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哺乳动物细胞表面展示人源HIV特异性全长抗体库的构建
被引量:
1
1
作者
周烨
李长征
+7 位作者
陈振瑞
贺微
杨于军
刘叔文
吴曙光
马丽英
姜世勃
周辰
《中国医药指南》
2011年第21期5-7,共3页
目的构建人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库。方法提取HIV患者外周血淋巴细胞的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区(VH)基因,插入哺乳动物细胞表达载体pDGB4,转化感受态大肠杆菌TOPO-10,...
目的构建人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库。方法提取HIV患者外周血淋巴细胞的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区(VH)基因,插入哺乳动物细胞表达载体pDGB4,转化感受态大肠杆菌TOPO-10,构建抗体基因库,随后将抗体库的质粒DNA稳定转染FCHO细胞,获得可稳定展示全长抗体的细胞库,用流式细胞仪分析全长抗体在FCHO细胞表面的表达。结果本研究以少量外周血淋巴细胞RNA为来源,构建了库容量为7.77×104的全长抗体基因库;将基因库的质粒DNA稳定转染FCHO细胞后,获得了可稳定展示全长抗体的细胞库;经流式细胞仪分析,有67%的细胞表面可表达可被检测到的全长抗体。结论本研究构建了人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库,为治疗HIV感染的特异性抗体的筛选打下了基础。
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关键词
哺乳动物细胞表面
展示
全长抗体库
人源抗体
稳定展示
下载PDF
职称材料
题名
哺乳动物细胞表面展示人源HIV特异性全长抗体库的构建
被引量:
1
1
作者
周烨
李长征
陈振瑞
贺微
杨于军
刘叔文
吴曙光
马丽英
姜世勃
周辰
机构
南方医科大学基因工程研究所
南方医科大学中医药学院
南方医科大学南方医院
南方医科大学药学院
香港Dgen生物技术有限公司
中国疾控中心性病艾滋病中心
复旦大学上海医学院分子病毒学教育部/卫生部重点实验室
出处
《中国医药指南》
2011年第21期5-7,共3页
基金
Dgen Biotech Ltd科研基金(DGB12012008)
文摘
目的构建人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库。方法提取HIV患者外周血淋巴细胞的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区(VH)基因,插入哺乳动物细胞表达载体pDGB4,转化感受态大肠杆菌TOPO-10,构建抗体基因库,随后将抗体库的质粒DNA稳定转染FCHO细胞,获得可稳定展示全长抗体的细胞库,用流式细胞仪分析全长抗体在FCHO细胞表面的表达。结果本研究以少量外周血淋巴细胞RNA为来源,构建了库容量为7.77×104的全长抗体基因库;将基因库的质粒DNA稳定转染FCHO细胞后,获得了可稳定展示全长抗体的细胞库;经流式细胞仪分析,有67%的细胞表面可表达可被检测到的全长抗体。结论本研究构建了人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库,为治疗HIV感染的特异性抗体的筛选打下了基础。
关键词
哺乳动物细胞表面
展示
全长抗体库
人源抗体
稳定展示
Keywords
Mammalian cell surface display
Full-length antibody library
Human antibody
Stable display
分类号
R512.91 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
哺乳动物细胞表面展示人源HIV特异性全长抗体库的构建
周烨
李长征
陈振瑞
贺微
杨于军
刘叔文
吴曙光
马丽英
姜世勃
周辰
《中国医药指南》
2011
1
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