稳定性同位素^(13)C标记小麦植株δ^(13)C值的检测方法研究

为准确检测稳定性同位素13C标记的小麦植株δ13C值,对元素分析仪-同位素比质谱仪联用技术(EA-IRMS)测定13C标记的小麦植株各器官中δ13C值进行了研究。结果表明,该方法对蔗糖标准物质(IAEA-CH-6)、小麦粉标准物质(OAS/Isotope)和13C标记小麦植株样品测定结果的精度良好,稳定性碳同位素的标准偏差小于0.11‰。对仪器的稳定性进行了测试,标准偏差为0.02‰;同位素信号在1e-9至1e-8A范围内,总体线性为0.003‰·n A-1。测得样品δ13C值的范围为-25.25%~23.32%。试验结果为研究光合产物在小麦植株体内的运转分配提供了可靠的技术支撑。

稳定同位素标记核酸法在非培养微生物代谢功能研究中的应用

基于核糖体RNA(rRNA)序列分析的系统发育信息是研究微生物代谢功能的可靠指标之一。复杂环境样本中的微生物利用了稳定同位素标记的营养物后,分离其核酸进行序列分析或检测其核酸中同位素的丰度变化,就可以不必培养分离微生物而揭示出它们的代谢功能。

稳定性同位素氘标记特罗类试剂的合成及其在分析检测中的应用进展

特罗类试剂(β-受体激动剂)是动物饲养过程中禁止使用的添加剂。概述了特罗类试剂的检测现状和稳定性同位素氘标记特罗类试剂的合成,重点阐述了稳定性同位素氘标记特罗类试剂在分析检测中的应用情况。国产化稳定性同位素标记试剂越来越多地进入市场,有助于我国食品安全体系的建设,将为人体健康保驾护航。

核酸工具酶辅助的金属稳定同位素标记方法在生物分析中的应用

主要概述了近年来核酸工具酶辅助的基于金属稳定同位素标记的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法在生物分析中的发展和应用,简要介绍了该方法在蛋白质、核酸及一些生物小分子检测中的应用。最后对核酸工具酶辅助的基于金属稳定同位素标记的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)检测方法的发展前景作了展望。

放射性同位素标记核酸探针的方法

介绍放射性同位素标记核酸的方法，包括缺口平移法标记ＤＮＡ、引物延伸法标记ＤＮＡ、聚合酶法标记ＲＮＡ、Ｔ４多核苷酸激酶标记ＤＮＡ或ＲＮＡ的５′－末端、末端脱氧核苷酸基转移酶标记ＤＮＡ的３′－末端、ＤＮＡ聚合酶ⅠＫｌｅｎｏｗ片段标记ＤＮＡ的３′－末端、Ｔ４ＤＮＡ聚合酶标记ＤＮＡ的３′－末端、标记寡核苷酸。

同位素标记核酸探针技术在法医学中的应用

核酸分子杂交法是当今分子生物学研究中应用最广泛的一项技术。其基本原理是利用放射性同位素标记的核酸探针,与固定在硝酸纤维素膜或尼龙膜上的单链核酸中的同源序列进行杂交。通过放射自显影,即可在X 光片上看到特定的核酸片段,利用该法对DNA

稳定同位素标记化合物二氢吡啶-^13C4的合成与表征

目的建立稳定性同位素标记的化合物二氢吡啶-^13C4(二乙基-1,4-二氢-2,6-二甲基-3,5-吡啶二羧酸酯-^13C4)的合成方法。方法以同位素标记的乙酰乙酸乙酯-1,3-^13C2为原料,经Hantzsch反应合成得到稳定性同位素标记的化合物二氢吡啶-^13C4(二乙基-1,4-二氢-2,6-二甲基-3,5-吡啶二羧酸酯-^13C4),并对其结构经1HNMR、^13CNMR和MS(ESI)进行表征。结果所合成的目标产品,化学纯度大于99.0%, ^13C丰度为99.4%(atom ^13C)。结论该化合物可作为食品安全领域检测用同位素内标试剂,具有重要的应用价值。

应用气-质联机和同位素双标记技术对土壤微生物吸收有机氮的研究

土壤微生物对小分子有机氮的直接吸收和利用是目前微生物氮素营养研究的新方向。本研究通过气相色谱-质谱(GC-MS)对双标记氨基酸(^(13)C,^(15)N)的测定技术探讨土壤微生物对有机氮分子的直接吸收和利用。结果表明:加入土壤中的甘氨酸被微生物迅速利用,半衰期为2.9h。培养4h后在微生物体内检测到最大量的双标记甘氨酸(相当于甘氨酸加入量的10%),说明甘氨酸可以被微生物以完整分子形式所吸收。通过此手段也可检测到土壤溶液和微生物体内的单标记a-酮酸(双标记甘氨酸分解后的产物),但含量极少,说明加入的甘氨酸主要向微生物提供C源供其生命活动。本研究证明专性化合物同位素双标记手段结合氯仿熏蒸技术是检测微生物吸收小分子有机氮的有效手段。

