不同浓度稀少精子冷冻技术效果的观察

目的:回顾性分析常规精子冷冻技术和稀少精子冷冻技术对重度少精子症患者精子冷融效果,探索稀少精子冷冻保存的有效方法。方法:收集82例重度少精子症患者精液,采用稀少精子冷冻技术冷冻标本,与24例采用常规冷冻技术冷冻的少精子症(精子浓度<15×10~6/ml)标本进行比较。前者又根据按不同浓度分为A组(精子浓度<1×10~6/ml,n=54)、和B组(1×10~6/ml≤精子浓度<5×10~6/ml,n=28),后者为C组。比较3组精子冷冻复苏率和回收率。结果:A、B、C组3组复苏率分别为(62.8±18.7)%、(61.9±17.2)%、(50.7±13.5)%,回收率分别为(68.7±18.4)%、(70.7±15.5)%、(29.2±12.4)%;以上指标,A、B组之间均无显著差异(P>0.05),但A组和B组均显著高于C组(P<0.05)。结论:稀少精子冷冻技术在临床中已趋于成熟,冻融结局相对稳定,是一种值得推广的男性生育力保存方式。

人类稀少精子冷冻方法研究进展

随着经济社会的不断发展、环境的污染和人民生活压力的逐渐增加,外界对生育能力的不良影响也逐渐加大,特别是男性的生育能力明显下降。国外学者综合过去开展的185项精液分析数据统计显示,从1973年到2011年期间,欧美地区的男性精液精子含量下降了52%,从每毫升精液含有大约9900万个精子,下降到大约每毫升4700万个精子。

改良快速冷冻载体冻融人类稀少精子的实验研究

目的探讨人类稀少精子冷冻改良快速冷冻载体的实验研究,为重度少弱精子症患者的精子冷冻保存提供参考。方法2018年12月至2019年8月,在联勤保障部队第九〇〇医院生殖中心就诊的男性不育症患者:根据精液质量分为正常精液组和少弱精液组,每个实验样本选取3份精液分别进行充分混合,将混合精液稀释至浓度为(1~2)×10~6/ml,实验共计选取81份正常精液标本混匀稀释形成27个正常精液样本,选取54份少弱精液标本混匀稀释形成18个少弱精子样本。根据不同的冷冻载体各分3组进行精子冷冻:薄片精子冷冻管组(A组),麦管微量体积冷冻组(B组),改良快速冷冻载体组(C组),均采用商品化精子冷冻试剂1∶1混匀,熏蒸法后快速冷冻。比较3种载体冷冻复苏后,精子的活动力、存活率、DNA碎片指数和正常形态变化、精子顶体酶活性等指标变化,以评估改良快速冷冻载体的冷冻效率及安全性。统计学方法采用t检验、ANOVA分析、LSD多重比较。结果正常精液组的3种冷冻方法都会造成精子质量下降。正常精液组的C组的复苏后精子活动力、存活率均高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05)。正常精液组:C组复苏精子DNA碎片指数略低于A和B组,但差异无统计学意义(P>0.05);A、B、C 3组复苏后精子正常形态率均低于冷冻前,差异有统计学意义(P<0.05)。少弱精液组:A、B两组复苏后精子DNA碎片指数均高于冷冻前,差异有统计学意义(P<0.01);C组精子DNA碎片指数高于冷冻前,但差异无统计学意义(P=0.068),C组复苏精子DNA碎片指数略低于A和B组,但差异无统计学意义(P>0.05),A、B、C 3组冷冻精子复苏后正常形态率均低于冷冻前,差异无统计学意义(P>0.05)。正常精液组:冷冻前精子顶体酶活性为(123.6±12.8)IU/10~6个精子,复苏后A、B、C 3组顶体酶活性均有下降,分别为(74.7±15.6)、(84.7±13.5)、(91.2±16.2)IU/10~6个精子,差异有统计学意义(F=37.896,P<0.001),从对于精子顶体影响看,B、C组优于A组,差异有统计学意义(P=0.043、P=0.001)。结论改良快速冷冻载体对于稀少精子冷冻保存有一定优势,值得进一步探讨研究。

