稀土氧化钕粉尘染毒大鼠不同时间点Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量及IL-12表达的研究

目的探讨稀土氧化钕粉尘暴露对大鼠不同时间点肺组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-12(IL-12)表达的变化。方法选用125只SPF级成年SD雄性大鼠,体重(200±16)g,随机分为染尘组和对照组,采用气管非暴露插管灌注法建立模型,分别用稀土氧化钕粉尘悬液0.8 m L(50 mg/m L)和0.9%生理盐水0.8 m L进行一次性染尘。分别于染尘后第3、7、14、21和28 d各处死15只染尘组和10只对照组大鼠,收集BALF;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定染尘组和对照组大鼠BALF上清液中IL-12含量,肺组织分别进行HE染色、天狼猩红染色,运用Image-Pro Plus Version 4.5for Windows TM图象分析系统对肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维含量进行定量分析。结果稀土氧化钕粉尘致实验大鼠肺组织纤维化过程中可见Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的大量增生,染尘后早期主要以Ⅰ型胶原纤维增生为主。其中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的表达量明显增加,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学观察证实,染尘大鼠早期肺组织以炎症反应为主,且随染尘时间的延长炎症反应程度呈现加重的趋势。染尘后不同时间点大鼠BALF上清液中IL-12出现先减少后增加,在第7 d达到最低值后又呈现增加趋势,但均高于对照组(P<0.05)。结论稀土氧化钕粉尘诱导大鼠肺纤维化过程中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量增多,且分布范围扩大。同时BALF上清液中IL-12出现高表达,表明IL-12的含量变化与稀土氧化钕粉尘致大鼠肺纤维化发生发展密切相关。

miR-29a调控TGF-β1/Smad3通路在稀土氧化钕致肺纤维化过程中的作用

目的探讨稀土氧化钕(Nd_(2)O_(3))致小鼠肺纤维化过程中miR-29a对转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad同源物3(Smad3)通路的调控作用。方法于2021年3月,选择SPF级C57/BL6J雄性小鼠72只,随机分为对照组、Nd_(2)O_(3)组、Nd_(2)O_(3)+miR-29a干预剂(agomir)组、Nd_(2)O_(3)+NC agomir组,每组18只。Nd_(2)O_(3)组、Nd_(2)O_(3)+miR-29a agomir组、Nd_(2)O_(3)+NC agomir组采用非暴露式气管滴注法染毒,染尘浓度为250 mg/ml,染尘体积为0.1 ml,对照组给予同体积生理盐水。染尘后,每3天Nd_(2)O_(3)+miR-29a agomir组小鼠尾静脉注射0.1 ml(5 nmol)miR-29a agomir,Nd_(2)O_(3)+NC agomir组小鼠尾静脉注射0.1 ml NC agomir。染尘后第7、14、28天每组各处死6只小鼠,取小鼠肺组织,HE染色观察小鼠肺组织病理状况;ELISA法检测TGF-β1、结缔组织生长因子(CTGF)含量;qRT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达量;免疫荧光法检测小鼠肺组织中Smad3的表达量,利用TargetScan7、miRDB等网站工具预测miR-29a靶基因。计量资料满足正态分布时用±s表示,组间比较用两独立样本t检验,两两比较方差齐时用LSD法检验。结果HE染色显示,Nd_(2)O_(3)组小鼠肺组织初期出现明显的炎症细胞浸润、肺泡结构紊乱,28 d时,小鼠肺组织胶原纤维增多且肺组织呈纤维化蜂窝状变,Nd_(2)O_(3)+miR-29a agomir组小鼠肺组织纤维化程度明显减轻;与Nd_(2)O_(3)+NC agomir组比较,Nd_(2)O_(3)+miR-29a agomir组小鼠肺组织中TGF-β1、CTGF的含量较低,小鼠肺组织中TGF-β1 mRNA的相对表达量较低,细胞核中Smad3表达水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-29a相关下游靶基因有152个,其中FBN1、MAP2K6、KPNB1、COL1A2、SNIP1、LAMC1、SP1可能与TGF-β1/Smad3通路的调控有关。结论miR-29a可能通过调节TGF-β1/Smad3信号通路影响稀土Nd_(2)O_(3)暴露所致的小鼠肺纤维化,过表达miR-29a可能抑制TGF-β1/Smad3信号通路而减轻小鼠肺纤维化程度。

