慢性移植物失功的器官特异性：基于OPTN数据的分析

目的寻找不同移植器官发生慢性移植物失功(chronic graft dysfunction,CGD)的变化规律,证实不同器官CGD发生率不同与移植器官种类有关,即CGD的器官特异性。方法网上获取OPTN/SRTR(organ procurement and transplantation network/scientic registry of transplant recipient)2006年报,收集近10年全球29.6万余例各种实体器官各时点移植物存活率。根据总表统计数据用图示法寻找移植物存活率在各种移植实体器官的变化趋势;根据分表统计数据,按不同年龄组、性别和人种作图,进一步观察趋势。以不同时段移植物存活率为变量,分层聚类分析,将各种实体移植器官分成两类。确定低存活标准,将各种实体移植器官不同时段移植物存活率与之比较,用森林图法直观展示高低不同的两类。结果各时段边缘供肾、单独胰腺移植、肾移植后胰腺移植、小肠移植、尸肺移植和心肺移植的移植物存活率在不同年龄段(18～34、35～49、50～64岁)、性别和人种均较低。以各种实体器官移植1991～1995年和1996～2000年两个时段的1年、3年和5年移植器官近期存活率(GSR)为变量聚类分析,上述低存活器官聚为一类,与低存活率相关。以边缘供肾GSR为标准,上述低存活器官两个时段3月、1年、3年和5年GSR均比边缘供肾低[3月GSR,OR0.26～0.92;95%CI(0.20,0.35)～(0.61,1.39);1年GSR,OR0.30～0.87,95%CI(0.23,0.37)～(0.78,0.97);3年GSR5年GSR,OR0.12～0.87;95%CI(0.09,0.71)～(0.75,1.0)]。结论CGD在不同器官的变化具有规律性。各种实体移植器官GSR可聚为高低存活两类,低GSR器官为边缘供肾、单独胰腺移植、肾移植后胰腺移植、小肠移植、尸肺移植和心肺移植,表现为高发早发CGD。

肾移植慢性移植物失功中肾实质细胞的凋亡

背景:移植物内细胞毒性T细胞对肾小管上皮细胞的浸润,造成上皮细胞的凋亡、肾脏组织的破坏是引起肾移植排斥反应的重要原因。目的:探讨临床肾移植后慢性移植物失功期移植肾实质细胞凋亡与移植肾慢性失功的关系。设计、时间及地点:病例对比观察,于2005-01/2008-01在中山大学附属第一医院完成。对象:选择2004/2006中山大学附属第一医院器官移植科肾移植专科行移植肾穿刺活检术患者30例,按活检原因分成实验组(n=20)及对照组(n=10)。实验组患者出院时血肌酐降到正常,尿蛋白定性检测阴性,但在术后1~3年随访期间出现尿蛋白定性逐渐+^+++,血肌酐检测逐渐爬行升高;对照组患者活体肾移植前零点活检。方法:实验组行24h尿蛋白定量检测,B超引导下移植肾穿刺活检术,标本1份以常规病理染色和Masson’s特殊染色行Banff97病理分类诊断,1份做优化的切片温度包埋冰冻切片,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧核苷酸原位末端标记法检测肾实质细胞凋亡。对照组活检标本也行同样病理检查。主要观察指标:显微镜下计数10个高倍镜下肾实质细胞平均凋亡个数,计算凋亡指数。实验组检测活检时患者血肌酐值及24h尿蛋白定量。结果:实验组1例因穿刺组织过少,未出病理报告,2例肾移植后急性排斥,4例IgA肾病复发,13例符合肾移植后慢性移植物肾病病理改变,其中2例肾功能丢失。对照组均为基本正常肾组织。入组时实验组肾实质细胞凋亡个数明显高于对照组(P<0.01),特别是在血肌酐和尿蛋白定量均较高的患者中。实验组细胞凋亡指数同入组时血肌酐爬升程度呈直线相关(r=0.733,P<0.01),并且与患者24h尿蛋白严重程度基本一致。结论:肾实质细胞凋亡在慢性移植肾失功发生演变过程中发挥了重要作用。

