稳定自然杀伤T细胞相关的哮喘发病机制及iNKT细胞为靶向的哮喘治疗进展

稳定自然杀伤T细胞(iNKT)同时具备NK细胞受体和T细胞受体,对保守进化的抗原提呈细胞CD1d有限制作用,且具备产生Th1-和Th2-细胞因子的突出能力,已经被证明在哮喘等过敏性气道炎症的病理变化中起重要作用。研究iNKT细胞在过敏性哮喘机制中的作用及以iNKT细胞为靶向的哮喘治疗进展对进一步研究过敏性哮喘具有积极意义。

结外自然杀伤/T细胞淋巴瘤的治疗研究进展

结外自然杀伤/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)是一种少见的与EB病毒感染相关的恶性肿瘤,具有较强的侵袭性。目前,对于晚期或复发/难治性ENKTCL,常规推荐使用含左旋门冬酰胺酶的非蒽环类药物联合其他药物进行化学治疗,但长期生存率仍较低。近年来,造血干细胞移植、免疫治疗和靶向治疗受到了广泛关注,为ENKTCL的治疗提供了新的选择。本文就造血干细胞移植、免疫治疗和靶向治疗在ENKTCL治疗中的应用进展进行综述。

CD3^(+)和CD4^(+)与CD8^(+)T细胞亚群及自然杀伤细胞的表达对治疗结核病的临床研究

目的探讨CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群及自然杀伤细胞(NK)的表达对治疗肺结核病的临床研究。方法选取2020年6—11月萍乡市第二人民医院收治的活动性肺结核患者(结核组)、结核潜伏感染者(结核潜伏感染组)、健康对照者(健康对照组)作为研究对象,每组30例。采用流式细胞术检查3组CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NK细胞计数与百分比情况。结果结核组CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NK细胞计数水平均低于结核潜伏感染组、健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);结核潜伏感染组CD3^(+)CD4^(+)、NK细胞计数水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);健康对照组与结核潜伏感染组CD3^(+)、CD3^(+)CD8^(+)细胞计数水平比较差异无统计学意义。3组CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NK细胞百分比情况比较差异无统计学意义;结核组CD3^(+)细胞百分比水平低于健康对照组、结核潜伏感染组,差异有统计学意义(P<0.05);结核潜伏感染组CD3^(+)百分比水平与健康对照组比较差异无统计学意义。结核组复诊时CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NK细胞计数水平高于初诊时,差异有统计学意义(P<0.05);结核组复诊时CD3^(+)、NK细胞计数水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);结核组复诊时CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)与健康对照组比较差异无统计学意义;结核潜伏感染组复诊时CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、NK细胞计数水平低于初诊时,差异有统计学意义(P<0.05),CD3^(+)CD8^(+)与初诊时比较差异无统计学意义;健康对照组、结核潜伏感染组复诊时CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NK细胞计数水平比较差异无统计学意义。结核组复诊时CD3^(+)细胞百分比水平低于初诊时,差异有统计学意义(P<0.05);其他组内组间各指标两两比较差异无统计学意义。结论肺结核、肺结核潜伏期患者存在T细胞亚群及NK细胞表达异常情况,可结合各指标变化情况进行治疗指导及预后评估。

表现为食管溃疡的结外自然杀伤/T细胞淋巴瘤1例并文献复习

本文回顾性分析1例表现为食管溃疡的结外自然杀伤/T细胞淋巴瘤患者的病例资料及诊治经过,并结合相关文献进行分析讨论,以期为此类患者的诊断治疗提供参考。该例患者入院后完善胃镜提示食管多发溃疡,黏膜活检病理结果确诊为结外自然杀伤/T细胞淋巴瘤,予以培门冬酶+吉西他滨+奥沙利铂方案治疗。患者经过5个化疗疗程后再次复查胃镜未见食管溃疡,黏膜活检未见异型细胞,提示完全缓解。

结外自然杀伤/T细胞淋巴瘤鼻型的治疗研究进展

结外自然杀伤(NK)/T细胞淋巴瘤鼻型(ENKTL)是一种侵袭性恶性肿瘤,多见于亚洲和南美洲人群。EB病毒(EBV)感染与ENKTL的发病和患者预后密切相关。NK细胞淋巴瘤预后指数-EB病毒(PINK-E)模型是目前临床上较实用的ENKTL患者预后评估模型。ENKTL的治疗方案包括放疗、含L-天冬酰胺酶的非蒽环类化疗、造血干细胞移植、靶向程序性细胞死亡蛋白-1/程序性细胞死亡蛋白-1配体(PD-1/PD-L1)轴治疗,已取得显著疗效。未来,新的治疗方案包括抗EBV治疗、信号通路治疗和表观遗传学治疗等具有极大治疗潜力,有待临床试验加以验证。

