过表达程序性细胞死亡基因5提高脑神经胶质瘤细胞对替莫唑胺的化疗敏感性

目的:探讨抑癌基因程序性细胞死亡基因5(programmed cell death 5 gene, PDCD5)对脑神经胶质瘤细胞增殖及替莫唑胺(temozolomide,TMZ)化疗敏感性的影响。方法:收集吉林大学第一临床医院神经外科2009年1月至2014年12月间收治的脑神经胶质瘤患者116例。分别利用q PCR、WB及免疫组化方法检测神经胶质瘤细胞系U87、U251、稳定克隆U87-PDCD5细胞、转染si-PDCD5后的脑胶质瘤细胞以及原发性神经胶质瘤组织中PDCD5 mRNA及蛋白质的表达情况。MTT法检测过表达或敲降PDCD5对胶质瘤细胞生长及TMZ化疗敏感性的影响。建立脑胶质瘤细胞系U87裸鼠皮下荷瘤模型,随机分为对照组、TMZ组、PDCD5组和TMZ+外源性PDCD5重组表达载体联合组,治疗20 d后断颈处死动物,切取瘤组织,测量瘤体积并称瘤质量。采用q PCR、WB法检测移植瘤组织中PDCD5的表达水平,分析PDCD5联合TMZ治疗对脑神经胶质瘤生长的影响。结果:PDCD5 mRNA和蛋白在U87细胞中的相对表达量明显低于在U251细胞中的相对表达量(均P<0.05);在高级别脑神经胶质瘤组织中,PDCD5 m RNA和蛋白的表达明显低于低级别组织(均P<0.05);U87-PDCD5和U251细胞对TMZ的敏感性均高于U87细胞(均P<0.05),U87-PDCD5-siRNA、U251-siRNA组细胞对TMZ的敏感性均明显低于对照组(均P<0.05)。比较裸鼠移植瘤的瘤体积和质量,对照组>TMZ组>PDCD5组>联合组(均P<0.05);各组移植瘤组织内PDCD5 mRNA及蛋白的表达水平趋势与之相反(均P<0.05)。结论:PDCD5过表达可增强脑神经胶质瘤细胞对TMZ的化疗敏感性,而沉默PDCD5表达作用则相反,PDCD5与TMZ联合应用可更好地抑制脑神经胶质瘤裸鼠移植瘤的生长。

MSCT检查联合凋亡相关基因PDCD5检测对肺癌的诊断价值

目的探讨多层螺旋CT(MSCT)检查联合凋亡相关基因程序性细胞死亡分子5(PDCD5)检测对肺癌的诊断价值。方法选取本院收治的119例肺癌患者作为观察组,选取同期肺部良性病变患者100例作为对照组。对所有受试者均行MSCT扫描,并检测血清中凋亡相关基因PDCD5的表达,同时分析肺癌患者PDCD5表达与MSCT征象之间的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析两者单独诊断及联合诊断肺癌的诊断效能。结果观察组血清PDCD5表达显著高于对照组,组间差异具有统计学意义(P<0.05);肺癌患者在肿瘤大小、空泡征、分叶征、实性结节、支气管截断征、胸膜凹陷征、胸腔积液的血清PDCD5表达比较,组间差异无统计学意义(P>0.05);而肺癌患者在淋巴结转移的血清PDCD5表达比较,组间差异具有统计学意义(P<0.05);Pearson检验发现肺癌患者血清中凋亡相关基因PDCD5的含量与淋巴结转移呈负相关(r=-0.462,P<0.05);ROC曲线显示,血清凋亡相关基因PDCD5与MSCT扫描诊断评估肺癌的AUC分别为0.768、0.803,而两者联合诊断时AUC为0.911,此时敏感度、特异度及准确率最高分别为84.51%、79.17%及82.35%。结论MSCT扫描联合凋亡相关基因PDCD5检测在肺癌诊断过程中,其特异度、敏感度及准确率较高,可为肺癌的诊断与治疗提供确切指导。

转染PDCD5基因促进顺铂诱导前列腺癌细胞的凋亡作用

目的探讨过表达细胞程序性死亡基因5(PDCD5)对顺铂诱导人前列腺癌DU145细胞凋亡以及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法 CCK-8法检测顺铂处理DU145细胞后对细胞生长增殖的影响;构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞系;Annexin V-FITC﹠PI双染法检测细胞的凋亡率、电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果顺铂对DU145细胞的生长有抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;成功构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞;流式细胞术和电子显微镜都显示PDCD5联合顺铂(25μmol/L)促进细胞的凋亡作用比联合顺铂(10μmol/L)和单独使用顺铂明显,Western blot结果显示,顺铂联合PDCD5能明显降低Bcl-2的表达,而Bax的表达变化不明显。结论单独PDCD5过表达不引起DU145细胞的凋亡,但PDCD5能显著增强顺铂诱导DU145细胞凋亡的作用,其机制之一是通过降低Bcl-2/Bax的表达比率实现的。