小肠移植术后慢性移植物失功1例报道及文献复习

目的探讨小肠移植术后慢性移植物失功(chronic graft dysfunction,CGD)的诊断及治疗。方法报道国内首例同种异体小肠移植患者术后CGD的临床资料,复习相关文献。结果患者因"门静脉血栓、脾静脉血栓致肠系膜血栓"切除了大部分小肠,后行同种异体小肠移植术。术后长期服用他克莫司(FK506),屡次发生排斥反应。术后3次因"小肠狭窄、不全性肠梗阻"行"小肠节段切除吻合术"。其中术后576d第3次出现肠梗阻,予经皮内镜下胃空肠造瘘术胃肠减压等治疗,确定移植肠不可逆性失功后行移植小肠切除术。结论 CGD治疗困难,预后不佳,预防胜于治疗。在确诊CGD不可逆后应尽快切除移植小肠,挽救患者生命,有条件应尽快安排再次移植。

ICOS/B7RP-1共刺激通路在大鼠慢性移植物失功中作用的研究

目的研究阻断ICOS/B7RP-1共刺激通路对慢性移植物失功的抑制作用,并探讨其可能的机制。方法建立大鼠慢性移植物失功的模型,将实验动物分为四组:A组:假手术组;B组:同基因移植组;C组:同种异体移植组(对照组);D组:抗-ICOS单抗注射组。各组动物移植后用CsA10mg/kg·d10天避免急性排斥,D组于术后10天后开始运用抗-ICOS单抗2mg/kg腹腔注射,2次/周至术后90天,分别于术后4w、8w、12w处死大鼠,处死大鼠前抽血查血肌酐,观察肾功能改变情况;取移植肾进行病理学观察,用免疫组织化学法和实时荧光定量PCR检测ICOS蛋白和mRNA在组织中的表达及定位。结果假手术组和同基因移植组大鼠术后长期存活,两组各观察指标无明显变化。对照组大鼠各时间段移植肾脏Banff评分总分较假手术组和同基因组明显增高,移植肾CAN改变明显。抗ICOS抗体干预后12周时移植肾肾小球可见轻微硬化,肾小管部分扩张,较对照组明显减轻。免疫组织化学和荧光定量PCR结果表明,抗ICOS抗体组大鼠移植肾中ICOS的表达较对照组明显降低。结论阻断ICOS/B7RP1共刺激通路具有明显的抗移植物慢性损伤的作用。

大鼠移植心慢性失功加快模型的建立

目的:探讨封闭群SD→SD大鼠心脏移植能否建立移植物慢性失功(chronic graft failureCGF)模型,缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injuryI/R)是否可加速CGF的进程。方法:采用雌性封闭群SD大鼠60只,分两组,对照组供心取下后立即进行心脏移植,冷缺血组供心取下后,先在4℃生理盐水中冷保存3h,然后再进行心脏移植。对照组于术后4、12、24w,缺血组于术后4、8、12w,取移植心脏分别行H E染色和M asson三色染色观察移植心的组织病理学改变。结果:移植后4w,冷缺血组与对照组相比较,心脏血管内膜增生评分均较低,两者无显著性差异,(1.6±0.48 vs1.2±0.32,P>0.05);移植后12w,两者心脏血管内膜增生评分有显著性差异(3.6±0.48 vs2.4±0.48,P<0.05),而且冷缺血组已发展为中度至重度血管病变;冷缺血组12w与对照组24w移植心血管内膜增生评分相比较,二者无统计学差异(3.6±0.48 vs4.0±0.40,P>0.05)。结论:采用封闭群SD→SD大鼠异位心脏移植来建立移植心CGF模型是可行的,I/R损伤可加快移植心CGF的进程,大大缩短了建模时间。

益生注射液抗大鼠移植心慢性失功加快模型的实验研究

目的:探讨中药益生注射液对大鼠移植心慢性失功(Chronic graft failure,CGF)加快模型的保护作用,为临床应用提供部分实验依据。方法:采用雌性封闭群SD大鼠40只,随机分2组,对照组的离体心脏用4℃生理盐水保存3 h后,行心脏移植,术后不给任何药物处理,实验组的离体心脏则用含益生注射液的4℃生理盐水保存3 h后,行心脏移植,术后每天腹腔注射益生注射液,剂量为8 mg/(kg.d),连续9 d。分别采集受体术前和术后1、3、5、7、9 d血液,检测丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)含量变化。另外,在移植术后12周,取2组移植心脏的组织学标本进行比较分析。结果:对照组和实验组心脏移植术后血浆MDA含量显著升高,而SOD活性却显著降低,术后第1天下降最明显。对照组与实验组相比,术前2组血浆的MDA含量和SOD活性相似;术后第1天,对照组血浆MDA含量升高,并明显高于实验组45.27±6.48与32.78±6.61,P<0.05,而SOD活性下降,并明显低于实验组529.77±46.31与663.33±45.92,P<0.05;此后,2组的血浆MDA含量和SOD活性逐渐恢复到正常,但对照组恢复较慢,术后第9天才接近正常,实验组恢复较快,术后第5天已恢复正常。对2组移植心脏的组织学标本进行比较,移植后12周,实验组与对照组相比,移植心慢性排斥程度明显减轻(2.20±0.40与3.6±0.48,F=100.41,P<0.000 1),心肌间质纤维化程度也减轻(1.00±0.32与1.60±0.48,F=21.63,P<0.000 1)。结论:在缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,I/R)诱导的CGF加快模型中,益生注射液对移植心的I/R损伤有保护作用,并能减轻其慢性失功的进程。

