三阴性乳腺癌中程序性细胞死亡基因4表达及其与预后的关系

目的探讨三阴性乳腺癌中程序性细胞死亡基因4(programmed cell death gene 4,PDCD4)的表达及其与患者预后的关系。方法收集广东省妇幼保健院乳腺科2007年1月至2012年12月间收治的随访资料完整的三阴性乳腺癌患者共176例,均为女性,中位年龄44岁。采用免疫组化方法检测PDCD4的表达;采用Kaplan-meier法对患者的无病生存及总生存情况进行分析,并运用Cox回归法探讨影响三阴性乳腺癌生存预后的因素。结果 176例患者中,PDCD4表达阳性者79例(44.8%),显著低于癌旁组织阳性表达率(90.0%,P=0.005)。PDCD4表达缺失与年龄无关(P>0.05),而与肿瘤直径、淋巴结转移个数及组织学分级相关(P<0.05),肿瘤越大(r=-0.270,P<0.001)、淋巴结转移越多(r=-0.240,P=0.001)、组织学分级越高(r=-0.206,P=0.006),PDCD4阳性表达率越低。中位随访时间42个月,单因素分析显示PDCD4表达阳性者其无病生存率及总生存率均优于表达阴性者(P<0.05)。多因素分析显示PDCD4表达、肿瘤直径及分期是影响三阴性乳腺癌预后的独立因素(P<0.05)。结论三阴性乳腺癌中PDCD4表达缺失与预后不良相关,PDCD4可作为评估三阴性乳腺癌预后的指标。

miR-21和程序性细胞死亡基因4在食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨miR-21和程序性细胞死亡基因4(PDCD4)mRNA在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及意义。方法用荧光定量PCR技术检测76例ESCC组织及其对应的正常食管黏膜组织中的miR-21、PDCD4 mRNA的表达量。结果 ESCC组织中miR-21的表达较正常食管黏膜组织中的表达量升高(P<0.05),PDCD4 mRNA的表达较正常食管黏膜组织中的表达量降低(P<0.05);miR-21、PDCD4 mRNA在ESCC组织中的表达与肿瘤浸润深度、TNM分期及淋巴结转移显著相关(P<0.05),与性别、年龄无关(P>0.05);ESCC中miR-21、PDCD4 mRNA表达呈负相关(rs=-1.131,P=0.004)。结论 miR-21表达升高、PDCD4表达降低在ESCC的发展、侵袭、转移中起一定的作用。

程序性死亡4基因在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:通过测定食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)患者肿瘤组织中程序性死亡4基因(Pdcd4)的表达,探讨Pdcd4与食管鳞癌发生、发展的关系。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测60例食管鳞癌组织中Pdcd4 mRNA的表达情况,同时应用免疫组织化学法检测石蜡包埋的178例食管鳞癌组织中Pdcd4的表达水平,相应的癌旁正常组织作为对照。结果:Pdcd4mRNA在食管鳞癌组织中的表达量显著低于癌旁正常组织(P<0.01)。Pdcd4在癌旁正常组织中的阳性表达率为100.0%,明显高于食管鳞癌组织中的47.2%(P<0.01)。Pdcd4的表达与肿瘤的分化程度有关,在高分化食管鳞癌的阳性率为71.4%,中分化食管鳞癌的阳性率为43.4%,低分化食管鳞癌的阳性率为30.2%,高分化鳞癌中Pdcd4阳性率高于中分化及低分化癌(P<0.01);中、低分化食管鳞癌中Pdcd4阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);Pdcd4阳性率在患者的年龄、肿瘤大小、TNM分期和N分期间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:Pdcd4异常表达与食管鳞癌的组织病理分级有关。

PDCD4基因在胶质瘤细胞系的稳定表达及其对肿瘤细胞生长的影响

目的:建立稳定表达程序性死亡4基因(programmed cell death4,PDCD4)的人神经胶质瘤U251细胞系,观察PDCD4基因对人神经胶质瘤细胞增殖及细胞周期的影响。方法:将构建好的携带PDCD4重组真核表达载体pEGFP-PDCD4转染U251细胞,经过G418筛选获得稳定细胞系;用RT-PCR及Western blotting检测PDCD4mRNA和蛋白的表达情况,通过锥虫蓝染色活细胞计数法及克隆形成实验检测外源PDCD4转染对细胞增殖和克隆形成能力的影响,以流式细胞术检测细胞周期。结果:成功建立稳定表达PDCD4的胶质瘤细胞U251-PDCD4。未转染的U251及空载体转染的U251细胞均不表达PDCD4,而pEGFP-PDCD4转染的U251-PDCD4细胞表达高水平的PDCD4mRNA和蛋白质;转染PDCD4基因的细胞生长速度明显减慢(P<0.01)、克隆形成率明显降低(P<0.01);细胞周期检测显示,转染PDCD4的细胞较其他两对照组细胞S期升高、G2/M期明显降低(P<0.05)。结论:PDCD4通过干扰细胞周期明显抑制胶质瘤U251细胞的细胞增殖及克隆形成能力。