几种稀少精子冷冻方法的对比研究

目的:目前有些稀少精子的冷冻方法尚不能普及,主要是由于操作复杂或需使用特制耗材超出患者的经济能力。本对比研究旨在选择出更适合大多数实验室的更便捷有效的冷冻方法。方法:详细描述麦管法、改良麦管法、冻存管法、载杆法,比较其复苏效果和其他差异,同时指出液氮熏蒸和使用保护剂是必要的。结果:使用麦管法和冻存管法进行精子冷冻时,不加保护剂组解冻后密度、活率、复苏率及回收率均低于添加保护剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。使用改良麦管法和冻存管法进行精子解冻时,经熏蒸过程解冻后精子活率高,复苏率高,与不经熏蒸组比较,差异有统计学意义(P<0.05),改良麦管组解冻后,经熏蒸密度降低,回收率低,但是与不熏蒸组对比差异无统计学意义(P>0.05);冻存组解冻后,经熏蒸组密度升高,回收率升高,与不熏蒸组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。进行5次实验后发现,四种冷冻方法均有较理想的回收率,其中麦管法和冻存管法回收率差异无统计学意义(P>0.05),其余组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);改良麦管组与冻存管组间复苏率比较差异有统计学意义(P=0.036 4);改良麦管组与载杆组、麦管组与载杆组间的精子密度及活率比较差异有统计学意义(P=0.004 7、0.004 8)。结论:不同方法在各方面均有差异,应综合权衡,在保证复苏效果的前提下结合自身情况选取最合适的冷冻方法。

稀少精子冷冻复苏并行补救性睾丸显微取精ICSI一例报告

对于少弱精子症、隐匿性无精子症及手术取精的患者而言,精子冷冻能有效保存其生育力,避免取卵当日无精子可用的情况发生。但由于冷冻复苏过程中温度的剧烈变化,可能存在精子复苏后仍不符合卵胞浆内单精子注射技术的条件,无法使用的情况。本文就1例稀少精子冷冻复苏后无足够精子可用行睾丸显微取精ICSI病例进行分析总结,并结合相应文献进行讨论。

稀少精子麦管法不同冷冻方法的实验研究

目的优化稀少精子冷冻方法,缓解临床治疗无精子症或少、弱精子症患者的不育问题。方法使用麦管容器和改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)型冷冻保护剂,利用上游法将密度调整至(3～5)×106/ml,以液氨熏蒸方式冷冻。结果利用麦管液氮熏蒸法,平均精子复苏率为(47. 81±14. 32)%,冷冻复苏后正常形态率为(4. 58±2. 32)%,冷冻复苏后DNA碎片率为(9. 27±5. 10)%,高于其他方案,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论应用麦管加保护剂液氮熏蒸冷冻模式冷冻复苏后,稀少精子的各项特征参数均较优,是一种行之有效的方法。

稀少精子冻融后行卵胞浆内单精子注射对受精结局的影响

目的探讨TESA获得的稀少精子冻融后行ICSI的受精结局。方法回顾性分析本中心2014年1月至2021年4月对因严重少、弱、畸形精子症患者射出的精子行常规ICSI,对非梗阻性无精子患者经过TESA得到的少量新鲜或冻融后精子行ICSI,共200例患者为研究对象。按精子来源不同分为A:常规ICSI精子组(n=107);B:冷冻TESA精子组(n=35);C:新鲜TESA精子组(n=58)。通过病例对照研究,分析比较各组临床一般资料和实验室数据,评估胚胎质量。结果B组获卵数、卵子成熟率[(11.63±2.87)枚,82.31%]与A组[(10.81±3.21)枚,82.63%]和C组[(11.46±3.16)枚,82.41%]相比,差异无统计学意义(P>0.05)。B组的正常受精率、正常卵裂率、优质胚胎率(62.99%、84.83%、34.64%)与A组(82.11%、97.07%、48.29%)和C组(73.18%、91.02%、42.47%)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论经皮睾丸精子抽吸术获得的稀少精子冷冻复苏后行卵胞浆内单精子注射能够解决非梗阻性无精子症患者的不育难题。

电刺激取精术获取精子经体外培养后冻存方法研究

目的:优化电刺激取精术获取的精子处理和冷冻复苏方法,为临床不射精症的治疗和生育力保存提供新途径。方法:将20例同房不射精患者电刺激获取的精液(或尿液)样本分为两组,其中6例采用PBS洗涤并用Modified-HTF重悬(A组),另外14例用Modified-HTF直接洗涤并重悬(B组),对处理后精子行CASA,分析精子浓度和活动率;采用麦管载体和一步熏蒸法冷活动率为(1.12±0.41)%,M-HTF处理组的精子活动率为(9.23±9.43)%;冷冻复苏后,A组精子复苏后活动率和冷冻复苏率分别为(0.24±0.41)%、8.37%;B组的精子活动率和复苏率显著增加,分别为(4.11±2.33)%、35.41%。同样,电刺激尿液样本中,PBS处理组的精子活动率为(1.30±0.51)%,M-HTF处理组的精子活动率提高至(5.48±5.32)%;冷冻复苏后,A组的精子活动率和复苏率分别为(0.26±0.40)%、6.31%;B组的精子活动率和复苏率,分别为(3.02±1.64)%、45.88%。结论:本研究所建立的电刺激精子经体外培养及冷冻复苏的方法,可以显著增加精液和尿液样本中精子的活力,改善精子的冷冻复苏率,为临床不射精症的治疗和生育力保存提供新途径。

