维生素C和维生素E对移植肺再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 观察维生素C(VitC)和维生素E(VitE)对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用。方法 采用大鼠自体左肺模拟原位移植模型 ,治疗组分别于再灌注前 10min静脉注入VitC(2 0 0mg/kg)和 (或 )VitE乳剂 (10 0mg/kg)。再灌注 4h后观测移植肺气体交换功能、顺应性、血管通透性、脂质过氧化程度、ATP含量以及组织病理学变化。结果 缺血再灌注 (I/R)组移植肺气体交换功能、顺应性降低 ,脂质过氧化程度增加 ,ATP含量下降 ,组织病理学改变明显 (P <0 0 1) ;给药组移植肺气体交换功能、顺应性与I/R组相比无明显改善 (P >0 0 5 ) ,其它指标均有不同程度的改善 ,以VitC和VitE合用时改善最为显著 (P<0 0 1)。结论 VitC和VitE对移植肺再灌注损伤具有协同保护作用。

90年代早期缺血再灌注损伤对移植肺功能的影响和研究

缺血再灌注 ,这一在肺移植手术中不可避免的过程 ,会严重影响移植肺功能 ,甚至引起移植后早期肺功能障碍 ,也是肺移植失败的主要原因。缺血、缺氧是再灌注损伤发生的病理生理基础 ,由此启动、引发的超氧化基团 (ROIs)、花生四烯酸代谢产物 (TXA2 、LTB4等 )以及肿瘤坏死因子 (TNF)等体液因子合成和释放的增加。这些体液因子不仅独立地发挥各自的生物学特性 ,而且它们之间密切联系、相互影响、互为因果 ,引起生物膜磷脂过氧化反应、大分子物质的降解、血小板及白细胞的聚集、脱颗粒 ,释放血管活性物质 ,引起肺血管阻力升高、血管通透性增加 ;参与再灌注损伤的这些体液因子将活性氧基团、炎症及排异反应融合贯穿在一起 ,缺血再灌注对移植肺功能的影响 ,也是这三个主要方面共同作用的结果。因此 ,对移植肺缺血再灌注损伤病理过程的研究和认识 ,有利于采取和加强针对性预防措施 ,提高肺保护质量 ,为改善移植后肺功能提供可靠的保证。

结缔组织生长因子与大鼠移植肺纤维化的关系

检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在大鼠移植肺内的表达,并探讨其与移植肺纤维化的关系。方法:检测结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠移植肺内的表达,并探讨其与移植肺纤维化的关系。方法:取20只Wister大鼠作为供体,20只SD大鼠作为受体,进行原位左肺移植。急性排斥反应组(AR)大鼠于术后1周处死,慢性排斥反应组(CR)大鼠于术后6周处死,均取其移植肺作标本,取正常Wister大鼠肺标本作对照组(NH),每组10只。测取并计算肺组织的湿/干重比值(W/T);采用HE及Van Gieson染色观察肺组织病理形态,并进行纤维化的半定量评分;采用免疫组织化学方法检测CTGF在肺组织中的表达。结果:肺的W/T比值逐步减小(AR vs.NH:3.48±0.47vs.4.67±0.51,P<0.05;CR vs.AR:2.85±0.52vs.3.48±0.47,P<0.05);移植肺组织显示:大量炎性细胞浸润、肺间质纤维化、肺泡结构破坏、阻塞性肺炎、肺实变,CR组较AR组更明显;纤维化评分,AR组明显高于NH组(0.98±0.47vs.0.00±0.00),CR组(2.35±0.52)明显高于AR组,(均P<0.01)。CTGF在移植肺组织中有明显表达,且CR组较AR组更高(P<0.01),而正常肺无表达。结论:CTGF表达与移植肺纤维化密切相关,且参与了移植肺纤维化的病理过程。

慢性胃液吸入对大鼠移植肺损伤及机制的研究

肺移植是治疗终末期肺病的最有效手段。但肺移植术后1、3、5年生存率分别为72%、56%及43%,落后于其它实体器官移植成活率。食管胃返流疾病（Gastroesophageal Diseas,GERD）是影响肺移植术后生存率的一个因素。研究表明,移植肺与胃液的接触与间质性肺炎、慢性支气管炎及哮喘等呼吸道疾病有关。

慢性移植肺功能障碍的诊断与治疗现状

慢性移植肺功能障碍(CLAD)是影响肺移植受者远期生存的最大阻碍,代表了一系列术后移植肺功能显著且持续恶化的复杂临床表现。由于缺乏有效的早期诊断和预防策略,一半以上的肺移植受者在5年内会出现CLAD,且这一比例将在10年内提高到75%。目前没有任何药物可以完全阻止或逆转CLAD的进展。近年来,随着2019年国际心肺移植学会(ISHLT)更新了CLAD的定义、诊断和治疗,国际上对CLAD的认识有了较大提高。本文将对CLAD的综合诊断方式和潜在治疗策略进行详细总结,为CLAD发生、发展的早期监测和管理提供理论参考和见解。

