移行上皮反应基因TERE1的结构与功能分析

目的用生物信息软件分析移行上皮反应基因TERE1蛋白的跨膜结构,并预测分析其重要蛋白结构域功能。检测TERE1在细胞中表达定位。方法采用不同生物信息学软件预测分析TERE1的蛋白跨膜结构及重要结构域功能。采用分子克隆方法构建绿色荧光蛋白-移行上皮反应基因(pEGFP-TERE1)重组质粒,转染人膀胱癌细胞系T24,激光共聚焦显微镜观察TERE1在细胞中表达定位。结果 TERE1蛋白为多次跨膜的蛋白,保守的区域形成3个环loop 1、loop 2和loop 3;N端和loop 1含有高度保守的位点;以loop 2和loop 3之间的区域采用PROSITE软件分析显示UbiA类异戊烯转移酶家族具有一致性序列。采用菌液PCR、双酶切鉴定和DNA测序验证pEGFP-TERE1重组质粒构建成功。TERE1主要在T24细胞浆中表达。结论 TERE1为多次跨膜的蛋白,保守的区域形成3个环,UbiA类异戊烯转移酶家族具有一致性序列。TERE1主要在T24细胞浆中表达。

移行上皮反应基因在小鼠主要器官发育过程中的表达

目的：研究移行上皮反应基因（TERE1）在小鼠胚胎着床后至新生儿断乳期主要器官中的正常表达规律。方法：于E11d-E18d、P0d、P7d、P14d、P21d，取得小鼠胚胎脑、眼、心、肺、胃、肝、肢、肾（肾自E13d开始），利用实时荧光定量PCR方法检测TERE1基因在各器官的表达丰度。结果：除仅在P21d肢未检出外，TERE1基因在小鼠主要器官的发育过程中均有表达，且在脑、眼、心、肺、胃、肝、肾的表达水平较高；该基因的表达除在小鼠肾发育过程中呈升高趋势外，在脑、眼、心、肺、胃、肝、肢的表达均呈波动性。结论：TERE1基因在小鼠器官发育过程中呈广泛表达，且表达丰度不同，表达模式也不同。

移行上皮反应基因1蛋白调控巨噬细胞胆固醇代谢作用研究

目的:探讨移行上皮反应基因1(TERE1)蛋白对巨噬细胞胆固醇代谢的影响及潜在的机制。方法:以氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理巨噬细胞RAW264.7,观察TERE1的蛋白和mRNA表达水平变化。以TERE1过表达慢病毒和TERE1 siRNA分别建立高或低表达TERE1的巨噬细胞模型,分别测定ox-LDL孵育后细胞内胆固醇含量变化。同时,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胆固醇转运因子的变化。结果:ox-LDL使巨噬细胞TERE1的mRNA和蛋白表达水平显著增加(P均<0.05)。RT-PCR检测发现,与对照组比较,TERE1过表达慢病毒转染巨噬细胞组TERE1 mRNA表达显著增加;而TERE1 siRNA转染巨噬细胞组TERE1表达显著减少(P均<0.05)。在ox-LDL作用下,与空白对照组和空病毒组相比,TERE1过表达组巨噬细胞内胆固醇含量减少(P<0.05);TERE1低表达组巨噬细胞内则胆固醇含量增多(P<0.05)。RT-PCR检测显示,与空白对照组和空病毒组相比,过表达TERE1的巨噬细胞其胆固醇流出相关基因ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和ATP结合盒转运体A1(ABCG1)表达增加(P均<0.05);TERE1低表达巨噬细胞组则ABCA1和ABCG1表达减少(P均<0.05),两种细胞的胆固醇流入相关基因白细胞分化抗原36(CD36)和清道夫受体A(SR-A)则无明显改变(P>0.05)。结论:激活TERE1蛋白可以使巨噬细胞内胆固醇含量降低;TERE1蛋白可能通过激活巨噬细胞内胆固醇流出相关基因,增加胆固醇流出。

TERE1和VEGF在肾癌中的表达

[目的]探讨肾癌中移行上皮反应基因(TERE1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。[方法]应用RealtimeRT-PCR分别检测32例肾癌及癌旁正常肾组织中TERE1和VEGF的mRNA表达水平。[结果]肾癌的TERE1mRNA表达水平中位值(1.55)显著性低于癌旁正常组织(2.96),P<0.05。肾癌的VEGFmRNA表达水平中位值(43.22)显著性高于癌旁正常组织(20.35),P<0.05。TERE1与VEGF表达无显著性相关。[结论]TERE1和VEGF的表达与肾癌的发生相关,监测两者指标有一定的临床意义。