择纳入模型的预测因子为就诊年龄、移植年龄、BMI、FSH、HRT方案、产次、孕次。初步构建随机森林模型后,优化模型参数,决策树数量(ntree)=500,特征数(mtry)=6,以80%和20%划分训练集和验证集,使模型拟合度高的同时误差率稳定,采用十倍交叉验证降低过度拟合。最终构建的月经预测模型曲线下面积为0.768,灵敏度为0.695,特异度为0.735。结论:本研究成功建立了allo-HSCT后POI患者首疗程HRT的月经预测模型,该模型假阳性率较低,提示当模型预测结果为非理想月经时,可考虑调整拟定的HRT方案,以促进早期月经来潮。

常规超声联合瞬时弹性成像预测肝移植患者早期同种异体移植物功能障碍的临床价值

目的 探讨常规超声联合瞬时弹性成像预测肝移植患者早期同种异体移植物功能障碍(EAD)的临床价值。方法 回顾性分析我院37例脑死亡器官捐献(DBD)供者肝脏(以下简称供肝)影像学资料,所有供肝移植前均行常规超声及瞬时弹性成像检查获取超声分级、受控衰减参数(CAP)、肝脏硬度值(LS),根据相应受者术后1周内是否发生EAD将其分为EAD组17例和非EAD组20例,比较两组供肝超声分级、CAP及LS的差异。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析供肝超声分级、CAP、LS单独及联合预测肝移植患者EAD的诊断效能。结果 EAD组供肝CAP、LS及超声分级均高于非EAD组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,供肝CAP、LS、超声分级截断值分别为206 dB/m、5.5 kPa、3.5级时,预测肝移植患者EAD的曲线下面积(AUC)分别为0.854、0.729、0.762,供肝超声分级联合CAP、LS预测肝移植患者EAD的AUC最高,为0.888,与供肝超声分级、LS的AUC比较差异均有统计学意义(均P<0.05);其余两两比较差异均无统计学意义。结论 常规超声联合瞬时弹性成像在预测肝移植患者EAD中有一定的临床价值。

同种异体骨移植重建四肢恶性骨肿瘤切除后骨缺损的手术配合

目的探讨同种异体骨移植修复重建四肢恶性骨肿瘤切除后骨缺损的手术配合要点和应用体会。方法收集2015年6月至2022年6月郑州大学第一附属医院完成的24例四肢恶性骨肿瘤切除后骨缺损进行大段同种异体骨移植重建手术患者临床护理资料。结果24例患者手术均得到顺利配合,手术平均时间(4.6±1.1)h,无术中不良事件发生,术后均未发生移植异体骨或假体周围骨折、无关节脱位及假体松动。其中21例肢体功能优良,肌肉骨骼肿瘤学会评分(22.3±5.7)分。结论良好的术前护理计划、术中严格无菌及无瘤操作、准确熟练手术医护配合及术后严密随访是同种异体骨移植重建四肢恶性骨肿瘤切除后骨缺损的手术配合关键。

局部皮瓣联合异体巩膜移植修复眼睑及其周围皮肤缺损疗效观察

目的:观察局部皮瓣联合异体巩膜移植修复眼睑及其周围皮肤缺损的临床效果。方法:选取2019年1月-2021年1月笔者医院收治的90例眼睑恶性肿瘤切除术后眼睑及周围皮肤缺损患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组,各45例,对照组采用异体巩膜移植修复,观察组在此基础上联合局部皮瓣修复,比较两组修复效果,修复前后睑裂长度、眼睑高度差值以及修复后6个月瘢痕宽度、瘢痕颜色、弹性、平整度、眼睑形态恢复程度、外观满意度评分,以及并发症发生情况。结果:观察组修复总有效率高于对照组(P<0.05);两组修复后睑裂长度、眼睑高度均较修复前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);观察组修复后6个月瘢痕宽度小于对照组,瘢痕颜色、弹性、平整度、眼睑形态恢复程度、外观满意度评分均高于对照组(P<0.05);观察组术后上睑下垂、睑缘切痕等并发症总发生率低于对照组(P<0.05)。结论:局部皮瓣联合异体巩膜移植修复眼睑及其周围皮肤缺损疗效显著且并发症少,术后眼睑形态及美学效果良好。

