自体原位移植睾丸缺血再灌注损伤模型的建立

目的:建立一种新的移植睾丸缺血再灌注损伤(IRI)的模型,为研究临床睾丸移植奠定实验基础。方法:20只健康成年雄性日本大白兔,采用分别夹闭一侧睾丸动脉上下方腹主动脉后,然后套管针穿刺夹闭间的腹主动脉行一侧睾丸HC-A灌注液灌注,至一侧睾丸变为苍白色后阻断该侧睾丸动脉血流。然后将该睾丸原位低温保存4 h后开放睾丸动脉,成功地建立兔自体原位移植睾丸的缺血再灌注的模型。结果:灌注前睾丸颜色为正常鲜红色,灌注后灌注侧睾丸变为苍白色。开放睾丸动脉血流后可见睾丸变为鲜红色。模型成功率为90%,睾丸热缺血时间为(5.0±1.5)min,冷缺血时间为240.0 min,腹主动脉阻断时间(12.5±2.5)min。结论:建立了稳定、可行的自体原位移植睾丸缺血再灌注损伤的模型,为研究睾丸移植的缺血再灌注损伤提供了可靠的研究平台。

睾丸移植研究进展

睾丸移植是治疗高位腹腔型隐睾、男性性腺功能减退和男性不育重要而有效的方法。20世纪 90年代以来,在吻合血管的自体、异体睾丸移植,睾丸组织移植和睾丸Leydig细胞移植几个不同领域都取得了较大进展,主要有:腹腔镜在自体移植中的应用、异体移植术后生精功能影响因素的研究、胎儿睾丸移植及精原干细胞移植等新技术的尝试。本文结合近年来的有关文献,就睾丸移植方面的研究进展作一综述。

新生小鼠睾丸组织移植到裸鼠体内不同时期移植物的组织学观察

目的 通过测量不同发育时期移植物的重量及观察其中生精小管结构和生精细胞组成情况，对去势雄性小鼠中移植的新生小鼠睾丸组织生长和发育进行系统观察。方法 将出生1．2d昆明小鼠睾丸移植到7—12周去势雄性免疫缺陷小鼠背部；在移植后不同时间段（分为3d、1—11周和3．6月16个组）取出移植物，计算移植物的回收率，测定移植物重量，观察移植物中生精小管结构及生精细胞的组成。结果 从移植的450个新生小鼠睾丸组织，回收到405个移植物，总回收率为90．0％。重量比移植前增加约40倍。移植物中生精小管的发育及各阶段生精细胞出现时间与在正常小鼠中所见基本相同。移植时间超过8周后，生精上皮的退化现象显著增加。结论 将新生小鼠睾丸组织异位移植到受体背部后的发育进程与在体情况相同，第1次生精波结束后的时间应为获取精子细胞和精子的最佳时间，大约是移植后5．7周。

同种异体睾丸移植术(附12例报告)

目的：探讨同种异体睾丸移植术治疗男性雄激素缺乏及不育的疗效。方法：对12例同种异体睾丸移植术进行回顾性分析。结果：11例手术成功的患者血清睾酮明显升高、第二性征和性功能明显改善，但精子的数量均未达到正常。1例睾丸移植后缺血坏死切除。移植患者血清睾酮由术前1．55-6．4nmol／L，平均3．93nmol／L，升高到12．2-17．6nmol／L，平均15．1nmol／L（P〈0．05）。结论：睾丸移植治疗男性雄激素缺乏疗效较佳，但术后的生精功能则不能令人满意。