2017第四届全国稳定同位素制备与应用技术交流会

主办单位：中国核学会同位素分会国家同位素工程技术研究中心上海稳定性同位素工程技术中心大会背景：同位素技术的进步在国民经济的发展中发挥着越来越重要的作用。随着科学技术水平的提高,科学工作者对同位素的研究和应用已取得了令人瞩目的成就。迄今为止,同位素技术已经广泛应用在工业、医学、农业及地质考古等领域。

^(125)I标记Ki67多肽核酸影响肾癌细胞增殖及凋亡的实验研究

目的 观察1 2 5I标记肿瘤增殖基因Ki6 7多肽核酸 (PNAs)对人肾癌细胞生长及凋亡的影响。方法 人工合成Ki6 7基因PNAs ,氯胺T法1 2 5I标记PNAs,脂质体包裹后转导肾癌 786 0细胞系。采用免疫组织化学、Westernblot技术检测Ki6 7表达 ,绘制细胞生长曲线 ,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测肾癌细胞增殖 ,以免疫组织化学原位末端标记法 (TUNEL)法检测肾癌细胞凋亡。以PNAs作对照。结果 2 5 9MBq L1 2 5I PNAs组肾癌细胞Ki6 7表达阳性率 [(16 1± 0 7) % ]降低 ,Ki6 7蛋白量 [(35 8± 3 6 ) % ]降低 ,与PNAs组 [(2 8 6± 0 4 ) %、(81 9± 3 2 ) % ]比较差异有显著性 (P均 <0 0 1)。细胞增殖抑制率 2 5 9MBq L1 2 5I PNAs组 [(6 0 9± 7 1) % ]与PNAs组 [(2 6 6± 3 2 ) % ]比较差异有显著性 (P <0 0 1)。凋亡细胞阳性率 2 5 9MBq L1 2 5I PNAs组 [(34 6± 1 3) % ]与PNAs组 [(16 5±1 0 ) % ]比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 1 2 5I PNAs能增强PNAs阻抑肾癌细胞Ki6 7基因表达 ,抑制增殖 ,促进凋亡作用。

稳定性同位素核酸探针技术DNA-SIP原理与应用

稳定性同位素核酸探针技术DNA-SIP(Stable isotope probing),是将复杂环境中微生物物种组成及其生理功能耦合分析的有力工具。微生物的体积在μm尺度,因此,自然环境中微生物群落在μm尺度下生理过程的发生、发展,其新陈代谢物质在环境中累积与消减的动力学变化规律,形成了微生物生理生态过程,决定了不同尺度下生态系统物质和能量的良性循环。利用稳定性同位素示踪复杂环境中微生物基因组DNA,实现了单一微生物生理过程研究向微生物群落生理生态研究的转变,能在更高更复杂的整体水平上定向发掘重要微生物资源,推动微生物生理生态学和生物技术开发应用。本文重点探讨了DNA-SIP的技术原理、主要技术瓶颈及对策,初步展望了DNA-SIP为基础的环境微生物基因组学发展趋势。

提高非放射性标记核酸分子杂交敏感性的研讨

提高非放射性标记核酸分子杂交敏感性的研讨王伯云，彭玮丹，吴人亮，李玉松（西安第四军医大学病理学教研室，西安７１００３２）非同位素标记核酸探针应用于分子杂交技术，已受到重视，正在生物学和医学领域推广，在临床检测中已用于一些疾病的诊断，称多基因诊断。分子...

酶标记核酸探针的应用前景

基因探针已逐渐运用于传染病的诊断、流行病学调查、肿瘤学研究、食品检验、人类各种遗传病诊断等。目前使用的基因探针有同位素标记探针和生物标记探针。同位素探针多半使用高度活性放射性同位素标记的多核苷酸探针,以及放射自显影的检测方法,其灵敏度为0.5～5pg的靶DNA;但由于同位素半衰期短、易扩散、操作者个人安全和同位素废物处理等问题,以及检测时间长,不适于临床检测和基层推广使用。而生物素标记核酸探针虽有着放射性物质标记探针可不相比的优点,但生物素标记的核酸探针不论长短。