稳定性自然杀伤性T细胞调节自身免疫性疾病作用机制的研究进展

研究证实，自然杀伤性T（NKT）细胞在多种自身免疫性疾病中参与免疫应答过程，但NKT细胞在调控系统调节致病性辅助T（Th）细胞方面的作用机制目前尚不完全清楚。近年来的研究发现，Th17细胞与多种自身免疫性疾病的发病有关，与以往的研究认为Th1、Th2亚群在自身免疫性疾病中起主要作用的结果有所不同，Th17亚群的作用可能比Th1更为重要。无论体外研究还是体内研究，稳定性NKT（iNKT）细胞都能抑制CD4’T细胞向Th1细胞和Th17细胞的分化，但抑制Th1细胞、Th17细胞分化的作用机制是不同的。就NKT细胞的概念、自身免疫性疾病中NKT细胞对Th1细胞、Th17细胞的调控作用的研究进展进行综述。

CD4^+稳定自然杀伤T细胞在实验性变应性鼻炎发病中的作用

目的探讨实验性变应性鼻炎发病过程中CD4+稳定自然杀伤T(CD4+iNKT)细胞的浸润情况。方法将30只C57BL/6小鼠随机分为变应性鼻炎组(A组)和健康对组照(B照)。比较两组小鼠的变应性鼻炎症状评分、鼻黏膜嗜酸性粒细胞(EOS)计数、鼻黏膜组织形态;采用免疫酶标技术检测两组小鼠鼻黏膜CD4+iNKT细胞的浸润情况;采用流式细胞技术(FCM)检测鼻腔黏膜中的CD4+iNKT细胞。运用SPSS11.5统计学软件进行分析。结果①A组小鼠症状评分为(7.3±1.0)分,较B组的(0.7±0.6)分明显增高(P<0.01)。②A组EOS计数为(7.5±1.2)个/HP,较B组的(0.4±0.5)个/HP明显增高(P<0.01)。③苏木素-伊红染色可见:A组纤毛结构大量脱落、组织水肿、小血管增生、黏膜上皮下固有层EOS及淋巴细胞浸润;B组无明显EOS浸润,纤毛结构完整。④A组鼻黏膜下有多量CD4+iNKT细胞;B组仅见少量CD4+细胞。⑤A组鼻黏膜CD4+iNKT细胞阳性率为72.6%±7.9%,明显高于B组的0.49%±0.1%(P<0.01)。结论变应性鼻炎小鼠鼻腔黏膜有大量的CD4+iNKT细胞浸润,数量远远超过CD4+T细胞。

缺氧缺血性脑病新生儿自然杀伤细胞与T细胞亚群的变化及其相关因素

目的了解缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿自然杀伤(NK)细胞及T细胞亚群的变化,观察其与各种因素的相关性。方法应用流式细胞仪测定50例HIE和20例正常新生儿血NK细胞、CD3+、CD4+、CD8+细胞及CD4+/CD8+比值。结果HIE患儿NK细胞和T细胞亚群的表达均明显低于正常新生儿(P均<0.05);中、重度HIE患儿NK细胞和CD3+、CD4+细胞及CD4+/CD8+比值明显均低于轻度HIE(P均<0.05),而不同分度HIE的CD8+细胞则无统计学差异(P均>0.05);NK细胞、CD3+、CD4+及CD4+/CD8+与HIE病情分度均呈负相关(P均<0.05)。NK细胞表达与胎龄呈正相关;CD3+细胞与羊水污染呈负相关(P<0.05);CD4+细胞与羊水污染呈负相关,与出生体质量和Apgar评分呈正相关(P<0.05);CD4+/CD8+比值与分娩方式存在线性相关(P<0.05)。结论缺氧缺血可导致HIE患儿NK细胞活性抑制及T淋巴细胞亚群紊乱,某些因素对细胞免疫功能有一定影响。

原发性肝细胞癌患者外周血T细胞亚群、自然杀伤细胞、抗体依赖细胞毒效应改变及其临床意义

作者应用单克隆抗体荧光标记流式细胞仪分析系统、微量脱氢酶释放法对121例原发性肝细胞癌(HCC)病人外周血T细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)、抗体依赖细胞毒(ADCC)活性、淋巴细胞转化率和花环形成率进行了测定,HCC病人T细胞亚群有明显变化,Th细胞减少和Ts细胞增加NK、ADCC活性和淋转率有程度不同降低。宿主免疫功能变化同病期、肿瘤扩散转移密切相关。Th/Ts比值变化能够敏感反映病人免疫功能状态,是临床观测免疫功能变化的敏感指标。

湿疹患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞的检测及意义

笔者运用流式细胞仪对30例湿疹患者进行了外周血T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞测定,旨在探讨湿疹患者细胞免疫功能状态的改变,现报告如下.