cuff管套入法建立大鼠同种异体睾丸移植模型

目的:探索应用cuff管套入法建立大鼠同种异体睾丸移植模型的新方法。方法:60只健康雄性近交系W istar大鼠分别作为供、受体,显微镜下(×10),连同左侧供睾的动、静脉一起截取与其相连的腹主动脉段和左髂总静脉段,以丝线结扎左髂总静脉段的远断端,其余3断端分别套上cuff管后袖套状翻转并以丝线环扎之,然后分别将外套cuff管的动、静脉嵌入切开的受鼠的腹主动脉内和左髂总静脉内后再环扎,端端吻合受、供体输精管,摘除受鼠双侧睾丸。结果:30只大鼠正式手术,27只长期存活直至处死,2只死于麻痹性肠梗阻伴感染,1只因术中大出血死亡。27只长期存活的受体中,4、4、5例于术后14 d、28 d、56 d探查植睾,血供情况良好,关腹存活至处死;余14只用于其他实验。受体左下肢术后无明显水肿、淤血和坏死。结论:应用cuff管技术建立的大鼠睾丸移植模型具有操作简便、成功率高、效果可靠等优点,可作为睾丸移植的研究模型。

以胎儿睾丸为移植体的睾丸移植六例报告

目的 探讨胎儿睾丸移植在男性性腺功能减退症治疗中的临床应用价值。方法 利用胎儿睾丸作移植体 ,为 6例男性性腺功能减退症患者施行了胎儿睾丸移植术。结果 术后 5个月 ,6例患者的血清睾酮水平明显升高 ,性欲、性功能及第二性征明显改善 ,移植睾丸体积较术前增大。结论 胎儿睾丸移植治疗男性性腺功能减退症是有效的 ,且胎儿睾丸免疫原性低 。

同种异体睾丸移植远期疗效观察(附4例报告)

目的 探讨同种异体睾丸移植的远期疗效.方法 利用亲属睾丸作供体行同种异体睾丸移植4例,其中医源性无睾症2例,原发性性腺机能低下2例,术后观察患者血清睾酮水平、第二性征变化及性功能情况.结果 术后随访2～11年,4例患者血清睾酮明显升高,性功能及第二性征长期维持,精液检查未见精子.结论 同种异体睾丸移植的内分泌治疗效果较为确切,但生精功能不满意.

同种睾丸移植34例综合报告

本文综合报告我国五所医院同种睾丸移植34例,随访半年至4年,术后血清T值恢复正常者占90％,FSH和LH值达正常者占100％,精液中出现活动精子者占29.41％。有2例已结婚,各生育一子女。并就如何掌握手术指征和对该手术的评价提出了个人意见。

移植部位对小鼠睾丸移植效果的影响

目的比较不同的移植部位对睾丸移植效果的影响,以探索建立疾病模型小鼠安全保存的新方法。方法按移植部位的不同分为3组:背部皮下组,睾丸白膜内组和肾包膜下组。移植后处死受体鼠回收移植物。测试和分析受体精囊的重量,移植物存活率,回收物增重的倍数和生殖细胞的分化情况。结果不同实验组移植睾丸的生殖细胞分化差异显著。睾丸白膜内组的分化情况最好与假移植对照组相似;背部皮下移植组睾丸的分化率为29.2%;肾包膜下组未见分化。结论睾丸白膜内移植最利于精子的发生;背部皮下移植是睾丸移植的次优选择;肾包膜下睾丸移植不适合用于小鼠雄性生殖器官的安全保存。

同种异体幼犬睾丸组织块大网膜移植研究

目的通过研究同种异体幼犬睾丸组织块大网膜移植,探讨同种异体睾丸组织块移植对男童原发性性腺功能低下症的治疗意义。方法以幼犬为实验对象,采用异体睾丸组织块移植的方法,将供体动物的部分睾丸组织种植到受体动物,并经皮下隧道延伸到阴囊的大网膜上。术后每周测定受体血清睾酮含量,连续测量4次,将移植组织切片分析,HE染色观察组织结构。结果睾丸组织块移植后,受体动物血清睾酮水平逐渐上升,至手术后第4周,体内激素含量较移植前明显升高(P<0.05)。病理观察移植的睾丸组织块在受体大网膜上成活,可见到间质细胞形态。结论异体睾丸组织块大网膜移植是可行的,治疗的目的仅限于提高体内雄激素水平,不涉及生育。

异体睾丸移植的研究进展

异体睾丸移植是治疗男性不育或性腺功能减退的有效方法之一。自18世纪开展第一例实验睾丸移植至今已经历了近3个世纪,有关这方面的研究在不同领域都取得了长足进展,但涉及其中的诸多问题依然值得关注。现结合众多文献资料,就睾丸移植的历史、现状及展望作较全面的阐述。