PDCD4对DAP5表达及大肠癌细胞凋亡的影响

目的探讨程序性死亡基因4(PDCD4)对死亡相关蛋白5(DAP5)的表达及对人大肠癌细胞系LOVO凋亡的影响。方法构建重组真核表达载体pFLAG/PDCD4,转染人大肠癌细胞LOVO,G418(500mg/L)筛选获得稳定表达PDCD4的细胞系。RT-PCR及Western blotting检测LOVO细胞中PDCD4的mRNA及蛋白表达,流式细胞仪检测LOVO细胞凋亡情况,Western blotting检测LOVO细胞DAP5表达的变化。结果成功建立稳定表达PDCD4的大肠癌细胞LOVO-pFLAG/PDCD4。转染PDCD4的LOVO-pFLAG/PDCD4组与空白对照LOVO组、转染空载质粒的LOVO-pFLAG组相比,PDCD4蛋白表达和mRNA水平明显升高(P<0.01);细胞凋亡率明显增加(P<0.01);同时伴有DAP5蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论 PDCD4能够诱导大肠癌细胞LOVO的凋亡,其机制可能与上调DAP5的表达有关。

miRNA-132通过靶向PDCD4在多发性骨髓瘤细胞黏附介导的耐药性中的作用

目的探讨miR-132对程序性死亡4基因(PDCD4)的靶向作用,及其在多发性骨髓瘤细胞黏附介导的耐药性中的作用。方法利用荧光素酶报告基因分析miR-132对PDCD4的靶向调控关系。对人骨髓瘤细胞株U266进行miR模拟物和抑制物转染,之后比较地塞米松(Dex)、多柔比星(Dox)、硼替佐米(Bort)处理下U266细胞的药物敏感性。Transwell法检测U266细胞的迁移能力。MTT法和CCK-8法检测细胞增殖活性。结果Dex和Dox干预后细胞的抑制率显著上升(P<0.05),而Bort干预后细胞的抑制率无显著变化(P>0.05)。荧光素酶报告基因分析结果证实PDCD4是miR-132的靶基因。上调miR-132可以抑制PDCD4基因和和蛋白的表达(P<0.05)。miR-132上调后U266细胞的迁移距离显著增加(P<0.05)。miR-132上调后U266细胞的黏附率和增殖活性显著增加(P<0.05)。结论miR-132可以靶向PDCD4调控多发性骨髓瘤细胞黏附介导的耐药性。

食管鳞状细胞癌组织中miR-21、PDCD4表达变化及意义

目的观察食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)组织中微小RNA-21(miR-21)、程序性细胞死亡基因4(PDCD4)表达变化,并探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR技术检测93例份食管鳞癌组织及癌旁组织中miR-21、PDCD4 mRNA表达,并以表达的平均值为界限,分别将食管鳞癌患者分为miR-21高表达组、miR-21低表达组及PDCD4 mRNA高表达组、PDCD4 mRNA低表达组。Spearman相关分析miR-21与PDCD4 mRNA表达的关系;Kaplan-Meier生存模型和Log-Rank检验分析miR-21、PDCD4表达对患者预后的影响。结果 miR-21在食管鳞癌组织中的相对表达量高于癌旁组织,PDCD4在食管鳞癌组织中的mRNA相对表达量低于癌旁组织,比较差异有统计学意义(P均<0.05)。经Spearman相关分析结果显示,食管鳞癌组织中miR-21与PDCD4的表达呈负相关(r=-0.883,P=0.000)。miR-21高表达组5年生存率低于miR-21低表达组(χ2=4.720,P=0.030),生存时间短于miR-21低表达组(P=0.029)。PDCD4 mRNA高表达组5年生存率高于PDCD4 mRNA低表达组(χ2=7.871,P=0.005),术后生存时间长于PDCD4 mRNA低表达组(P=0.006)。结论 miR-21在食管鳞癌组织中呈高表达、PDCD4呈低表达;二者可能参与食管鳞癌的发生发展,并影响患者预后。

