二氢杨梅素对小鼠肝脏谷胱甘肽-S转-移酶的抑制作用及其动力学分析

目的研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对小鼠肝脏谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase,GST)的抑制作用及其酶动力学。方法采用差速离心法制备小鼠肝胞质液酶,用半数效量概率单位法及Lineweaver-Burk双倒数作图法求得小鼠肝脏GST的米氏常数(Km)、最大反应速度(Vmax)和DMY对小鼠肝脏GST的半数抑制浓度(IC50),判断DMY对GST的抑制类型和抑制常数(Ki)。结果 DMY对小鼠肝脏GST有抑制作用,其IC50是(121.14±13.66)μmol.L-1;对底物还原型谷胱甘肽(GSH),GST的Km是0.1460 mmol.L-1,Vmax是175.44 U.mg-1;对底物1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB),GST的Km是0.0937 mmol.L-1,Vmax是212.77 U.mg-1。对底物GSH,DMY对小鼠肝脏GST属于竞争性抑制,其抑制常数0.22 mmol.L-1;对底物CD-NB,DMY对小鼠肝脏GST属于非竞争性抑制,其抑制常数0.54 mmol.L-1。结论 DMY对小鼠肝脏GST的活性有明显抑制作用。

肝癌γ-谷氨酰移换酶的研究进展

自从Orlowski 等应用淀粉胶电泳发现原发性肝癌患者血清中存在着肝癌特异性γ-谷氨酰移换酶(GGT,EC2.3.2.2)及Fiala 等首先提出GGT 作为肝癌的重要标志物后,引起了临床研究的极大兴趣.多位学者业已证明:在肝细胞癌的酶学诊断中,以糖蛋白GGT 肝癌特异区带(I’,Ⅱ和Ⅱ’)

人精液中一氧化氮和γ-谷氨酰基移换酶活性的关系

目的 :探讨人精液中一氧化氮 (NO)与γ 谷氨酰基移换酶 (γ glutamyltransferase,GGT)活性的关系 .方法 :参照WHO标准 ,进行精液常规分析 ,按精子密度 (× 1 0 9/L)、活动率 (% )不同分为 (正常 ,<2 0 ,<2 0～ 4 0 ,>4 0 ) 4个组 .采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐 (NO-3 ) .用以Glucana为底物动力学方法测定精液GGT活性 .结果 :89例不育者NO含量为 (78.5± 1 .5 ) μmol/L ,与精子密度 (33.3±1 4 .3)× 1 0 9/L ,活动率 (33.3± 1 4 .3) %及GGT活性 (2 0 3.1 9±35 .89)× 1 0 3 nkat/L呈显著的负相关 (r分别为 - 0 .5 6 ,- 0 .6 3,- 0 .71 ,P <0 .0 1 ) .结论 :精液GGT活性测定是评价附睾头部功能的重要指标 ,提示NO对精液GGT活性有抑制 。

三酰甘油在非酒精性脂肪肝中的诊断价值及其与丙氨酸氨基移换酶的关系

目的用ROC曲线(ReceiverOperatingCharacteristicCurve)评价血三酰甘油(triglyceride,TG)对非酒精性脂肪肝(non-alcoholicfattyliver,NAFL)诊断意义及丙氨酸氨基移换酶(Alanineaminotransferase,ALT)与三酰甘油的关系。方法通过B超和临床体格检查,血清甲、乙、丙型肝炎病毒标志物均为阴性,血液葡萄糖在正常参考范围内,无饮酒嗜好的门诊健康体检人员217人,其中男122人,女95人。将以上人员按TG分为3组:第1组(血ALT正常)80人,其中男45人,女35人;第2组(血ALT增高)53人,其中男35人,女18人(第1、2组经诊断为非酒精性脂肪肝)。第3组为正常对照组(ALT和TG均在正常范围)未发现脂肪肝,共84人,其中男42人,女42人。结果第1、2组ROC曲线的面积(areaunderthecurve,AUC)分别为0.907和0.917,非常接近,第1、2组合并总数的AUC为0.911。第1组与第2组TG值差异无显著性(t=0.650P=0.517);第1、2组TG值与第3组比较差异均有显著性(t分别为8.118、10.420,均P<0.005)。第1、2组男女NAFL增高例数经校正χ2检验差异均有显著性(第1组χ2=0.423,0.75>P>0.5;第2组χ2=0.00328,P>0.9)。第1、2两组男女TG增高总例数差异亦无显著性(0.9>P>0.75)。第2组ALT和TG无相关关系。r=0.0402,P>0.25。结论经ROC曲线分析TG对NAFL很有协助诊断价值;ALT与TG为单独预报因子,无相关关系;男女TG水平增高例数统计学上无差别。