大鼠睾丸移植模型的建立及植睾损伤机制的研究

目的:探讨影响植睾生精细胞发育的内在因素及胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA在植睾丸组织中的表达。方法:应用Cu ff管技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型,并将实验动物分为6组,在光镜和电镜下分别观察移植物的形态学和超微结构变化,应用放免法和RT-PCR技术检测实验各组T、FSH、LH水平和GDN FmRNA的表达量。结果:术后7 d,同种移植组植睾组织在光镜下可见间质内大量淋巴细胞浸润,曲细精管内生精细胞层次紊乱,支持细胞数目减少并出现萎缩,电镜下可见支持细胞之间构成的紧密连接出现断裂;血清T值下降而FSH、LH值反馈性升高,GDN FmRNA的表达量较正常对照组减少。术后14 d,同种移植组植睾损害进一步加剧,且GDN FmRNA的表达量明显下降。结论:同种移植植睾组织中支持细胞数目的减少和萎缩及其胞突构成的紧密连接出现断裂可能是植睾生精功能不良的主要原因;GDN FmRNA表达水平可作为睾丸生精功能状态指标之一。

睾丸移植的伦理难题

最近,上海社会科学院法学研究所生命法学研究中心组织召开了“上海市第五届生命法学理论研讨会”,专门就器官移植及安乐死的法律问题作了深入研讨。来自复旦大学、华东政法学院、上海大学、第二军医大学、上海市卫生局、上海市第一妇婴保健院及上海社会科学院等20多家单位70多位专家、学者参加了会议,并发表了不少真知灼见。现择要刊登有关器官移植立法方面的讨论意见,以供立法部门和法学界、医学界等共同参考。

同种异体睾丸移植的性伦理思考

作为有效解决不育及性功能障碍等疾患的睾丸移植手术,在给患者带来福音的同时,也产生了一系列性伦理问题。它不仅涉及患者、睾丸供体的性快乐,也涉及供体妻子的性权利,更牵涉性行为的"成果"归属问题与子女的知情权。睾丸移植在解决中老年人性功能障碍之后,一些旧的性观念将受到影响,随之增多的老年人的性需求、再婚等问题亟须子女及时更新性观念。

成年大鼠皮下移植的幼年大鼠睾丸组织的发育和雄激素的分泌

目的探索成年大鼠皮下微环境对移植的幼年SD大鼠睾丸中睾丸间质细胞存活、发育及雄激素分泌的影响。方法将成年雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组、去势组和未去势组。对照组大鼠不进行任何处理;假手术组大鼠去势后不进行睾丸移植;去势组大鼠于去势1周后行背部双侧睾丸移植手术,每侧移植1个5~7 d SD大鼠睾丸组织;未去势组直接在正常大鼠背部两侧各移植1个幼年SD大鼠睾丸组织。移植后第4周取材、称量移植睾丸组织质量,HE染色分析移植睾丸组织的组织学特点,免疫组织化学染色法检测移植睾丸组织中17β-羟基类固醇脱氢酶1(HSD-17β1)表达和分布,同时采用ELISA检测受体血清睾酮水平。结果去势组移植睾丸组织质量明显大于未去势组。去势组和未去势组均可见睾丸间质细胞,免疫组织化学染色发现去势组移植睾丸组织中HSD-17β1阳性细胞较未去势组多。ELISA分析发现对照组和未去势组的血清雄激素水平均高于假手术组和去势组,且去势组明显高于假手术组。结论移植的幼年大鼠睾丸组织可在成年受体大鼠皮下进一步发育,形成的睾丸间质细胞还具备一定的雄激素合成和分泌功能。