移植肺病理学及其进展

自1983年多伦多医院第一次肺移植手术成功以来,肺移植已成为终末期呼吸衰竭的主要治疗方案。迄今为止,全球进行了超过45 000例肺移植,肺移植受者术后1年和5年存活率已分别达83%和50%。然而,还有很多问题需要解决,包括原发性移植肺功能衰竭、

白细胞介素-10对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用

目的:探讨白细胞介素 10(IL 10)对大鼠移植肺再 灌注损伤的保护作用及机制.方法:将SD大鼠36只随机分 为3组,每组12只,即假手术对照组(Control)、肺移植组和肺 移植加IL 10处理组.观察受体气管内滴入IL 10对移植肺再 灌注损伤的保护作用.肺功能指标包括血氧分压、肺湿干重 比、肺通透性指数、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数 和分类;ELISA法检测受体血清中肿瘤坏死因子α(TNFα)含 量.结果:肺移植术后1h,肺湿干重比、肺通透指数和BALF 中中性粒细胞百分比分别为(6.57±0.89)、(23.49±5.13)× 10-4和(49.84±6.53)%,显著高于对照组(P<0.01),经气 管内给予受体大鼠IL 10可明显降低上述指标至(4.23± 0.58)、(15.96±3.04)×10-4和(20.33±4.26)%(P< 0.01);肺移植组血清TNFα含量(μg/L)为(0.86±0.11),较 对照组显著升高(P<0.01),IL

缺血预处理对犬移植肺保存效果的研究

１２次犬异体左肺移植随机分为冷Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｉｎｓ液（ＥＣＳ）组（ｎ＝６）和缺血预处理＋ＥＣＳ组（ｎ＝６）。缺血预处理采用阻断供体左肺门１０ｍｉｎ，再开放１５ｍｉｎ的方法。供肺冷灌采取后４℃保存。移植后观察２ｈ。结果显示：缺血预处理组有较高的氧分压和较低的平均肺动脉压（Ｐ＜０．０５），肺组织光镜显示较轻的肺损伤。表明缺血预处理结合４℃ＥＣＳ灌洗优于单独４℃ＥＣＳ的保护效果。

参附注射液对兔移植肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察参附注射液对供肺缺血-再灌注损伤的保护作用。方法将20只新西兰白兔随机分为实验组和对照组,每组各10只,建立兔左肺自体原位移植模型,分别用参附注射液和生理盐水对兔肺进行预处理和供肺灌注。于主动脉阻断前、再灌注后15min、30min和60min各时点检测左肺静脉血中丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)的活力,于再灌注60min后称左肺组织的干湿比重(D/W),并观察其病理变化。结果主动脉阻断前两组MDA含量差异无统计学意义(P>0.05);再灌注15min后实验组MDA含量较主动脉阻断前下降;再灌注30min和60min时,两组MDA含量均呈上升趋势,但实验组明显低于对照组(P<0.05)。主动脉阻断前实验组SOD活力明显高于对照组(P<0.05),再灌注后两组SOD活力均呈下降趋势,以对照组下降幅度明显(P<0.05)。实验组的D/W显著高于对照组(0.23±0.01vs.0.19±0.02,P<0.05)。对照组肺组织水肿明显,大量的炎性细胞浸润,肺泡腔内有片状渗出;而实验组表现为肺泡间隔水肿轻微,少量炎细胞浸润,渗出不明显。结论参附注射液对供肺的缺血-再灌注损伤有较好的保护作用。

兔移植肺组织中Ⅱ型肺泡上皮细胞胀亡检测

目的:探讨兔移植肺组织中是否发生Ⅱ型肺泡上皮细胞胀亡现象及其可能的生物学意义。方法:26对大耳白兔进行左侧单肺移植,另分别选6只大耳白兔作缺血再灌注损伤的阴性对照和不做任何处理的空白对照,利用透射电镜及病理学等技术,检测移植肺组织中Ⅱ型肺泡上皮的胀亡现象、MDA含量及SOD活力,分析细胞胀亡在肺移植中可能的生物学作用。结果:移植肺组织中主要是Ⅱ型肺泡上皮细胞发生胀亡,Ⅱ型上皮细胞胀亡的发生与MDA、SOD有关;与健侧肺、阴性对照及空白对照肺相比,移植肺发生较强的排斥反应,且组织中存在更多的胀亡细胞。结论:兔肺移植排斥反应中主要是Ⅱ型肺泡上皮细胞发生胀亡,Ⅱ型肺泡上皮细胞胀亡可能在肺移植排斥反应中起重要作用。