甲状腺乳头状癌超声弹性成像特征及其与实验室检测指标的相关性

目的分析甲状腺乳头状癌(PTC)超声弹性成像特征,探讨弹性评分和应变率比值(SR)与程序性细胞死亡基因4(PDCD4)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、Xklp2靶蛋白(TPX2)表达的相关性。方法86例甲状腺结节患者根据病理结果分为PTC组49例(49个结节)和良性肿瘤组37例(37个结节),均行超声弹性成像获得弹性评分和SR,比较两组差异;分析PTC患者弹性评分、SR与PDCD4、EGCG、TPX2的相关性。结果PTC组弹性评分、SR均高于良性肿瘤组(均P<0.05)。PTC组PDCD4、EGCG表达均低于良性肿瘤组,TPX2表达高于良性肿瘤组(均P<0.05)。PTC患者弹性评分、SR与PDCD4、EGCG表达均呈负相关,与TPX2表达均呈正相关(均P<0.05)。结论PTC的弹性评分和SR与甲状腺良性肿瘤有显著差异;PTC弹性评分、SR与PDCD4、EGCG、TPX2的表达均相关。

PDCD4和凋亡抑制因子Livin在TNBC组织中的表达及与预后的相关性研究

目的观察和分析程序性细胞死亡基因4(PDCD4)和凋亡抑制因子Livin在三阴性乳腺癌(TNBC)组织中的表达及与预后的相关性。方法选取100例TNBC肿瘤组织,50例癌旁组织,50例正常乳腺组织作为研究资料,应用免疫组织化学法对3种组织中的PDCD4、Livin蛋白的表达阳性率进行检测和比较,对纳入患者进行随访,对其总生存期(OS)和无病生存期(DFS)进行观察和比较。结果 TNBC组织中PDCD4表达阳性率显著低于癌旁组织或正常乳腺组织,比较差异均有统计学意义(χ~2=26.613、32.000,P<0.05),其表达情况与肿瘤直径、淋巴结转移数量、临床分期、腋下淋巴结转移、脉管癌栓等临床病理特征有关(χ~2=26.936、13.210、22.774、27.463、5.803,P<0.05);Livin蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织或正常乳腺组织,癌旁组织中的Livin蛋白表达阳性率显著高于正常乳腺组织,差异均有统计学意义(χ~2=14.614、57.353、19.048,P<0.05),其表达情况与淋巴结转移数量、临床分期、腋下淋巴结转移、脉管癌栓等临床病理特征有关(χ~2=10.788、6.160、27.350、8.914,P<0.05);PDCD4表达阴性患者的OS、DFS显著低于PDCD4表达阳性患者,Livin蛋白表达阳性患者的OS、DFS显著低于Livin表达阴性患者,比较差异均有统计学意义(χ~2=23.931、19.163、22.649、17.213,P<0.05),TNBC患者的OS与年龄(RR=1.405)、临床分期(RR=2.897)、肿瘤直径(RR=2.722)、腋下淋巴结转移(RR=2.516)、脉管癌栓(RR=3.020)、PDCD4表达(RR=1.752)、Livin表达(RR=2.051)等因素均具有相关性(P<0.05),患者的DFS与临床分期(RR=2.756)、腋下淋巴结转移(RR=2.437)、PDCD4表达(RR=1.649)、Livin表达(RR=1.804)等因素均具有相关性(P<0.05)。结论 TNBC组织中存在PDCD4的低表达和Livin蛋白的过表达,而且其异常表达情况与肿瘤的临床病理特征和患者的预后具有相关性,可作为评价TNBC病情进展和预后的辅助指标。

miR-21介导的结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶的耐药机制研究

目的通过检测microRNA-21（miR-21）及其靶基因程序性细胞死亡因子4（programmedcelldeath4，PDCj）4）基因在结肠癌细胞中对下游通路的调控，研究高表达的miR-21在结肠癌细胞中对5-氟尿嘧啶（5-fuorouracil，5-FU）耐药的可能机制。方法MTT法检测5-FU处理后miR-21敲除或PDCD4高表达对RKO细胞存活率的影响；流式细胞术检测5-FU处理后RKO-敲除型与RKO-野生型细胞凋亡；定量PCR检测miR-21敲除后以及PDCD4高表达后RKO细胞中ABCC5及CD44mRNA水平的变化。结果5-FU对RKO-野生型的半抑制浓度（IC50）值（52．28±0．05）μmol／L比RKO-敲除型的ICso值（32．13±0．05）μmol／L高67％，同时miR-21敲除后细胞凋亡率显著增加；PDCD4在RKO-敲除型细胞中显著高表达，并且高表达的PDCD4能够负调控转运蛋白ABCC5及干细胞表面标记CD44。结论miR-21很可能通过抑制靶基因PDCD4调控转运蛋白ABCC5及干细胞表面标记CD44的表达，从而增强RKO细胞对5-FU的耐药性。