犬自体睾丸移植模型术式的改进

目的探讨建立犬自体睾丸移植模型的手术改进方法。方法30只健康成年雄性杂种犬,采用切取带腹主动脉瓣的睾丸动脉和带下腔静脉瓣的睾丸静脉,并将睾丸动脉与髂外动脉、睾丸静脉与髂外静脉端侧吻合的方法进行犬自体睾丸移植术。结果移植成功27只,成功率达90%。其中睾丸热缺血时间(4.5±0.9)min,冷缺血时间(50.0±5.0)min,睾丸血管吻合时间(35.5±5.5)min,总手术时间(3.5±0.5)h。逐步完善了睾丸灌注、带瓣睾丸血管的切取及血管吻合等关键步骤。结论建立了稳定、可行的自体睾丸移植动物模型,为睾丸移植提供了可靠的研究平台。

同种异体睾丸移植(附一例报告)

我院于1988年6月采用患者父亲睾丸为1例先天性睾丸发育不全患者作了同种异体睾丸移植,至今已随访4年余,效果良好,现报告如下。一、病例介绍患者男,21岁。自幼阴囊左侧内容物缺如,于1988年4月1日入院。体检:营养发育尚可,身高170cm,体重70kg。声音细,体型胖,皮肤细嫩,面部无胡须,喉结不突出,双侧乳房不大,腋毛、阴毛均无生长。阴茎短小,长3.5cm。阴囊发育较差,阴囊右侧内可触及花生米大睾丸1枚,质软;阴囊左侧内空虚,左腹股沟部可触及花生米大肿物,质软、活动。实验室检查:血、尿常规及肝肾功能均正常。血清睾丸酮为1.3nmol/L,FSH1.4IU/L,LH5.5IU/L。染色体为46XY。临床诊断:先天性睾丸发育不全伴左侧睾丸下降不全。

MEK抑制剂U0126对大鼠睾丸移植缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨大鼠睾丸移植缺血再灌注损伤与细胞外信号调节激酶(ERK)表达的关系,以及MEK抑制剂(U0126)对移植睾丸的保护作用。方法:应用潭付清技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型,将实验动物分为7组:1正常对照组;2冷灌注对照组;3假手术对照组;和应用潭付清技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型的4睾丸移植1组(移植后30min取材);5睾丸移植2组(移植后1周取材);6U0126预处理1组(U0126预处理并在移植30min后取材);7U0126预处理2组(U0126预处理并在移植1周后取材)。Western blot法测定移植睾丸ERK1、ERK2、pERK1及pERK2的表达水平,光镜和电镜下观察组织学改变,并应用放免法测定移植受体血清T、FSH、LH值。结果:各对照组间的ERK表达、组织学改变及生殖激素水平均无显著差异(P>0.05);睾丸移植1组ERK1、ERK2、pERK1及pERK2表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);U0126预处理1组ERK1和ERK2水平较睾丸移植1组无显著差异(P>0.05),而pERK1和pERK2水平显著低于睾丸移植1组(P<0.05);U0126预处理1组的组织学改变与正常对照组类似,但明显轻于睾丸移植1组;U0126预处理2组组织学损伤轻于睾丸移植2组,生殖激素水平与正常对照组无明显差异(P>0.05),但明显高于睾丸移植2组(P<0.01)。结论:大鼠睾丸移植后植睾ERK1、ERK2、pERK1及pERK2的表达水平明显升高,导致移植睾丸组织结构损伤和生殖激素分泌功能减退;U0126可通过抑制ERK1和ERK2磷酸化,减轻移植睾丸的早期出现的缺血再灌注损伤,短期内保护其生精功能,并维持其生殖激素水平。

同种异体睾丸移植治疗男性性功能低减

作者从１９８６年８月至今为１１例病人作了“同种异体宰丸移植”，其中８例为先天性睾丸发育不良，３例为睾丸炎致睾丸萎缩。术前为小阴茎、小睾丸，性功能低下，副性征不明显，血睾酮均低（在１．７～７．３５ｎｍｏｌ／Ｌ）。尸体供睾３例，亲属供睾８例。术后随访４年，血睾酮升至正常水平（１２．８～１８．２ｎｍｏｌ／Ｌ），副性征和性功能有显著改善，３例发现精液中有精子。已婚的５例病人均能进行正常性生活，未婚的６例中３例术后已结婚，性生活正常。