同种异体移植物炎性因子-1在糖尿病睾丸大鼠模型中的表达及意义

目的探讨同种异体移植物炎性因子-1(AIF-1)在糖尿病(DM)睾丸大鼠模型中的表达及其意义。方法糖尿病睾丸(DMT)大鼠模型,随机分为糖尿病睾丸4周组(DMT4W组)、糖尿病睾丸8周组(DMT8W)、糖尿病睾丸12周组(DMT12W)。正常对照组(NC组)分为正常对照4周组(NC4W)、正常对照8周组(NC8W)、正常对照12周组(NC12W)。组织病理学检测各组睾丸形态学变化,免疫组织化学检测AIF-1蛋白表达,免疫荧光法观察AIF-1和NF-κB p65蛋白表达。结果组织病理学显示,与NC组相比,DMT组内睾丸内生精细胞数量,支持细胞、间质细胞、精子数明显减少。免疫组织化学结果显示,与NC组相比,DMT组睾丸内AIF-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。免疫荧光结果显示,与NC组相比,DMT各组AIF-1和NF-κB p65蛋白荧光强度显著增强。结论DMT组织AIF-1蛋白过表达,提示其在DMT病变过程可能起重要作用,有望成为治疗新靶点和诊断标记物。

同种异体骨软骨移植修复关节软骨损伤的手术技术

关节软骨缺乏神经、血管和淋巴,一旦损伤很难自愈^([1-4])。同种异体骨软骨移植(osteochondral allograft transplantation, OCA)用于治疗各种关节疾病,如骨坏死、剥脱性骨软骨炎和创伤后导致的大面积(>2 cm^(2))骨软骨缺损^([5-7])。多项研究报告了OCA术后的疗效,表现为患者疼痛程度显著缓解以及日常活动能力得到恢复^([8-12])。

脱细胞异体神经移植物联合电针对坐骨神经损伤大鼠脊神经节的保护作用及机制

目的探讨脱细胞异体神经移植物(ANA)联合电针对坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊神经节的保护作用及机制。方法选取50只雄性SD大鼠,10只制备ANA;40只随机分为正常组、模型组、ANA组和联合组,每组10只。分离右侧坐骨神经,于梨状肌下缘5 mm处去除10 mm制备SNI模型。ANA组将制备好的ANA连接在损伤神经的两断端处。联合组于ANA连接术后2 d采用电子针疗仪电针“环跳穴”和“阳陵泉穴”,15 min/d,7 d为1个疗程,共4个疗程。电生理检测各组大鼠坐骨神经传导速度,评估受损轴突再生情况;尼氏染色观察脊神经节中神经元的形态结构;Western blotting和免疫荧光法检测脊神经节中神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经传导速度明显降低(P<0.01);神经节神经元中的尼氏体因肿胀、溶解导致结构不完整,数量显著减少(P<0.01);NGF和BDNF蛋白表达量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,ANA组和联合组大鼠坐骨神经传导速度明显增加(P<0.01);神经节神经元中尼氏体损伤减弱,数量明显增加(P<0.01);NGF和BDNF蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与ANA组比较,联合组大鼠坐骨神经传导速度显著增加(P<0.01);神经节神经元中尼氏体形态较规则,数量明显增加(P<0.01);NGF蛋白表达量显著升高(P<0.01)。结论ANA联合电针可提高大鼠坐骨神经传导速度,改善神经节中神经元的形态结构,发挥对脊神经节神经元的保护作用,其机制可能与提高神经元中NGF和BDNF蛋白的表达,尤其是NGF蛋白的表达相关。

