免疫清除期慢性乙型肝炎患者外周血T细胞程序性坏死因子-1表达及其意义

目的明确程度性坏死因子(PD-1)在免疫清除期慢性乙型肝炎患者外周血T细胞表达状态及其对患者病毒载量水平和生化指标的影响。方法 45例ALT升高的慢性乙型肝炎患者被纳入本研究。应用流式细胞术对所有患者的外周血总CD8+T细胞和CD4+T细胞PD-1表达百分比和表达强度进行检测,其中18例患者接受肝组织活检,并应用免疫组织化学方法对肝内PD-1配体(PD-L1)表达水平进行检测。结果免疫清除期慢性乙型肝炎患者外周血总CD8+T细胞和CD4+T细胞PD-1表达百分比以及单细胞PD-1表达强度均明显高于健康对照组(P<0.05);外周血总T细胞PD-1表达百分比和单细胞表达强度与患者病毒载量间均无明显相关性;ALT水平与外周血总CD8+T细胞单细胞PD-1表达强度之间有明显正相关性(r=0.338,P=0.02);ALT水平以400IU/L为分界线将患者分为两组,两组病例外周血总CD8+T细胞PD-1单细胞表达强度之间差异有统计学意义(P=0.02),但两组CD4+T细胞PD-1单细胞表达强度之间差异无统计学意义;慢性乙型肝炎患者肝内PD-L1高表达,且与肝脏炎症程度和纤维化程度正相关。结论在免疫清除期慢性乙型肝炎患者T细胞免疫调节中,PD-1单细胞表达强度起着重要作用,而并非由PD-1表达与否或表达百分比决定。PD-1单细胞表达强度与宿主炎症反应强度之间具有正相关性。

反义抑制微小RNA-21对程序性细胞坏死因子4和张力蛋白同源物基因在鳞状细胞癌A431细胞株中表达及细胞凋亡的研究

目的观察转染反义抑制微小RNA-21（miR-21）对A431细胞株中程序性细胞坏死因子4（PDCD4）和磷酸酶和张力蛋白同源物基因（PTEN）表达及细胞凋亡的影响。方法对A431细胞转染反义miR-21（Anti—miR-21），采用免疫细胞化学法检测转染前后A431细胞株中PDCD4和PTEN的表达，采用原位末端转移酶标记（TUNEL）检测转染前后A431细胞株中细胞凋亡。结果细胞组、转染无关序列组和转染miR-21反义寡核苷酸组PDCD4表达平均吸光度（伪）值分别为62340．03±2157．52、55871．36±7281．27和175302．34±14571．90，差异有统计学意义（F=50．12，P〈0．05）；细胞组、转染无关序列组和转染miR．21反义寡核苷酸组PTEN表达伪值分别为19206．26±655．01、19149．26±1058．29和135572．92±4685．05，差异有统计学意义（F=576．54，P〈0．05）；细胞组、转染无关序列组和转染miR-21反义寡核苷酸组凋亡细胞比例分别为9．90％、12．95％和31．63％，差异有统计学意义（F=201．79，P〈0．05）。结论转染Anti-miR-21后A431细胞株中miR．21表达下降，这种抑制可以上调A431细胞株中PDCD4和PTEN的表达，加速肿瘤细胞凋亡。

外周血T细胞表面PD-1在慢性乙型肝炎患者干扰素治疗期间的表达

目的:观察慢性HBV感染(CHB)免疫清除期PD-1的表达状态以及干扰素抗病毒治疗期间T细胞PD-1的表达,明确免疫清除期CHB患者PD-1表达的临床意义.方法:伴有长期ALT反复升高的CHB患者20例被纳入本研究,所有病例均接受为期6mo的Peg干扰素(1.5μg/kg)抗病毒治疗,每周1次.应用流式细胞术对所有患者抗病毒治疗不同时间点(0、12、24wk)的外周血总CD8+T细胞和CD4+T细胞PD-1表达百分比和表达强度进行检测.结果:免疫清除期CHB患者外周血总CD8+T细胞和CD4+T细胞PD-1阳性率和PD-1表达荧光强度均明显高于健康对照组(P<0.05);PEG干扰素治疗早期CD8+T细胞PD-1阳性率呈现明显下降,且CD8+T细胞PD-1表达阳性率同ALT水平和病毒水平均呈现明显正相关(R2=0.22,0.357,P=0.001,0.002).结论:CHB患者外周血T细胞PD-1呈高表达;干扰素治疗诱导的病毒水平下降可导致CD8+T细胞PD-1表达明显下降.