利用DIGE和RP-HPLC-ESI/MS技术寻找慢性移植肾失功患者血清标志物

目的:利用蛋白组学二维差异性凝胶电泳(2-DDIGE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)联合电喷射离子化质谱(ESI/MS)技术寻找慢性移植肾失功患者血清生物标志物。方法:血清样本分成4组,慢性移植物失功组(CGD组)、移植后长期肾功能稳定组(SRF组)、急性排斥组(AR组)和健康对照组(N组)。血清样本经多重亲和排除柱去除高丰度蛋白处理后,使用2-DDIGE技术找到差异蛋白点。切下这些差异蛋白点,胰蛋白酶消化,经RP-HPLC-ESI/MS分析鉴定,在另一独立样本中对鉴定出的差异蛋白Galectin-7进行ELISA验证。结果:在CGD组患者血清中差异表达的蛋白共有39个,质谱鉴定出22个,包括载脂蛋白A-I前体,补体C4-A前体,Galectin-7等。ELISA结果提示CGD组患者血清中Galectin-7的表达较SRF组和N组有明显增高。结论:找到的这些差异蛋白具有不同的生物功能,为大样本、多中心的验证奠定了基础。Galectin-7可能是CGD的血清标志物,并对CGD的发病机制和治疗策略提供新的思路。

肝脏移植后慢性移植物失功的研究进展

肝脏移植是目前治疗终末期肝病的惟一根本手段,现在肝脏移植术后主要面临的总是保持移植物长期稳定的功能和提高受者的长期生活质量。慢性移植物失功(CGD)是指移植物功能缓慢和不可逆性减退,目前CGD已成为阻碍移植物长期稳定功能和受者长期生活质量的重要原因。本文对肝脏移植后引起CGD的研究进展作一综述,以寻求改进受者术后移植肝长期功能和提高受者术后长期生存质量的策略。

免疫和非免疫因素在角膜移植片慢性失功中的作用

目的利用小鼠角膜移植片慢性失功(CCAD)模型研究免疫和非免疫因素在CCAD发生发展过程中的作用。方法分别以C57BL/6(异系)、CB6F1(F1代)、BALB/c(同系)小鼠为供体,以BALB/c小鼠为受体进行穿透角膜移植,健康BALB/c小鼠为对照组。术后对角膜移植片进行评分;免疫组织化学法检测各组移植片CD4+T淋巴细胞、F4/80、TGF-β、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;手术后1、2、3个月采用反转录PCR法检测各组小鼠角膜移植片中F4/80和TGF-β表达情况。结果异系移植组发现典型的临床免疫排斥反应并有移植片混浊,F1代和同系移植组小鼠移植片未发现临床可见的急性排斥反应而移植片透明度随时间逐渐下降,对照组角膜始终透明。异系移植组移植片基质中见大量CD4+T淋巴细胞浸润;F1代移植组和同系移植组偶见CD4+T淋巴细胞浸润,对照组未见CD4+T淋巴细胞。各组角膜基质内均可见F4/80、TGF-β、bFGF阳性表达,阳性表达量随着各组免疫原性减弱而降低。术后早期各移植组F4/80表达量低,晚期表达量增高,对照组F4/80未见表达;而TGF-β各移植组早期表达量较多,晚期表达量下降,对照组各时间点均为低表达。异系移植组和F1代移植组角膜移植片发生混浊时,基质内可见α-SMA阳性表达,同系移植组呈弱阳性表达,对照组未见阳性表达。结论穿透角膜移植术后抗原依赖的免疫细胞浸润和非抗原依赖的细胞因子异常表达都参与了角膜移植片慢性失功的过程。