血清门冬氨酸基移换酶测定的两种方法比较

目的 :为了提高AST的测定水平。方法 :采用速率法和比色法对三个水平的定值血清同时进行AST的重复性和高值血清的 10个稀释样本的准确性检测 ,并对以上两种方法所测结果进行统计学分析。结果 :两种方法的重复性尚可 ,三个质控血清速率法和比色法的 2 0次测定结果分别为 2 6 3 2± 1 76,CV =6 69% ,48 5 4± 2 17,CV =4 47% ,10 5 13± 3 61,CV =3 43 % ;2 7 65± 1 5 2 ,CV =5 5 0 % ,5 4 10± 2 0 3 ,CV =3 75 % ,96 78± 3 2 4,CV =3 3 5 %。速率法和比色法对 10个定值样本 2 0次测定值与预期值的符合率分别为 (96 2 8± 8 65 ) % ,CV =8 87% ;(97 15± 5 43 ) % ,CV=5 5 9%。两种方法准确性无明显差异 (t =0 3 81,P >0 0 5 )。结论 :以上两种测定血清AST差别不大 ,可以同时采用 ,以利工作。

丙氨酸氨基移换酶(ALT)室内质量控制分析

以丙氨酸氨基移换酶ALT为例,验证 Dade 公司的质控品在室内质控中的稳定性,通过4-9月份的测试结果分析,我们发现搞好室内质控质控品是关键,其次还应从人员素质等多方面加以控制。

寄主植物对B型烟粉虱(Bemisia tabaci)几种主要解毒酶活性的影响

研究测定了棉花、一品红、茄子和番茄4个B型烟粉虱(Bemisia tabaci)种群α-NA羧酸酯酶、β-NA羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活性。结果表明:α-NA羧酸酯酶活性与β-NA羧酸酯酶活性比值均大于1,说明B型烟粉虱水解α-NA的能力高于对β-NA的水解能力;B型烟粉虱不同寄主种群α-NA羧酸酯酶、β-NA羧酸酯酶活性个体分布频率均存在一定差异。B型烟粉虱番茄种群羧酸酯酶活性最高(93.06 mOD/(mg protein.min)),是棉花种群的1.49倍。B型烟粉虱茄子种群乙酰胆碱酯酶活性明显高于其他寄主种群,达极显著差异水平(p<0.01);茄子种群乙酰胆碱酯酶活性分布频率在>4U/mgprotein区间段的分布高达85%,与其他3个寄主种群分布明显不同。B型烟粉虱茄子种群谷胱甘肽S-转移酶活性最高,与其他3个寄主种群间的差异达极显著水平(p<0.01)。上述结果表明,B型烟粉虱主要解毒酶活性在不同的寄主植物上具有一定的生理可塑性。研究有利于揭示该害虫寄主范围广和寄主适应性强的生理生态学基础。

白血丹对急性白血病端粒酶活性的影响

目的 观察白血丹对急性白血病患者体内骨髓细胞端粒酶活性的影响 ,以探求白血丹治疗急性白血病的机制。方法 采用随机单盲对照试验的方法 ,将 30例急性白血病患者分为治疗组和对照组 ,各 1 5例。治疗组用标准诱导缓解方案 +白血丹治疗 ,对照组用标准诱导缓解方案 +安慰剂治疗 ,1 5日为 1个疗程 ,观察 3个疗程。采用改良的TRAP -银染法检测 2组患者治疗前后骨髓单个核细胞的端粒酶活性水平。结果 ①治疗组有效率 93.3% ,对照组有效率 73.3% ,2组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。②治疗组治疗前平均端粒酶活性为 (5 .32± 3.2 5 ) ,经白血丹治疗 3个疗程后端粒酶活性平均值下降至 (1 .4 3± 0 .34) ,而对照组治疗前平均端粒酶活性为 (5 .1 6± 3.1 4 ) ,经安慰剂治疗后端粒酶活性下降至 (2 .5 1± 1 .0 3) ,2组治疗前后比较及治疗后端粒酶活性比较均有显著性差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 )。结论 白血丹通过降低端粒酶活性治疗急性白血病 ,巩固其化疗疗效 。