N-乙酰半胱氨酸对过度训练大鼠心肌细胞凋亡基因程序性细胞死亡5基因表达的影响

目的观察N±乙酰半胱氨酸（NAC）对过度训练大鼠心肌细胞凋亡基因程序性细胞死亡5基因（PDCD5）表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠36只随机分为3组：对照组（c组，n=12）、过度训练组（O组，n=12）和过度训练＋NAC干预组（N组，n=12）。通过7周反复力竭性游泳训练建立动物模型。分组处理后采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测心肌细胞PDCD5mRNA表达；Westemblot检测心肌细胞胞质中细胞色素C（CyclinC）的蛋白表达；酶联免疫法测定血清心肌肌钙蛋白I（TNNI3）含量。结果与c组比较，O组心肌PDCD5mRNA、胞质CyclinC蛋白表达及血清TNNI3水平明显升高[PDCD5：2．297±0．098比1．060±0．065；CyclinC：0．485±0．161比0．327±0．120；TNNI3：（198．107±12．060）ng／L比（84．854±11．574）ng／L]，差异有统计学意义（P〈0．01）；经NAC干预后，与O组比较，N组心肌PDCD5mRNA、胞质CyclinC蛋白表达及血清TNNI3水平明显下降jPDCD5mRNA：1．739±0．065比2．297±0．098；CyclinC：0．381±0．326比0．485±0．161；TNNI3：（128．265±11．489）ng／L比（198．107±12．060）．g／L]，差异有统计学意义（P〈0．01）；但仍高于C组[PDCD5：1．060±0．065；Cyclin C：0．327±0．120；TNNI3：（84．854±11．574）ng／L]，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NAC能够下调力竭性游泳应激后大鼠心肌细胞PDCD5mRNA的表达，抑制CyclinC从线粒体向胞质释放，从而达到对心肌的保护作用。

凋亡基因程序性死亡5基因在大鼠心肌梗死后表达的变化

目的观察大鼠在心肌梗死后凋亡基因程序性死亡5基因（PDCD5）表达的变化。方法将雄性Wistar大鼠140只随机分为心肌梗死组（n=70）和对照组（n=70）。心肌梗死组在经口气管插管术后开胸，结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死模型；对照组经口气管插管术后开胸，暴露前降支，缝线穿过前降支下方但不结。在心肌梗死后1、2、3、4、6、12和24h时处死大鼠，每组10只。采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）法检测大鼠心脏非梗死区心肌中凋亡基因PDCD5mRNA的表达。结果心肌梗死后心肌梗死组非梗死区心肌中凋亡基因PDCD5mRNA的表达明显高于对照组（P〈0．05），分别为1h（1．23±0．17比0．17±0．08）、2h（1．76±0．27比0．16±0．07）、3h（1．84±0．35比0．12±0．09）、4h（1．79±0．20比0．14±0．05）、6h（1．35±0．18比0．11±0．07）、12h（1．08±0．25比0．12±0．04）和24h（1．13±0．16比0．08±0．02）；心肌梗死组非梗死区心肌中凋亡基因PDCD5mRNA的表达2h高于1h（P〈0．05），2、3、4h无明显变化（P〉0．05），6h低于4h（P〈0．05），12h低于6h（P〈0．05），但与24h比较差异无统计学意义（P〉0．05）。对照组没有上述变化规律，组内各时间点分组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论大鼠心肌梗死后非梗死区心肌凋亡基因PDCD5mRNA的表达逐渐升高，在第2～4h达到高峰，然后逐渐下降，于心肌硬死后12h后趋于平稳。

程序性细胞死亡5基因在胆道闭锁患儿胆管组织中的表达及意义

目的 观察促凋亡基因程序性细胞死亡5基因（PDCD5）在胆道闭锁（BA）及胆总管囊肿（CC）患儿胆管组织中的表达,探讨促凋亡基因PDCD5在BA发病机制中的作用.方法 分别取18例BA和11例CC患儿的胆管组织,应用Westem blot与荧光实时定量聚合酶链反应（FQPCR）方法分别检测PDCD5在BA与CC患儿胆管组织中的表达,对其表达进行定位和定量分析.结果 PDCD5在CC组胆管组织中的Ct值为（6.7292±1.1690）,高于BA组的相应CT值（4.012 5±1.073 5,P＜0.05）.应用2-△△CT计算出CC与BA中PDCD5基因表达量的比值为1.00∶6.57.PDCD5在BA组胆管组织中mRNA转录水平明显高于对照组;Western blot结果显示,PDCD5在BA组胆管组织中蛋白表达量明显高于CC组.结论 PDCD5在BA患儿胆管组织中的蛋白和基因水平表达均增强.PDCD5可能参与BA的胆管上皮细胞的凋亡,从而参与BA的炎性反应.