Vasohibin-1、PD-1、SDF-1在结直肠癌患者中的表达及其与临床特征的关系

目的探讨Vasohibin-1、程序性死亡受体1(PD-1)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在结直肠癌患者中的表达及其与临床特征的关系。方法选取200例结直肠癌患者(结直肠癌组)和200例结直肠息肉患者(结直肠息肉组),比较两组患者Vasohibin-1、PD-1、SDF-1的表达情况及其与直肠癌患者临床特征的关系。采用Logistic回归分析法分析影响结直肠癌患者Vasohibin-1、PD-1、SDF-1表达情况的因素。结果结直肠癌组患者的Vasohibin-1、PD-1、SDF-1阳性表达率均明显高于结直肠息肉组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。有淋巴结转移、组织学分型为黏液腺癌、Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径≥5 cm结直肠癌患者的Vasohibin-1、PD-1、SDF-1阳性表达率明显高于无淋巴结转移、组织学分型为管状腺癌、Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径﹤5 cm的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01);不同年龄、性别、肿瘤部位结直肠癌患者的Vasohibin-1、PD-1、SDF-1阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。Logistic回归分析结果表明,淋巴结转移和TNM分期是影响结直肠癌患者Vasohibin-1、PD-1、SDF-1阳性表达的独立因素(P﹤0.05)。结论结直肠癌患者的Vasohibin-1、PD-1、SDF-1阳性表达率较高,且与淋巴结转移和TNM分期密切相关。

慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗后调节性T淋巴细胞及其表面免疫抑制分子的动态变化

目的：了解抗病毒治疗后慢性丙型肝炎（CHC）患者外周血 Treg 比例及其表面程序性坏死因子‐1（PD‐1）和 TGF‐β表达水平的变化。方法2012年10月至2013年10月郑州大学第一附属医院感染科 CHC 患者86例，均经聚乙二醇干扰素α‐2a（Peg IFNα‐2a）联合利巴韦林（RBV）治疗，健康对照组为30名健康体检者。流式细胞仪检测 CHC 患者抗病毒治疗后，获得快速病毒学应答（RVR）、早期病毒学应答（EVR）和治疗结束时病毒学应答（ETVR）、获得持续病毒学应答（SVR）和未获得 SVR 患者外周血 Treg 比例及其表面 PD‐1和 TGF‐β表达水平。统计学处理采用 t 检验。结果86例 CHC 患者抗病毒治疗后获得 RVR 29例，EVR 67例，ETVR 79例；随访24周时获得 SVR 67例。健康对照组Treg 比例为2．18＋0．65，CHC 组为10．31＋5．61，差异有统计学意义（t ＝2．28，P＜0．05）。1b 基因型患者外周血 Treg 比例在基线、获得 RVR 、EVR 和 ETVR 时分别为14．44±3．78、11．01±1．79、8．24±2．98和5．36±1．47；2a 基因型患者外周血 Treg 比例在基线、获得 RVR 、EVR 和 ETVR 时分别为12．34＋2．82、8．99±1．68、7．53±2．96和4．79＋1．23，呈逐渐下降趋势。 Treg 表面 PD‐1和TGF‐β的表达也呈下降趋势。获得 SVR 和未获得 SVR 患者的基线 PD‐1分别为29．11±14．65和37．73±11．65（t＝2．15，P＝0．04）；TGF‐β分别为41．20±18．96和56．75±14．42（t＝2．66，P＜0．01）。治疗结束后随访24周时，PD‐1分别为10．36±4．81和36．46±10．52（t＝13．95，P＜0．01）；TGF‐β分别为10．06±4．64和45．23±17．85（t＝11．85，P ＜0．01）。结论抗病毒治疗后 CHC 患者外周血 Treg 比例及其表面PD‐1和 TGF‐β分子的表达水平均明显下降，动态检测上述指标可预测抗病毒治疗效果。