高迁移率族蛋白B1在大鼠移植肺缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在大鼠移植肺缺血再灌注损伤中的作用。方法:BALB/c小鼠随机分为对照组、10μgHMGB1组和100μg HMGB1组,每组各5只,后两组每只分别腹腔注射重组HMGB1 10μg和100μg。三套管法建立SD大鼠肺移植模型并随机分成单纯移植组、移植加0.1mg抗HMGB1抗体组和移植加1.0mg抗HMGB1抗体组,每组各5只,后两组每只分别腹腔注射抗HMGB1抗体0.1和1.0mg。12h后观察各组肺组织的湿干重比、炎症介质(TNF-α、ICAM-1、IL-6)基因表达、病理表现及动脉血气变化。结果:注射重组HMGB1后尤其100μg HMGB1组小鼠PaO2降低,PaCO2、湿干重比升高,TNF-α、ICAM-1、IL-6基因表达增强,肺组织出现病理改变。抗HMGB1抗体处理后,除ICAM-1基因表达外,肺移植大鼠的其他指标均有明显改善,并与抗HMGB1抗体剂量有关。结论:HMGB1在肺移植缺血再灌注损伤中具有重要作用,是肺移植缺血再灌注损伤防治的潜在靶标。

移植肺急性排斥反应

肺移植的动物试验于1946年由俄罗斯梅沃夫开创，而人体肺移植手术始于1963年。我国最先由北京结核病研究所辛育龄教授于1979年施行肺移植手术，之后直到1994年北京安贞医院尝试第一例肺移植，大多都鼠为急性排斥以及并发严重感染而失败。上个世纪80-90年代，由于高效低毒性新型免疫抑制剂的合理运用成功防治移植肺急性排斥反应，以及支气管吻合等手术技术的进步，肺移植在国内外得到迅速发展，已成为治疗终末期肺病的有效方法。

前列腺素E_1对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用

目的:探讨前列腺素E1(PGE1)对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用及机制。方法:SD大鼠36只随机分为3组,每组12只,即对照组、肺移植组和肺移植加PGE1处理组,观察受体大鼠肺移植前后注射PGE1对移植肺再灌注损伤的保护作用。肺功能指标包括肺湿干重比、肺通透性指数、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数和分类。比色法检测各组肺组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。ELISA法检测受体大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNFα)含量。结果:肺移植术后1 h,肺湿干重比、肺通透指数、BALF中中性粒细胞百分比和MDA含量显著高于对照组(P<0.01),肺组织中SOD活性明显低于对照组(P<0.01);给予受体大鼠静脉注射PGE1可明显改善上述指标(P<0.01);肺移植组血清TNFα含量较对照组显著升高(P<0.01),PGE1可明显降低血清TNFα水平(P<0.01)。结论:PGE1对移植肺缺血／再灌注损伤有显著的保护作用,与其抗氧化自由基损伤、抑制中性白细胞激活和炎性因子TNFα分泌有关。

缺血预处理和后处理对兔移植肺缺血-再灌注损伤的保护作用的比较

目的比较缺血预处理和缺血后处理2种方法对大白兔肺移植术中缺血-再灌注损伤的保护作用。方法对48只新西兰大白兔建立异体兔肺移植模型,随机等分为缺血再灌组(IR组)、缺血预处理组(IPC组)、缺血后处理组(IPOST组)。监测移植再灌注后60、120 min时氧分压(PaO_2 )的变化,观察各组动物肺组织的病理改变,检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,计算肺湿/干重比(W/D)。结果成功制备新西兰大白兔肺移植模型,对缺血-再灌注损伤采用缺血预处理和后处理2种方法干预,病理结果显示,IPC组和IPOST组肺组织的损伤较轻,但IPC组损伤最轻;各组在不同时间点PaO_2 含量差异有统计学意义(P<0.05)。在60、120 min时,IPOST、IPC组PaO_2 高于IR组,IPOST组PaO_2 低于IPC组,差异有统计学意义(P<0.05);3组SOD、MDA、NO、TNF-α及W/D差异有统计学意义(P<0.05)。与IR组比较,IPC组SOD、NO高于IR组,而MDA、TNF-α及W/D低于IR组,差异有统计学意义(P<0.05),IPOST组SOD、NO低于IPC组,而MDA、TNF-α及W/D高于IPC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺血预处理及缺血后处理对兔肺移植缺血-再灌注损伤均有保护作用,其中缺血预处理的效果最明显。

