一种高效率筛选抗菌中药的微量点菌药敏实验新方法

通常检测药物抗菌活性的方法有试管二倍稀释法、牛津杯法、滤纸片法、平板二倍稀释法等,在筛选具有抗菌活性的中药时,均需预先粗提药材的有效部位,并去除萃取溶剂,操作繁琐、耗时长、效率低。自然界中药用植物种类繁多、数量庞大,为了能够快速高通量筛选其中的抗菌药材,本研究建立了一种简便易行的药敏实验方法。实验利用超微粉碎机将15种中药药材粉碎成粒径为5~10μm微粉后,将药粉按一定比例添入M-H琼脂培养基内,经过121℃高压灭菌20 min,制成不同浓度梯度的固体药敏培养基,再在同一个药敏琼脂平板上同时接种9株致病菌;培养24 h后,没有供试菌菌落形成的最低浓度为该中药的最低抑菌浓度（MIC）,此方法称为超微药粉琼脂稀释法。采用该方法测得中药抑菌浓度与同种药材粗提液的滤纸片法和平板二倍稀释法相比,超微药粉琼脂稀释法测得中药的抑菌效果更显著,三种方法检测获得致病菌对各种中药敏感程度的级别基本一致。三种方法的比较结果说明,超微药粉琼脂稀释法的药敏实验结果准确、灵敏度高,而且操作简便、快捷、耗时短,易于判断;并且一个药敏琼脂平板可同时测试多株致病菌,处理量大,效率高。本法可作为一种从天然植物药材中广泛初步筛选具有抗菌活性中药的高效方法,在实验研究中具有很好的实用价值,为抗菌中药开发应用提供基础的参考数据。