人参皂苷单体的抗疲劳作用研究进展

随着经济社会的不断发展、环境的污染和人民生活压力的逐渐增加,外界对生育能力的不良影响也逐渐加大,特别是男性的生育能力明显下降。国外学者综合过去开展的185项精液分析数据统计显示,从1973年到2011年期间,欧美地区的男性精液精子含量下降了52%,从每毫升精液含有大约9900万个精子,下降到大约每毫升4700万个精子。

李广文精液异常不育证治

精液异常所致不育的主要表现有无精子、精子稀少、死精子过多和精液不液化。其中无精子症有真假之别。真性无精子者,指睾丸无生精功能,属绝对不育,无法治愈;假性无精子者,系精道堵塞（如先天性射精管缺如,输精管粘连梗阻等）,精子不能顺利输出,治疗亦颇棘手。至于精子稀少、死精子过多、精液不液化,通过审症求因,辨证论治,一般都能收到比较满意的疗效。

治性欲冷淡民间验方

一、菟丝子、肉苁蓉、女贞子各20克,枸杞子、覆盆子,山萸肉、金樱子、鹿角霜各15克,车前子、韭菜子、桑螵蛸、蛇床子各10克,五味子6克,每日一剂,水煎服。本方适用于男子阳痿,早泄、遗精、滑精、精薄、精子稀少;女子带下清稀、性欲冷淡。二、熟地、淮山、巴戟天、党参。

自拟益精汤治疗精液异常致男性不育40例疗效观察

精液异常包括无精子，精子稀少，精液量少，畸形精子过多，精液液化不全，精子活动率低，精子活动力差，精液中含有白细胞、红细胞等。是导致男性不育之常见原因。笔者根据中医理论，进行临床辨证治疗，自拟益精汤治疗精液异常致男性不育40例，收到一定疗效，现报道如下。

中医药辨证治疗男性不育症264例

男性不育症主要是由于精液异常导致，精液异常大体分为精子稀少、精液不液化、精子畸形、精子活力低下以及死精等，有的单一存在，有的多种并存。笔者2001年7月～2012年10月对男性不育症的临床治疗进行了研究，现选择264例总结如下。

不孕夫妇要从性查因

妇女婚后同居二年以上,未采取任何避孕措施而未受孕者称为不孕症。孕育是男女两性相交、两精相合的结晶。如果性事生活不当,两精不能媾合,就可造成不孕。一般来说主要有以下几个方面。

不同精子来源质量冷冻方式与妊娠结局的关联性分析

目的探讨冷冻微量精子相关参数与体外受精周期实验室及临床结局的关系。方法回顾性分析2016年1月至2020年12月在生殖医学科行稀少精子冷冻复苏后卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的118个周期相关资料。根据冷冻精子的冷冻方法分为微量冷冻组、传统常规冷冻组;按精子来源分为丈夫射精组、附睾穿刺组、睾丸穿刺组;根据精子质量分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型严重少弱组。分别比较各组之间一般资料、实验室及临床结局等;采用多因素二元Logistic回归分析冷冻精子相关参数对临床结局的影响。结果①一般资料:按冷冻精子的冷冻方法、精子来源和精子质量分组,女方的年龄、体质量指数、不孕年限、基础促卵泡素(FSH)、抗苗勒氏管激素(AMH)、Gn天数、Gn总量、人绒毛膜促性腺激素(HCG)日雌二醇(E_(2))水平、获卵数、MⅡ卵数各组之间差异均无统计学意义(P>0.05);②实验室指标及临床结局:微量冷冻组与传统常规冷冻组两组组间胚胎利用率、临床妊娠率之间差异均无统计学意义(P>0.05),2PN率(P=0.002)、2PN卵裂率(P=0.036)、优胚率(P=0.002)差异均有统计学意义。丈夫射精组、附睾穿刺组和睾丸穿刺组组间比较,2PN率、临床妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05);2PN卵裂率(P<0.001)、胚胎利用率(P=0.048)、优胚率(P=0.002)差异均有统计学意义。Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型严重少弱组3组间比较,2PN率、胚胎利用率、优胚率之间差异均无统计学意义(P>0.05);2PN卵裂率(P<0.001)、种植率(P=0.005)、临床妊娠率(P=0.048)差异均有统计学意义;③多因素二元Logistic回归分析结果显示,Ⅲ型严重少弱精组相对Ⅰ型严重少弱精组是低临床妊娠率危险因素[OR:0.259,95%CI、0.075~0.887]。结论微量冷冻和常规冷冻可获得相似临床妊娠率,精子来源不影响临床妊娠率,极严重少弱精可能降低临床妊娠率,但还需要扩大样本量进一步证实。