不同冷冻技术对同种异体血管移植排斥反应的影响

背景:冻存能够较好地保证血管结构的完整性,如何改善移植后排斥反应的问题受到越来越多的关注。目的:综述不同冷冻技术降低同种异体血管移植排斥反应的研究进展,以期为临床研究提供参考。方法:系统检索中英文数据库CNKI、万方和PubMed以及在线网站Baidu和Google Scholar自建库以来发表的降低同种异体血管移植排斥反应的相关文献。中文检索关键词:心血管疾病、内皮细胞、低温冻存、血管移植、免疫原性、排斥反应,同种异体移植和冷冻保护剂;英文检索关键词:cardiovascular disease、endothelial cells、cryopreservation、blood vessel transplantation or vascular graft、Immunogenicity、immune rejection、allograft or allogeneic transplantation or allograft transplantation and cryoprotectant。按照纳入排除标准共选取68篇文献进行综述。结果与结论:①综述发现通过改进现有冷冻技术能够降低同种异体血管移植排斥反应,其中主要涉及冻融方式和冻存保护剂的选择。②现有研究提示冻干法优于低温冻存,但限于条件未能广泛开展,现仍以低温冻存为主,其中玻璃化冻存、缓慢复温和使用不锈钢乃至含银材料效果优于程序式冻存及快速复温。③渗透性和非渗透性冻存保护剂的联合选择,可以在降低其毒性的同时,进一步减少排斥反应的发生。

同种异体移植物处置方法影响犬前交叉韧带重建术后腱骨愈合界面的骨重塑

背景:使用同种异体移植物进行前交叉韧带重建手术后的腱骨愈合过程复杂,愈合不良易导致隧道扩大。术前移植物的处理过程可能对腱骨愈合存在一定影响,但是具体情况并不清楚。目的:探讨同种异体移植物术前处置方法对韧带重建术后腱骨愈合过程中骨重塑的影响。方法:取32只雄性比格犬,建立双侧后膝前交叉韧带断裂模型后,采用抛硬币法随机分4组进行前交叉韧重建手术:A组以新鲜自体跟腱为移植物,B组以新鲜同种异体跟腱为移植物,C组以γ射线辐照后低温冷藏的同种异体跟腱为移植物,D组以冻干后经γ射线辐照的同种异体跟腱为移植物,每组8只。术后3,6个月取股骨-移植物-胫骨复合体,行Micro CT扫描和组织切片破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色,扫描图像进一步行骨微观结构参数测量,并建立3D骨隧道模型测量隧道面积。结果与结论:(1)Micro CT扫描:术后3个月,D组连接密度、骨小梁数量、骨小梁厚度、骨体积与总体积比值及结构模型指数均低于A、C组(P<0.05),骨小梁分离度高于A组(P<0.05);B组接密度、骨小梁数量及结构模型指数均低于A组(P<0.05),骨小梁分离度高于A组(P<0.05),骨体积与总体积比值低于A、C组(P<0.05)。术后6个月,D组连接密度、骨小梁数量及骨体积与总体积比值均低于A组(P<0.05),骨小梁厚度及结构模型指数均低于A、C组(P<0.05),骨小梁分离度高于A组(P<0.05);B组连接密度、结构模型指数低于A组(P<0.05),骨小梁厚度低于A、C组(P<0.05),骨小梁分离度高于A组(P<0.05);(2)抗酒石酸酸性磷酸酶染色:与A组相比,B、D组破骨细胞染色更深且数量更多;C组破骨细胞在形态和数量上类似于A组,体积偏小且着色偏淡;(3)隧道面积:相同时间点下,D组股骨与胫骨隧道扩大程度最大;B组术后3个月的股骨隧道内口、术后3,6个月的股骨隧道内口与中部面积均大于A组(P<0.05),术后3,6个月的胫骨隧道内口面积大于A组(P<0.05);(4)结果显示:前交叉韧带重建术后腱骨愈合过程中骨隧道扩大现象普遍存在,移植物处置方法通过影响腱骨界面破骨细胞介导的骨吸收导致骨微观结构的改变,从而干预腱骨愈合过程中的骨重塑。