转氨酶正常或低于正常值2倍以下慢性乙型肝炎病毒感染者治疗问题

转氨酶正常或低于正常值2倍以下HBV感染者治疗问题已成为临床关注的热点。既往和更新版的国际、国内乙型肝炎相关指南对ALT正常或低于正常值2倍以下的HBV感染者,包括免疫耐受期、非活动性HBV携带者、非活动性HBsAg携带者因抗病毒治疗效果极差,故不予推荐抗病毒治疗。肝硬化患者,只要能检出HBVDNA,不论ALT或AST是否升高,应给予核苷(酸)类似物抗病毒治疗。笔者认为临床工作中对持续HBV DNA阳性,即使转氨酶正常或低于正常值2倍以下的HBV感染者,只要临床上有肝纤维化的证据,如影像学检查(B超、CT、MRI)提示脾脏肿大、血小板降低,其原因只能用HBV感染解释的,尤其对年龄在40岁以上或接近40岁年龄段的HBV感染者均应积极抗病毒治疗。慢性HBV携带者无需免疫治疗。本文还对慢性HBV携带者提出了若干建议,目的是普及乙型肝炎知识,提高认知程度,加强依从性教育。

海洛因对大鼠肝功能血浆酶学的影响

目的:研究海洛因依赖大鼠肝功能的变化。方法:采用逐渐递增剂量法腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖及戒断大鼠模型,50只建模成功Wistar大鼠随机分成对照组、给药3 d组、给药9 d组、戒断3 d组及戒断9 d组,检测各组大鼠血液生化指标天门冬氨酸氨基移换酶(AST)、丙氨酸氨基移换酶(ALT)及γ-谷氨酰基移换酶(GGT)。结果:与对照组比较,给药3 d组ALT的含量明显下降(P<0.05),给药9 d组ALT的含量下降更为显著(P<0.01),戒断3 d组ALT的含量上升显著(P<0.01);给药9 d组GGT的含量显著下降(P<0.01)。与给药9 d组相比,戒断3 d组AST的血浆含量显著升高(P<0.01);戒断3 d、9 d组的ALT血浆含量均显著升高(P<0.01);戒断3 d组血浆GGT含量明显升高(P<0.05),戒断9 d组血浆GGT含量升高更为显著(P<0.01)。结论:海洛因对肝功能的损害有延迟性及持续性,且不能在停药后立即消除。

鼠肝脏癌变过程中GGT及其同工酶的表达与动态变化

本文对化学致癌剂２－ＦＡＡ诱发鼠肝癌过程中，膜结合γ－谷氨酰移换酶（ＧＧＴ）及其同工酶的表达与动态变化进行了研究，Ｗｉｓｔａｒ大鼠经２－ＦＡＡ喂饲后，经病理学及的组织化学证实，在肝脏由癌前病变到癌变过程中，肝细胞大量表达ＧＧＴ并分泌入血。肝组织ＧＧＴ，实验各组均明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），接近胎鼠肝ＧＧＴ水平，血中ＧＧＴ呈持续住增加．早期升高速度慢于ＡＤＡ，ＧＳＴ和ＡＬＴ，正常鼠肝及血ＧＧＴ仅为单一区带，肝癌鼠肝与血清ＧＧＴ也呈动态改变，显示正常鼠和胎鼠肝ＧＧＴ的双重特征，研究结果提示鼠肝癌时ＧＧＴ大量表达，且有癌胚性质，且血中同工酶异常区带出现较早，检测其同工酶有助于对鼠肝癌的早期诊断。

镉作业工人尿碱性磷酸酶和γ -谷酰转肽酶活性测定

目的 了解碱性磷酸酶 (ALP)、γ -谷氨酰移换酶 (γ -GT)能否作为镉接触者早期肾脏损害的监测指标。方法 用比色法测定 63名镉接触者尿ALP、γ -GT值。结果 在接触镉早期即可出现ALP、γ -GT酶活性的异常。结论 尿中ALP、γ