NF-κB抑制剂对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的通过建立大鼠肺移植缺血再灌注模型,检测缺血再灌注损伤中肺组织中NF-κB、TNF-α及ICAM-1的表达,探讨核因子-κB抑制剂PDTC对大鼠肺移植缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法实验分3组,即假手术对照组(A组)、空白对照组(B组)和PDTC组(C组),每组8例。空白对照组用4℃LPDG液灌洗并保存4 h,PDTC组用含PDTC(40 mmol/L)的4℃LPDG液灌洗并保存供肺4 h。移植肺再灌注1 h后结束实验。测定肺组织湿-干重比、MPO活性,观察移植肺组织病理改变,ELISA测定TNF-α表达水平,免疫组化染色检测ICAM-1及NF-κB表达,RT-PCR检测NF-κB mRNA的水平。结果与空白对照组比较,PDTC组肺组织损伤程度明显减轻,肺组织湿干重比、MPO活性均有下降(P<0.01)。NF-κB、ICAM-1及TNF-α的表达水平较空白对照组明显减少(P<0.01)。结论核因子-κB抑制剂PDTC能有效地减轻缺血再灌注损伤,明显改善移植肺功能,其保护作用可能与抑制TNF-α和ICAM-1的表达有关。

烟碱对大鼠移植肺NF-κB表达和细胞因子的影响

目的评价外源性烟碱对大鼠移植肺损伤以及NF-κB表达和细胞因子的影响。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为3组,假手术组(S组;8只);肺移植组(C组;16只,供体、受体各8只);肺移植+烟碱处理组(N组;16只,供体、受体各8只)。S组只进行开胸等操作不进行肺移植;N组于肺移植术后15min时腹腔注射烟碱2 mg/kg。肺移植术后2 h取移植肺组织,进行肺组织病理损伤(LIS)评分,测定肺组织湿/干重比(W/D),采用免疫组化染色测定肺组织NF-κB表达,ELISA法测定血浆TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度。结果 C组NF-κB的表达明显高于N组和S组,S组NF-κB的表达最低。与C组比较N组和S组血浆IL-6、IL-1β和TNF-α浓度降低。与C组比较,N组和S组W/D和LIS评分降低;但N组仍比S组W/D和LIS评分高。结论外源性烟碱可能通过激活胆碱能抗炎通路减少NF-κB的表达及随后TNF-α、IL-1β和IL-6的合成,减轻大鼠移植肺损伤。

TGF-β_1对移植肺早期缺血再灌注损伤的保护作用

选用健康杂种犬30只,按体重和胸廓进行匹配行左单肺移植,并根据供肺灌洗液的不同随机分为四组各5只。盐水组用生理盐水灌注45 min,Euro组用Euro-collins液灌注45 min,TGF-β1组予Euro-collins液加TGF-β1蛋白(200 ng/ml)灌注45 min;正常对照只开胸,不予灌注。于移植后4 h获取各组移植肺组织,采用RT-PCR法检测bcl-2 mRNA含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与正常对照组比较,盐水组bcl-2 mRNA表达降低,Euro组无明显变化,而TGF-β1组移植肺组织中bcl-2 mRNA表达明显上调;与盐水组相比,Euro组和TGF-β1组SOD活性明显升高,其中TGF-β1组SOD活性强于Euro组。认为TGF-β1可通过上调凋亡抑制基因bcl-2,提高SOD水平,清除氧自由基,减少肺组织细胞凋亡,减轻供肺的缺血-再灌注早期所致的损伤,对移植肺有保护作用。

缺血预处理对无心跳供体大鼠移植肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究缺血预处理(IP)对无心跳供体(NHBD)大鼠移植肺缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及机制。方法:将SD大鼠随机配对分成4组,分别为NHBD热缺血1h组(对照组,NHBD1h)、IP组(实验组,IP)I、P+5-羟基葵酸盐组(实验组,IP+5-HD)和IP+二甲基亚砜组(溶剂对照组,IP+DMSO),每组4对。IP方案为开胸后夹闭大鼠左侧肺门5min,开放10min,然后放血处死。热缺血1h、冷缺血4h后行左肺移植。结果:IP组移植肺再灌注10min和1h的右颈动脉血PaO2与自身术前值差优于对照组(P<0.05)。再灌注2h后,IP组左肺静脉血PaO2数值优于对照组(175.5±14.3比132.3±33.8,P<0.05)。再灌注1h和2h时,IP组的双肺顺应性优于对照组(P<0.05)。再灌注2h时,IP组以及IP+DMSO组的血清和移植肺组织丙二醛(MDA)含量、移植肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)和凋亡指数显著低于NHBD1h组(P<0.05);总抗氧化能力(T-AOC)高于NHBD1h组(P<0.05);上述指标IP+5HD组与NHBD1h组比较,差异无统计学意义;各组血清TNF-α、IL-6含量之间的差异无统计学意义。光镜和电镜下观察到IP以及IP+DMSO组的细胞结构受损程度较轻,NHBD1h组以及IP+5-HD组细胞损伤较明显。结论:本大鼠模型中,单次5min缺血+10min再灌注的IP方案,对热缺血1h的大鼠NHBD移植肺IRI有较强的早期保护效应,这种保护效应与线粒体ATP敏感的钾通道开放有关。