同种异体骨移植辅助PRP技术对Hepple V型距骨骨软骨损伤患者短期效果及TGF⁃β1、PDG、VEGF的影响

目的分析同种异体骨移植辅助富血小板血浆技术(PRP)技术对HeppleV型距骨骨软骨损伤患者短期效果及转化生长因子β1(TGF⁃β1)、血小板衍生生长因子(PDG)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法选择河北省沧州中西医结合医院自2021年7月至2022年11月间收诊的116例HeppleV型距骨骨软骨损伤患者,根据不同的治疗方案分为对照组(自体骨软骨移植治疗,n=57)、研究组(同种异体骨移植辅助PRP技术治疗,n=59),对比两组临床相关指标情况[视觉模拟量表(VAS)、完全负重时间、住院时间]、踝功能情况[囊肿直径、踝与后足功能评分(AOFAS)、核磁共振关节软骨损伤修复评估表(MOCART)]、生长因子水平(TGF⁃β1、PDG、VEGF)、短期疗效、并发症情况。结果研究组治疗后VAS评分小于对照组,其完全负重时间、住院时间明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组囊肿直径减少,AOFAS评分、MOCART评分升高,其中研究组各项指标改善更明显,差异有统计学意义(P<0.05);与治疗前比较,治疗后两组TGF⁃β1水平降低,PDG、VEGF水平升高,其中研究组三种因子变化更明显,差异有统计学意义(P<0.05);研究组短期治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组骨不连、骨折愈合延迟、伤口感染的总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论同种异体骨移植辅助PRP技术对HeppleV型距骨骨软骨损伤患者短期治疗效果明显,可改善患者TGF⁃β1、PDG、VEGF因子水平,有较高的临床应用价值,可经深入试验后推广应用。

凋亡诱导因子基因敲减对骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的影响

背景:众多基础与临床试验证实:骨髓间充质干细胞移植后的低存活率严重制约着其发挥长期的治疗效果。课题组前期研究发现凋亡相关因子在骨髓间充质干细胞凋亡过程中发挥了重要作用,其中凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)蛋白可能是其中一个关键因子。目的:将AIF敲减的骨髓间充质干细胞移植至小鼠梗死心肌中,验证低AIF表达骨髓间充质干细胞移植后的存活情况以及对进一步改善心功能的重要性。方法:首先,通过LV-AIF-shRNA慢病毒感染骨髓间充质干细胞下调AIF蛋白表达,应用流式细胞术及Western blot、RT-qPCR检测慢病毒的感染效率,CCK-8检测AIF敲减骨髓间充质干细胞在缺血缺氧条件下的细胞活力;然后,构建急性心肌梗死小鼠模型,分别将正常及AIF敲减的骨髓间充质干细胞移植至心肌梗死区域,免疫荧光检测AIF蛋白的表达,ELISA检测血清脑钠尿肽水平,心脏超声检测心功能,Masson染色观察心肌纤维化情况,RT-qPCR检测AIF敲减骨髓间充质干细胞移植后SRY基因表达反映细胞存活情况。结果与结论:①LV-AIF-shRNA慢病毒感染成功构建AIF基因敲减的骨髓间充质干细胞,感染效率为97.7%,且AIF表达有显著下降(P<0.001);②在缺血缺氧培养状态下,AIF基因敲减骨髓间充质干细胞较正常骨髓间充质干细胞的细胞活力显著增加;③与移植正常骨髓间充质干细胞相比,AIF基因敲减骨髓间充质干细胞移植后在梗死心肌中的存活数目显著升高至3.71倍(P<0.001),并且显著减少了梗死区域AIF蛋白表达、心肌纤维化程度;④与移植正常骨髓间充质干细胞相比,AIF基因敲减骨髓间充质干细胞移植后血清脑钠尿肽水平显著降低(P<0.05),左室射血分数、左室缩短分数均有显著改善(P<0.05);⑤结果表明:AIF基因敲减可通过增强骨髓间充质干细胞移植后的细胞活力、增加骨髓间充质干细胞在供体内的存活从而减少心肌纤维化,改善急性心肌梗死后心功能。