稀土氧化钕暴露对大鼠肺泡巨噬细胞毒性及炎性因子分泌的影响

目的研究稀土氧化钕暴露对大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)的毒性及其炎性因子分泌的影响。方法将处于对数生长期的NR8383细胞,暴露于终浓度分别为0(对照,PBS)、12.5、25、50、100、200μg/ml的氧化钕混悬液12、24、48 h后,采用MTT法测定NR8383细胞的抑制率;终浓度为0(对照,PBS)、25、50、100μg/ml的氧化钕混悬液24 h后,采用酶标法测定细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)及白介素-8(IL-8)的浓度。结果与对照组比较,各浓度氧化钕暴露不同时间后NR8383细胞的抑制率均较高,各浓度氧化钕暴露NR8383细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-8的浓度均较高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着氧化钕暴露浓度的升高,NR8383细胞的抑制率及上清中TNF-α、IL-1β、IL-8的浓度均呈上升趋势。氧化钕暴露NR8383细胞的抑制率与上清中TNF-α、IL-1β、IL-8的浓度均呈正相关(P<0.01);且NR8383细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-8浓度两两之间均呈正相关(P<0.01)。结论氧化钕刺激可引起NR8383细胞分泌炎性因子增加。

稀土氧化钕粉尘致大鼠肺纤维化过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原及白介素-12表达的变化

目的探讨稀土氧化钕粉尘的致纤维化过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维、白介素-12(IL-12)表达的变化特征。方法选用SPF级健康成年雄性SD大鼠70只,体重(200±16)g,采用气管非暴露插管灌注法进行染尘建立模型。实验组按25、50、100、150(mg/kg)稀土氧化钕粉尘悬液0.8 ml一次性染尘,对照组0.9%生理盐水0.8 ml。在28 d后实验组各处死大鼠15只,对照组处死10只。酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定实验组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)上清液中IL-12含量;肺组织采用天狼猩红染色,偏光显微镜下观察Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维。结果稀土氧化钕粉尘致实验大鼠肺组织纤维化过程中可见Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的大量增生,染尘后早期主要以Ⅰ型胶原纤维增生为主。其Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维增加与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在实验组中大鼠BALF上清液中IL-12随着染尘剂量的增加而逐渐增多,含量均高于对照组(P<0.05)。结论稀土氧化钕粉尘在诱导大鼠肺部组织纤维化过程中,Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维均大量增多,分布范围扩大。同时BALF上清液中IL-12出现高表达,表明IL-12在肺组织纤维化发生和发展过程中具有一定的作用。

氧化钕改性云母钛光干涉颜料的制备及表征

采用均匀沉淀法,以尿素为沉淀剂,在干涉色为绿色的云母钛表面包覆稀土氧化钕,制得了Nd2O3/TiO2/Mica稀土珠光颜料。研究了氧化钕的不同加入量对珠光效果及紫外吸收性能的影响。结果表明,云母钛表面包覆5%Nd2O3的紫外吸收性能明显高于云母钛本身,起到了很好的紫外屏蔽作用,且其珠光效果也为最佳。而且具有绿-淡紫随角异色效应。

纳米氧化钕诱导大鼠多器官炎症中miR⁃4326和miR⁃1299的表达及意义

探讨稀土纳米氧化钕(NPs⁃Nd_(2)O_(3))致雄性SD大鼠多器官炎症反应中miR⁃4326、miR⁃1299的表达及意义。将42只健康雄性SD大鼠随机分为对照组和NPs⁃Nd_(2)O_(3)(100 mg/kg)染毒组,采用非暴露式气管内一次性滴注法对大鼠染毒,分别在染毒第7、14和28天后处死大鼠。提取大鼠肺、肝、肾、脾、脑、睾丸组织中的总RNA,利用实时荧光定量PCR检测大鼠各脏器中IL⁃6和TNF⁃α的水平以及MiR⁃4326、MiR⁃1299的水平;Pearson相关分析探讨miR⁃4326、miR⁃1299与TNF⁃α、IL⁃6的相关性;TargetScan、miReap、miRanda网站预测与miR⁃4326和miR⁃1299相互作用的下游靶基因。结果显示NPs⁃Nd_(2)O_(3)染毒7、14、28天后,大鼠肺组织中TNF⁃α、IL⁃6的表达均升高(P<0.05);脑、肝、脾、肾、睾丸组织中TNF⁃α的表达水平均显著上升(P<0.05);大鼠各脏器中的miR⁃4326、miR⁃1299表达水平均明显上调(P<0.05),且与IL⁃6或TNF⁃α的表达呈相关性。KEGG通路富集分析发现,与miR⁃4326作用的mR⁃NAs中有20个mRNAs参与JAK⁃STAT通路,20个mRNAs参与NF⁃κB通路;与miR⁃1299作用的mRNAs中有39个mRNAs参与JAK⁃STAT通路,33个mRNAs参与NF⁃κB通路,1个mRNA同时参与以上两条通路。表明NPs⁃Nd_(2)O_(3)经呼吸道进入大鼠体内可引起大鼠肺、脑、肝、脾、肾、睾丸炎症反应;NPs⁃Nd_(2)O_(3)染毒组大鼠各脏器中miR⁃4326、miR⁃1299表达水平显著上升,并与IL⁃6或TNF⁃α的表达具有相关性;miR⁃4326、miR⁃1299可能通过JAK⁃STAT通路和NF⁃κB通路参与NPs⁃Nd_(2)O_(3)诱导的大鼠多器官炎症反应。