2015全国同位素制备及应用技术交流研讨会在青岛召开

随着科技水平不断提高,同位素技术已广泛应用于工业、医学、农业及地质考古等领域,在国民经济发展中发挥着日益重要的作用。为了总结近两年同位素制备和应用方面的新进展,中国核学会同位素分会、国家同位素工程技术研究中心、上海稳定性同位素工程技术中心在青岛联合主办＂2015全国同位素制备及应用交流研讨会＂,旨在通过开展同位素技术交流，了解国内外同位素研究领域的最新进展及发展趋势，促进我国同位素技术进步和科研成果的转化，并通过加快推进同位素行业产、学、研一体化，带动整个行业的创新和可持续发展。

地高辛标记核酸探针的应用

本工作中以肿瘤多药耐受基因ＭＤＲ－１的ｃＤＮＡ的限制片段（５Ａ）为模板ＤＮＡ，把模板ＤＮＡ用随机引物法标记上地高辛标记的脱氧尿苷三磷酸ＤＩＧ－ｄＵＴＰ。将此地高辛标记的核酸探针与变性的同源质粒及部分头颈肿瘤组织ＲＮＡ进行点杂交后，用抗地高辛－碱性磷酸酶及其底物进行酶联免疫分析，探讨了应用这种非放射性地高辛标记的ＤＮＡ探针及其检测系统的敏感性以及应用价值。

^(13)C标记磷脂脂肪酸分析在土壤微生物生态研究中的应用

磷脂脂肪酸(PLFA)是微生物细胞膜的重要组成成分,不同微生物群落可通过不同生化途径合成不同的PLFA,因此可选择某些PLFA作为微生物群落结构变化的生物标志物。PLFA与稳定性同位素^(13)C标记(^(13)C-PLFA)技术结合,不仅能够确定原位土壤环境中微生物群落组成,而且能够定向发掘土壤生态系统中参与碳源代谢过程的微生物群落,提供复杂群落中土壤微生物相互作用的信息,具有广阔的应用前景。其基本原理为:将富集^(13)C稳定同位素的基质加入土壤中,土壤中的某些微生物群落利用基质^(13)C合成PLFA,提取并纯化土壤微生物的PLFA,利用气相色谱-燃烧-同位素比例质谱(GC-C-IRMS)测定其^(13)C丰度,通过对比分析,从而获取微生物群落组成与其功能的直接信息。本文在介绍了^(13)C-PLFA原理的基础上,综述了该技术在光合同化碳的根际微生物利用、土壤有机质分解的激发效应、甲烷氧化、有机污染物降解、外源简单碳源和外源复杂碳源的微生物利用等方面的应用,对此项技术的优缺点进行了分析并展望了其未来应用。

介绍一种非放射性标记的原位杂交新方法

在病理诊断和科研工作中，原位杂交是一种常用的检测技术。原位杂交组织化学方法是将核酸分子杂交技术与组织细胞原位显示某种特定ＤＮＡｍＲＮＡ及其产物的定性定量及变化规律相结合的一种新技术。目前，在检测特异ｍＲＮＡ的原位杂交组织细胞化学中多采用同位素标记的探...

核酸疫苗药代动力学的研究进展

核酸疫苗的药代动力学特性不同于通常的小分子药物 ,也不同于大分子的蛋白多肽类生物技术药物 ,因此 ,利用分子生物学技术建立核酸疫苗药代动力学研究方法学 ,对于其顺利进入临床试验 ,进而投入临床应用有着重要的意义。本文综述了核酸疫苗在机体内的生物分布特点、研究方法学、现存方法的局限性及安全性方面的研究进展。

地高辛素标记的探针快速检测HBV-DNA实验研究

应用核酸分子杂交技术,检测血清中HBV-DNA已成为诊断乙型肝炎病毒感染和判断其复制状态的重要手段。用同位素(32P)标记核酸探针,进行分子杂交,虽然灵敏度高,但是由于具有半衰期短、探针不稳定、价格昂贵、对人体有害等因素,使之推广应用受到限制。目前国内外已有地高辛素（Dig）标记HBV-DNA探针进行斑点杂交实验,敏感性接近同位素探针水平。我们参照BM公司试剂盒方法及有关文献,建立Dig标记HBV基因探针方法。

核酸探针杂交技术及其在口腔厌氧菌检测中的应用

口腔厌氧菌是导致牙周尖、根尖周炎等口腔感染性疾病的主要病原菌,其种类众多。传统的病原微生物学检测方法一般依据细菌的形态、生理生化特征及免疫血清学分型,不但费时费力,而且准确性差。随着分子生物学的不断发展,核梭探针杂交技术应用于口腔病原菌的检测和研究,从分子水平鉴定细菌,具有快速、简便、特异性强、敏感度高等优点。本文就核酸探针杂交技术原理,探针种类及其在口腔厌氧菌研究中应用的新进展作一综述。 一、原理 核酸探针杂交技术是根据两条单链DNA(或DNA与RNA)中互补碱基序列能专一配对的原理进行的。在一定条件下,双链DNA变性成单链。