间充质干细胞在小型猪重组牙胚同种异体移植中的免疫调节作用

目的 探索在小型猪重组牙胚同种异体移植实现颌骨内牙再生过程中,间充质干细胞BMMSCs的免疫调节作用。方法 将胚胎小型猪帽状期牙胚解离重组后,移植至成年小型猪拔牙区,BMMSCs经分离鉴定后,单独或与他克莫司FK506联合应用,进行同种异体移植免疫干预;评估受体小型猪的免疫状况和牙再生小型猪百分比。结果 BMMSC组受体小型猪CD3^(+)细胞和CD3^(+)CD8^(+)细胞比例均显著下降(P<0.05),Tregs细胞比例显著上调(P<0.05),有牙再生的小型猪百分比为75%;而BMMSC^(+)FK506组CD3^(+)和CD8^(+)T细胞比例均显著下调(P<0.05),但Tregs比例与空白对照组无显著差异,该组25%小型猪有牙再生;空白对照组的免疫排斥相关指标上调,未发现牙再生。结论 相对于与FK506合用,单独使用BMMSCs更有利于同种异体重组牙胚移植。

脂肪间充质干细胞与甲泼尼龙联合用药对小型猪异体皮肤移植的影响

旨在探究脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)与甲泼尼龙(methylprednisolone,MP)联合用药对小型猪异体皮肤移植(allogeneic skin graft,ASG)所产生的免疫排斥反应与创口愈合的影响。对12头小型猪建立同种异体皮肤移植模型,根据术后对异体皮肤移植皮片不同的干预方式,将小型猪随机分为4组:异体皮肤移植组(ASG)、甲泼尼龙组(MP)、脂肪间充质干细胞组(ADSCs)、脂肪间充质干细胞与甲泼尼龙联合用药组(ADSCs+MP)。术前与术后7、14 d采集血液和组织样本,术后即刻及术后7、14、21 d拍照记录移植表皮临床变化情况。通过对移植皮片表观检查、病理组织学检测,血常规以及血清生化,移植皮片组织氧化应激、炎症、再生的指标检测,综合评价4组不同干预方式对小型猪异体皮肤移植所产生的免疫排斥反应与创口愈合方面的影响。从皮片表观与病理学分析可知,ASG组移植皮片存活时间在7 d左右、MP组移植皮片存活时间在7~14 d、ADSCs组与ADSCs+MP组存活时间为14~21 d。并且在7、14 d时ADSCs+MP组的GSH、SOD的表达量显著升高,在免疫排斥方面,ADSCs+MP组的CD4^(+)T细胞的数量,NF-κB的蛋白与基因表达量,IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6促炎因子的表达量相对于ASG组显著降低。在创口愈合方面,ADSCs+MP组相对于ASG组VEGF、TGF-β的蛋白表达,SDF-1、CXCR4的表达显著上升。并且ADSCs+MP组相对于ASG组,PI3K、AKT、11β-HSD1的蛋白与基因的表达量显著降低。综上所述:ADSCs+MP组相对于ASG组与MP组,可以延长移植皮片存活时间。并且ADSCs+MP可以有效通过促进GSH、SOD的表达抑制氧化应激。在排异方面,ADSCs+MP可以通过抑制NF-κB的表达抑制IL-2、IFN-γ、IL-6、TNF-α等炎性因子的表达,从而抑制移植过后的免疫排斥反应。并且ADSCs+MP可以通过促进VEGF、TGF-β等愈合因子的表达促进创口愈合。进一步研究发现ADSCs可能通过PI3K/AKT来影响11β-HSD1的表达,进而抑制皮肤皮质醇含量,并促进TGF-β、VEGF等生长因子的表达来促进创口肉芽组织再生与血管迁移。