穿透性角膜移植术后角膜植片内皮慢性失功的临床分析

目的探讨圆锥角膜行穿透性角膜移植(PK)术后角膜植片内皮慢性失功的临床特点。设计回顾性病例系列。研究对象圆锥角膜患者PK术后角膜植片内皮慢性失功148例(163眼)。方法所有患者实施PK术,采用非接触式角膜内皮显微镜、A型超声测厚仪和眼前节OCT扫描系统对角膜植片进行评价。主要指标中央角膜内皮细胞密度(ECD)、六边形细胞百分率、内皮细胞丢失率、内皮细胞形态、中央角膜厚度(CCT)及最佳矫正视力。结果PK术后3年内患者植片ECD呈下降趋势,内皮细胞年丢失率为14.2%±10.9%。术后1.5年较术后1年的ECD有明显下降(P=0.002)。术后不同时间点的植片内皮六边形细胞百分率均在50%以上,CCT在500μm以上,各组间比较无统计学差异(P=0.869)。PK术后5年以上复查,患者角膜植片ECD仍呈下降趋势,但个体差异性较大,多数患者的六边形细胞百分率仍在50%以上,内皮细胞面积增大是局部性的,CCT保持在500μm以上。150例未发生排斥的角膜植片除2例发生植片混浊外,其余均保持透明,患者术后最佳矫正视力提高。结论ECD的超生理下降和局部内皮细胞面积增大是PK术后角膜植片内皮慢性失功的主要临床表现。内皮慢性失功的发展存在个体差异性,且在同一个体不同时期发展程度亦有不同。

肾移植长期存活相关生物标志物的研究进展

如何维持长期良好的移植物功能是目前肾移植领域面临的最为突出的问题。鉴于现有诊断手段的种种缺陷,其相关生物标志物的研究已在不同的生物学层面广泛开展,且进展迅速。本文拟对近年来与肾移植长期存活相关的生物标志物的研究现状作简要综述。

2011-2013年国家自然科学基金资助肝脏移植研究项目

免疫炎症因子SNPs与他克莫司代谢相关蛋白调控基因在肝移植受者移植物慢性失功和肾毒性损伤的作用机制研究

2011-2013年国家自然科学基金资助肝脏移植研究项目

免疫炎症因子SNPs与他克莫司代谢相关蛋白调控基因在肝移植受者移植物慢性失功和肾毒性损伤的作用机制研究王兰兰四川大学2011-01至2013-12钙调磷酸酶抑制剂对肝移植受者外周血BTLA/CD160/HVEM/LIGHT的调节作用白杨娟四川大学2011-01至2013-12

大鼠移植动脉硬化加快模型的建立

目的 建立一种简捷 ,有代表性且稳定的移植物动脉硬化模型。方法 将SD大鼠的腹主动脉分别冷缺血 1、2 4、48h行SD→SD及SD→Wistar的原位腹主动脉移植 ,观察术后植入段血管病理改变、TGF β1表达及手术前后过氧化脂质的变化。结果 SD→SD及SD→Wistar缺血1h组分别于术后 10周及 6周见内膜明显增厚 ,而缺血 2 4h组只需 2周 ;各组移植后 2h过氧化脂质均明显高于术前 ,术后 4、2 4h与术前比差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;强化缺血组TGF β1不论是SD→SD还是SD→Wistar均于术后 1周即出现高表达。结论 以SD/Wistar作为供 /受体行腹主动脉移植 ,强化冷缺血损伤 ,可加快移植物动脉硬化 ,可望成为新型慢排模型。

提高肾移植的人、肾长期存活率关注受者的生存质量

器官移植作为一项成熟的技术，在近几十年来取得了很大的进步，受者的术后早期存活率得到大幅度提高，但长期存活率特别是受者的生存质量仍有待进一步提高。如何提高移植受者的长期存活率和生存质量，是移植领域研究和关注的一大热点。目前认为，移植物的慢性功能丧失（简称“慢性失功”）是影响受者长期存活率和生存质量的主要原因。移植物慢性失功的原因非常复杂，包括免疫因素和非免疫因素，前者包括组织相容性、抗体的作用、早期的缺血再灌注损伤等；后者的范围更为广泛，包括术后病毒感染（如巨细胞病毒）、药物毒性（如钙调磷酸酶抑制剂）、供者器官的相关因素（供、受者体积不匹配、性别差异、低龄或者高龄供者、扩大标准的供者器官等）、脂代谢异常、高血压、糖尿病及原发病复发等。