野生苦碟子降酶临床应用研究

随着自我保健意识的加强,经血液检测ALT、γ-GT异常患者日益增多.应用10%苦碟子煎剂进行降酶,采用用药前后血液检测指标自身对照的方法,经90d的服药降酶后,能使患者血液检测中ALT、γ-GT高异常指标显著性降低,临床症状明显改善,经统计学处理用药前后血液中ALT、γ-GT指标差异性显著,证明苦碟子煎剂具有清热解毒、活血祛瘀、降酶等作用,对改善肝功能,预防治疗肝胆疾病的发生发展具有显著意义,现将苦碟子煎剂临床应用研究结果报告如下.……

肝细胞损伤相关酶类的检测及临床应用价值

反映肝细胞损伤的酶类很多,升高的主要有丙氨酸氨基换酶(ALT)、门冬氨酸氨基移换酶(AST)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、谷胱甘肽S转移酶(GST)、异柠檬酸脱氢酶(ICD)、醇脱氢酶(ADH)、山梨醇脱氢酶(SDH)、鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)、鸟嘌呤脱氢酶(GDA)、精氨酸代琥珀酸裂合酶(ASAC)、碱性磷酸酶(ALP)和L-r-谷氨酰基移换酶(r-GT)。肝损伤时各种酶在血清中出现的先后及酶活力升同幅度不同,在此就其中的ALT、AST、r-GT、GDH、GST各酶的特异性、灵敏性作一简单介绍。

替莫唑胺改变人胶质瘤细胞系U251耐药机制的体外研究

目的建立替莫唑胺耐药人胶质瘤细胞系,探讨其耐药性变化规律及耐药机制,以期为临床优化药物化疗方案提供理论依据。方法采用分步诱导法使人胶质瘤细胞系U251对替莫唑胺耐药,磺酰罗丹明B比色法检测细胞耐药指数和存活率;Western blotting法检测O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达水平,以及倍增替莫唑胺终浓度后MGMT表达水平。结果成功建立替莫唑胺耐药U251/TR细胞,在替莫唑胺初始诱导剂量0.25μg/ml、终浓度16.00μg/ml培养液中,U251/TR细胞半数抑制浓度为(220.87±2.34)μmol/L,约为U251细胞[(33.12±1.52)μmol/L]的7倍(t=-116.542,P=0.000),其耐药指数约为7;U251/TR细胞MGMT表达水平为(1.47±0.30),较U251细胞(0.19±0.03)明显升高(t=-20.230,P=0.000)。与溶媒对照组比较,经倍增替莫唑胺终浓度诱导的U251/TR细胞仍呈现增殖抑制现象,以体外培养第3天时最为明显(P=0.000);MGMT表达水平相应降低(均P=0.000),呈现自身克服耐药现象。结论采用分步诱导法可于体外成功建立替莫唑胺耐药人胶质瘤细胞系。MGMT表达水平升高是导致U251/TR细胞对替莫唑胺耐药的主要机制,替莫唑胺可以通过自身消耗MGMT而改变U251/TR细胞的耐药特性,发挥抗耐药作用。

复方大黄制剂对老龄小鼠大脑皮质和海马ChAT、AchE活性及Ach含量的影响

目的研究复方大黄制剂对老龄小鼠大脑皮质和海马ＣｈＡＴ、ＡｃｈＥ活性及Ａｃｈ含量的影响，以期从胆碱能神经药理学角度探讨其抗衰老作用机理。方法取１２月龄和３月龄小鼠，随机分组、设立对照。ＣｈＡＴ、ＡｃｈＥ活性测定分别采用Ｆｏｎｎｕｎ氏法和ＲＲＡ法，Ａｃｈ含量测定采用荧光法。结果该药能显著提高１２月龄小鼠大脑皮质和海马中ＣｈＡＴ活性，并能显著降低ＡｃｈＥ活性，与空白对照组、非大黄气阴口服液组及安慰剂组比较均有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１～０．００１），但对Ａｃｈ含量无显著性影响，对３月龄小鼠也无上述作用。非大黄气阴口服液对１２月龄小鼠无上述影响。结论复方大黄制剂是通过影响老龄小鼠中枢胆碱能神经化学改善其衰老变化的。