微量稀释联合平板计数法评价聚维酮碘抗菌活性及其影响因素

[目的]建立一种评价聚维酮碘抗菌效果的科学方法,并研究影响其抗菌能力的因素,为聚维酮碘防控水产细菌病提供参考。[方法]采用微量稀释联合平板计数法(包括标测法和模测法)测定了不同厂商和批次聚维酮碘的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,并评估了孵育温度、细菌浓度、培养基浓度、pH、货架期对聚维酮碘最小抑菌浓度的影响。[结果]标测法测得的聚维酮碘对4株渔源多重耐药菌的MIC(213~17g/m^(3))和MBC(216~19g/m^(3))是临床使用浓度的数万倍。模测法测得的聚维酮碘对MH可培养水生菌的MIC(27~11g/m^(3))和MBC(29~12g/m^(3))是临床使用浓度的数百到数千倍。试验体系的温度(5℃到35℃)越高、细菌浓度(103到108cfu/mL)越大、培养基浓度(0.082~21 g/L,MH)越大、pH(5.5到9.5)越高,聚维酮碘对细菌的MIC越大。聚维酮碘固态原粉货架期为18个月,而聚维酮碘溶液货架期约3个月。[结论]聚维酮碘对渔源致病菌和水生MH可培养菌的MIC远远高于临床使用浓度;水温、pH、培养基浓度、细菌浓度都影响抗菌活性;聚维酮碘固体稳定性远高于其水溶液。

一种预测土壤中烟草黑胫病发病潜力的方法

【目的】了解土壤带菌量、预测土壤黑胫病发病潜力,可为病害的精准防控、田间病圃的高效选择、不同抗性品种的科学布局提供依据。【方法】采用土壤稀释平板计数法、土壤假植病害调查2种方法预测土壤中烟草黑胫病的发病潜力,田间病害系统调查验证。【结果】土壤带菌量与病害的发生率密切相关,病原菌含量越高,发病越重、蔓延越快;随着时间的推移,初始发病率高,最终病害发生越严重,最终发病率是初始发病率的10~20倍;土壤带菌普遍存在,在所采集的土壤中均可分离获得,病原菌含量积累到一定程度就引发病害,1000个/g土壤带菌量为病害经济阈值,3~5次的假植病害调查可以准确地预测土壤烟草黑胫病的发病潜力。【结论】1000个/g土壤带菌量为烟草黑胫病的经济阈值,据此可以对土壤的病菌进行预警;假植病害调查可以准确地预测土壤烟草黑胫病的发病潜力,表明建立在环境—寄主—病原三角关系的假植预测病害方法是一种相对准确、低成本、简便易推广的病害预测方法。

分光光度计比浊法测定乳酸杆菌胁迫存活率

乳酸杆菌胁迫抗性通常是用稀释平板菌落计数法来测定活菌数量从而计算存活率来表征的,该法存在检测周期较长和人为操作造成的误差较大的问题,该研究探究用分光光度计比浊法测定乳酸杆菌胁迫存活率的可行性。结果显示,在存活率为0.06~0.85时,发酵乳杆菌415酸胁迫存活率和取样时间点的生物量比之间的相关系数可达到0.9971,并且这条酸胁迫标准方程可用于测定其他类型的胁迫(H 2O 2胁迫、胆盐胁迫、冷冻胁迫等)存活率,拟合存活率与真值之间的误差率均小于10%。以植物乳杆菌LGD为研究对象,验证了该比浊法也可以应用于测定其他乳酸杆菌胁迫存活率。分光光度计比浊法操作简单,测定结果与稀释平板菌落计数法所得结果存在良好的线性相关,检测时间较少,误差较小,有利于实现乳酸杆菌胁迫存活率的快速准确检测。

壳寡糖水溶液(优力克)的抗菌活性及其影响因素

为探究壳寡糖水溶液(商品名优力克)体外抗菌活性及其影响因素,本研究采用标准微量肉汤稀释联合平板计数法(简称标测法)测定了优力克对4株渔源多重耐药菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)、采用微孔板模拟全池泼洒(简称模测法)测定了优力克对MHA可培养水生细菌的MIC和MBC、并评价了标测法的孵育温度、起始细菌浓度、MH浓度、pH和货架期对优力克MIC和MBC的影响。结果显示,标测法下,优力克对大肠杆菌E105、维氏气单胞菌AV040、副炭疽芽孢杆菌BC006和贝莱斯芽孢杆菌B14的MIC和MBC(32~64 g·m^(-3))是其临床推荐使用浓度(0.3~0.5 g·m^(-3))的数百倍;而模测法下,优力克对MHA可培养水生菌的MIC和MBC(4~8 g·m^(-3))是其临床推荐使用浓度的数十倍。标测法体系的温度(5~35℃)越高、细菌浓度(103~108 cfu·mL^(–1))越高、MH浓度(1/256~1×MH)越高、pH(5.5~9.5)越高,优力克对细菌的MIC和MBC越大(最大值是最小值的2~8倍);上述参数范围内优力克对4种测试菌的MIC在16~128 g·m^(-3)之间。优力克货架保质期至少为24个月。本研究结果提示,壳寡糖水溶液(优力克)是非常有前景的渔业水环境细菌载量的调节剂。

不同施肥处理对灰枣根际微生物的影响

[目的]调查不同施肥处理下灰枣根际微生物数量,了解节约化栽培管理对灰枣根际微生物的影响,从微生物的变化情况角度探讨灰枣生长.[方法]采用根际微生物多样性调查,平板稀释计数法和Duncan方差差异显著性分析法.[结果]处理13中根际土壤中的微生物以细菌居优势（18.14×10^5 CFU/g）放线菌次之（26.44×10^4 CFU/g）真菌最少（2.47×10^4 CFU/g）,对应的处理13,枣树的产量也是最高的;施用80％的NPK＋ （30 g）PGPR菌肥的时候,在枣树的不同生育期,细菌、真菌、放线菌的含量均高于其它处理.[结论]“3414”14个肥力处理中,不同施肥处理条件下枣树根际土壤微生物各生物类群数量差异显著（P＜0.05）,PGPR菌肥在相应的化肥投入基础上才能更好地发挥其作用特性.

尿素对鲤鱼消化道菌群的影响

用稀释平板计数法对摄食含尿素饲料和对照饲料的健康鲤鱼 (Cyprinuscarpio )肠道内菌群进行了分析。结果表明对照组鲤鱼肠道中需氧、兼性厌氧优势菌为气单胞菌属、芽孢杆菌属、葡萄球菌属和微球菌属 ,可以利用尿素的细菌占细菌总数的 55% ;试验组中优势菌为芽孢杆菌属、肠杆菌科和葡萄球菌属 ,微球菌属和气单胞菌属数量明显减少 ,假单孢菌属和产碱菌属则未检出 ,新检测出不动杆菌属 ,能利用尿素的细菌占总数的 85%。

大肠杆菌数量动态变化体系的探究

利用重组大肠杆菌DH5α生长曲线的检测来构建关于"种群数量动态变化"实验体系,通过比浊法和稀释平板菌落计数法,加上琼脂凝胶检测辅助,可严谨地保障实验结果的准确性。实验结果表明,重组大肠杆菌DH5α的生长规律符合细菌的生长规律;而大肠杆菌相对于酵母,更加简便和节约时间;对于学生实验来说,可操作性更强。