HLA监测在肝移植排斥反应诊断和鉴别诊断标准规范化制定中的应用

20世纪以来，由于器官移植技术、移植免疫基础研究以及各种新的免疫抑制剂不断问世，器官移植已成为临床治疗器官功能哀竭的有效治疗手段，成为21世纪医学最令人瞩目的进展。在中国大陆，尤其是近几年，器官移植得到很快发展，虽然距离国际先进水平尚有一段距离，但在一些先进的移植中心某些器官的移植效果已经接近和达到国际先进水平。

肺移植术后肺部菌群研究进展

肺移植是终末期肺痰病患者唯一有效的治疗手段,但肺移植受者的长期存活率仍较低。随着细菌16s核糖体小亚基RNA(rRNA)基因测序、高通量测序技术的发展,呼吸道样本中微生物的相对丰度得以量化,潜在病原体和共生环境也得以识别,揭示了健康肺部存在丰富的菌群。越来越多的证据表明,肺部菌群不仅可以调节肺部免疫稳态,而且在多种呼吸系统疾病的发生与发展中起重要作用。肺移植受者的肺部菌群有异于健康人群,并与其术后并发症及预后相关。本文对近年来国际上关于肺移植受者的肺部菌群特点及其与肺部感染、慢性排斥反应的关系进行综述,以期为肺移植术后并发症的发生与诊治提供新的思路。

第39届国际心肺移植协会年会热点速递

概述2019国际心肺移植协会年会有关心肺移植的基础与临床研究热点和前沿,包括心脏及肺移植概况、机械辅助循环的临床应用、供器官维护、受者选择、样本库建设、移植免疫学、移植物失功、移植术后感染及并发症处理、移植护理和移植后康复等多个领域的最新进展。

肺再移植治疗的进展

肺再移植是初次肺移植后慢性肺移植物失功(CLAD)的最终治疗手段。近年来,肺再移植手术量逐年升高,肺再移植患者的预后不断改善。但在世界范围内肺再移植开展总量和所占比重均较小,与初次肺移植患者相比,肺再移植患者术后生存时间仍有较大差距。该文通过透视国际心肺移植协会(ISHLT)统计数据,对肺再移植治疗的发展现状进行综述。

人巨噬细胞极化对小鼠周细胞-肌成纤维细胞转分化的体外作用研究

目的探究巨噬细胞极化对周细胞-肌成纤维细胞转分化及移植肾间质纤维化形成中的作用。方法分别收集5例2010~2015年在南京医科大学第一附属医院确诊慢性移植物失功(CGD)受者的移植肾组织和正常肾组织(对照组), 采用常规染色和免疫荧光染色的方法检测M1型和M2型巨噬细胞在肾组织中的表达与分布, 并用聚合酶链式反应(PCR)法检测样本中CD68、CD206和iNOS mRNA;采用转化生长因子-β1(TGF-β1)体外刺激小鼠血管周细胞系, 采用免疫印迹、细胞荧光的方法检测周细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和血小板衍生生长因子受体-β(PDGFR-β)的表达;分别构建血管周细胞与M1型或M2型巨噬细胞联合培养模型, 采用免疫印迹、细胞荧光、PCR等方法检测周细胞中α-SMA和PDGFR-β的表达。结果在CGD受者的移植肾组织中观察到显著的CD68^(+)iNOS^(+)的M1型巨噬细胞浸润, 而CD68^(+)CD206^(+)细胞未显著浸润, 且CD68、iNOS、CD206 mRNA在CGD组中的表达均高于对照组(P<0.05);在CGD移植肾组织中, α-SMA和PDGFR-β的蛋白表达升高(P<0.05), 且α-SMA和PDGFR-β双染的细胞浸润于CGD受者移植肾间质中。体外实验中, TGF-β1可刺激小鼠周细胞中α-SMA和PDGFR-β升高(P<0.05), 且呈现时间依赖性;免疫印迹和细胞荧光中均可见M1型巨噬细胞可在体外促进小鼠周细胞中周细胞-肌成纤维细胞转分化相关指标升高, 而M2型巨噬细胞无法促进周细胞发生周细胞-肌成纤维细胞转分化过程。结论 M1型巨噬细胞极化可能通过促进周细胞-肌成纤维细胞转分化过程, 促进移植肾间质纤维化的形成。