血液中稀有细胞分离和富集方法研究进展

近年来,对血液中含量低于100个/mL的稀有细胞进行高效率、高纯度富集或捕获,并对捕获得到的靶细胞进行无损释放,是肿瘤精准治疗、早期疾病诊断等领域的研究热点。其中,对循环肿瘤细胞(CTCs)和胎儿有核红细胞(NRBCs)两类稀有细胞的富集研究最为广泛。针对这两类稀有细胞,从分离与富集原理、实验方法、分离效率等角度入手,综述该领域的研究进展,分析各类方法的优缺点。综合来看,稀有细胞的分离原理和方法大致可以分为物理分选法和免疫亲和法两类,前者利用稀有细胞的物理特性(如尺寸大小等)进行分选,后者利用细胞表面的特异性受体与抗体、核酸适配体进行的免疫亲和反应所产生的差异来分离和富集稀有细胞。此外,进一步介绍稀有细胞的物理学特性以及纳米技术、微流控技术、单细胞操作等新兴技术在分离富集领域的运用,并对各种分离方法进行简要的比较分析。

一种应用于单细胞RNA测序数据的稀有类型细胞检测算法

与批量RNA测序数据相比,单细胞RNA测序数据提供了单个细胞层面粒度的信息,能够揭示细胞之间的异质性。稀有类型细胞检测作为其重要的数据下游分析之一,具有显著的生物意义。针对现有算法时间复杂度高、精确度较低等问题,提出一种新的稀有类型细胞检测算法。该算法通过多轮快速随机划分,对每个细胞的稀有程度进行打分,然后将结果基于最近邻算法进行调整,最终预测出稀有类型细胞。在有标签的单细胞RNA测序数据集上的结果表明,与其他方法相比,该算法能够更有效地检测出稀有类型细胞。

稀有血型红细胞低温保存方法及复苏功能检测

目的探讨稀有血型红细胞低温保存及复苏方法。方法将Rh(D)阴性稀有血型少白细胞悬浮红细胞6 d内进行冰冻保存,取保存7 d内的红细胞悬液40袋,共分为两份,分别作为试验组和对照组,分别对两组材料进行甘油化冻存及复苏去甘油处置,除处理时间不同外,两组实验条件均一致,包括操作人员、离心转速和时间、复融温度等,降低外界对实验的干扰。统计2012年1-6月Rh(D)阴性红细胞采集使用情况、复苏后2,3-DPG含量和甘油残存量、红细胞回收率。结果 2012年1-6月间,Rh(D)阴性红细胞采集量逐步增多,差异有统计学意义(P<0.05)。两组血液经复苏后去甘油后,红细胞回收率差异有统计学意义(P<0.05)。复苏后2,3-DPG含量和甘油残存量则无明显差异。结论本研究方法不仅为患者赢得急救时间,还保证了血液的输注效果,对临床应用意义重大,值得推广。

应用血清学和分子生物学方法筛选浙江汉族人群中部分稀有血型

本研究探讨浙江汉族人群部分红细胞血型系统稀有表型的分布情况。利用血清学技术或分子生物学方法分别筛选H系统H-、MNS系统GPA-和s-、Rh系统Rhnull、Rhmod、D--、CCDEE和CCdEE、Gerbich系统GPC-、I系统i+、Lutheran系统Lub-、Kell系统k-和Jsb-、Duffy系统Fya-、Ok系统Oka-、Diego系统Dib-。利用尿素溶血试验筛选Kidd系统Jk(a-b-)表型。结果表明:1 618例献血者中检出1例Di(a+b-),1 007例献血者检出3例Fy(a-b+),633例Rh阴性献血者检出1例CCdEE。大规模筛选中未发现Jk(a-b-)、H-、GPA-、s-、GPC-、成人i+、Lub-、k-、Jsb-、Lub-和Oka-稀有血型。结论:在献血人群中发现Di(a+b-)、Fy(a-b+)、CCdEE稀有表型,提供了浙江汉族人群部分红细胞稀有血型的分布数据。

多个红细胞稀有血型系统抗原基因筛检与建库研究

目的筛检岳阳人群Rh(C/c/E/e)、Kidd(Jka/Jkb)、MNS(M/N/S/s/Mur)、Duffy(Fya/Fyb)、Diego(Dia/Dib)、Kell(K/k/Kpa/Kpb)、Dombrock(Doa/Dob)、Scianna(Sc1/Sc2)、Colton(Coa/Cob)、Lutheran(Lua/Lub)10个红细胞稀有血型系统的抗原基因,为建立本地区稀有血型库提供数据。方法采用PCR-SSP方法对303名岳阳汉族RhD(+)固定献血者进行10个稀有血型系统基因分型。结果岳阳汉族人群RhCE血型系统基因频率为:C=0.6865,c=0.3135,E=0.2492,e=0.7508;MNS血型基因频率为:M=0.4983,N=0.5017,S=0.0478,s=0.9521,Mur=0.0363;Duffy血型的基因频率为Fya=0.9472,Fyb=0.0528;Dombrock血型基因频率为:Doa=0.0842,Dob=0.9158;Diego血型基因频率为:Dia=0.0248,Dib=0.9752;Kidd血型基因频率为:Jka=0.4802,Jkb=0.5198。303名献血者Lutheran血型、Kell血型、Scianna血型和Colton血型均为纯合子,基因型分别为Lub/Lub、k/k/Kpa/Kpa、Scl/Scl和Coa/Coa。结论岳阳汉族人群的RhCE、MNS、Duffy、Dombrock、Diego、Kidd血型系统基因呈多态性分布,Lutheran和Colton、Kell、Scianna血型系统基因呈单态性分布,对指导建立多个红细胞血型系统稀有血型库具有重要意义。