牡蛎多糖对力竭运动小鼠血免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞、自然杀伤T淋巴细胞的影响

中小强度训练可以提高机体的免疫功能,长期大强度训练,特别是过度训练导致机体的免疫功能受到抑制.所以,常有运动员在高强度训练或者竞技比赛后,身体抵抗力下降,且容易受到病毒的感染,严重影响其身体健康,甚至停训停赛.因此,寻找大强度训练后的运动员身体的恢复方法,成为当今运动免疫学研究的重要课题.牡蛎是一种药用价值极高的海洋贝壳类动物,其肉中富含多糖、氨基酸、蛋白等多种活性物质,有关牡蛎粗提物研究认为,牡蛎具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗氧化、提高心血管功能等作用,且对人体和动物无任何毒副作用.然而,有关牡蛎多糖的研究相对较少,本研究拟通过建立小鼠力竭游泳运动损伤模型,观察牡蛎多糖对力竭训练小鼠血免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞、自然杀伤T淋巴细胞的影响,为牡蛎多糖应用于运动免疫领域提供实验依据.

自然杀伤T细胞与子宫内膜异位症分期的关系

目的探讨自然杀伤T细胞（NKT）在子宫内膜异位症（EMT）发病机制的作用及其与分期的关系。方法I～Ⅳ期EMT患者各15例，采用流式细胞术检测其外周血及腹腔积液内NKT含量，用ELISA法检查细胞因子IFN-γ及IL-4的含量，并选取同龄段的20例健康志愿者作为对照。结果与对照组比较，I～Ⅳ期EMT患者外周血NKT、IFN-γ及IL-4均明显降低，且外周血及腹腔积液内以上三者的含量均呈现Ⅰ〉Ⅱ〉Ⅲ〉Ⅳ的关系，两组间的含量存在统计学差异（P〈0．05）。Spearman相关性分析显示，NKT、IFN-γ，及IL-4当中任意一个因素均与I、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ的任意一期呈显著负相关性（r均大于0．06，P均小于0．05）。结论NKT及其细胞因子IFN—γ及1L-4在EMT发病机制当中具有重要作用，并且与EMT的分期密切相关，可能是该病的一组保护性因素。

人外周血自然杀伤T细胞体外扩增及其功能的初步研究

为了建立人自然杀伤T(NKT)细胞在体外扩增的方法并对其功能进行初步的研究,通过不同的方法从人外周血单个核细胞(MNC)和纯化T淋巴细胞中扩增TCRVα24+/Vβ11+NKT细胞,并采用流式细胞术测定NKT细胞中IL-4、IFN-γ、TNF-α分泌水平。采用CD4/CD8免疫磁珠去除CD4+和CD8+细胞进一步纯化NKT细胞,并用DIOC18染色及流式细胞术测定NKT细胞杀伤活性。α半乳糖神经酰胺(α-Galcer)和IL-2可以使NKT细胞在体外扩增。扩增19d后,TCRVα24+/Vβ11+细胞比率最高上升到25.5%±7.2%,NKT细胞最大扩增倍数达到(1.51±0.91)×104倍。体外扩增的NKT细胞高表达TCRVα24、Vβ11、CD3、CD161,低表达CD56。在CD3单克隆抗体和IL-2刺激下,TCRVβ11+细胞分泌IL-4和IFN-γ的细胞比例均高于TCRVβ11-细胞(P<0.05)。去除CD4+和CD8+细胞后NKT细胞含量上升到80%。NKT细胞对肿瘤细胞株U937和HL60以及树突状细胞具有较强的细胞毒效应。NKT细胞可以通过α-Galcer直接从人外周血MNC扩增获得,从而简化实验步骤。

肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞数目的变化及其临床意义

目的研究肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤(NK)细胞数目的变化及其临床意义。方法采用流式细胞仪测定了52例不同类型肿瘤的患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞数目,与健康对照组相比较,同时测定88例肿瘤患者分为早、中期肿瘤患者与晚期肿瘤患者进行比较。结果与健康对照组相比,肺肿瘤患者CD3+T淋巴细胞、CD4+Th淋巴细胞、CD4+/CD8+(Th/Ts)均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);CD8+(Ts)显著增多,差异有统计学意义(P<0.05)。胃肿瘤患者NK细胞数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺肿瘤免疫功能差异无统计学意义(P>0.05)。晚期肿瘤患者与早、中期肿瘤患者相较,CD3+T淋巴细胞、CD4+Th淋巴细胞、CD4+/CD8+(Th/Ts)均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺肿瘤患者细胞免疫功能低下,乳腺肿瘤的免疫功能没什么改变,胃肿瘤患者的抗肿瘤免疫力下降;肿瘤患者的机体免疫功能随肿瘤病情的发展逐渐下降。

年龄对人细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞中穿孔素表达的影响

目的 通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞 (PBL)中细胞毒效应分子穿孔素 (PFP)的表达水平的变化 ,了解细胞毒性T细胞 (CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制。方法 利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD5 6单克隆抗体 (mAb) ,采用单标记免疫组化染色法 ,检测外周血单个核细胞 (PBMC)中PFP的表达。采用双标记免疫组化染色法 ,检测上述细胞表面标志CD3或CD5 6的表达和细胞内PFP的表达。结果 儿童组、成人组及老年组PBL中表达PFP阳性细胞的百分率 (% ) ,分别为 (2 6 .4± 2 .7) % ,(2 1.6± 3.2 ) %和 (13.4± 2 .0 ) % ,老年组明显下降 ,与其他两组相比较P <0 .0 0 1。 3个年龄组CD3+ T细胞表达PFP的阳性率 (% ) ,分别为 (30 .1± 4 .8) %、(2 1.4± 7.3) %和 (18.8± 4 .2 ) % ,随年龄的增长而显著下降。3个年龄组CD5 6 +NK细胞PFP的表达差别不显著。结论 健康人PBL中PFP的表达随年龄增长而递减 ,CD3+ T细胞亚群PFP表达水平的下降尤其显著。

成年人肺结核患者T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞及免疫球蛋白的检测与分析

目的 探讨老年人与青壮年人肺结核患者的免疫功能的特点 ,以指导临床治疗。 方法 93例活动性肺结核病人 ,按年龄分为青壮年组和老年组。应用流式细胞术检测 3 3例老年人肺结核、60例青壮年肺结核的T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞 ,比浊法检测其血清免疫球蛋白 ,并检测 2 0例正常人T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞作为对照组。 结果 老年人肺结核与青壮年人比 ,CD4 、CD4 CD8比值下降与CD8、CD56 上升差异均有显著性 (P <0 0 1) ,与对照组比 ,CD8与CD56 上升、CD4 CD8比值下降差异均有显著性 (P <0 0 1) ,血清IgG、IgM、IgA水平改变差异无显著性 (P>0 0 5 )。 结论 老年人肺结核细胞免疫功能低下 。

晚期血吸虫病患者外周血Vα24自然杀伤T细胞的变化及其与肝纤维化程度的关系

目的探讨晚期血吸虫病患者外周血Vα24自然杀伤T细胞(NKT)数量变化及其与肝纤维化程度的关系。方法采集32例晚期血吸虫病患者和23位健康体检者(对照组)静脉血各3 ml,采用流式细胞术检测外周血Vα24 NKT细胞的比例,采用酶循环法检测肝功能相关指标,同时行腹部B超检查。分析Vα24 NKT细胞比例与肝功能指标和肝纤维化程度的相关性。结果流式细胞术检测结果显示,晚期血吸虫病患者外周血Vα24 NKT细胞比例为(0.23±0.09)%,较健康对照组[(1.44±0.62)%]明显降低(P<0.01)。肝功能检测结果显示,晚期血吸虫病患者丙氨酸转氨酶(ALT)、谷酰转肽酶(γ-GT)和总胆红素(Tbil)分别为(44.78±33.42)U/L、(68.75±57.95)U/L和(20.16±11.20)μmol/L,较健康对照组[(18.77±14.19)U/L、(20.20±13.82)U/L和(11.65±5.09)μmol/L]明显增高(P<0.01,P<0.01,P<0.05);相关性分析结果显示,晚期血吸虫病患者NKT细胞比例与γ-GT呈正相关(r=0.365,P<0.05),而与ALT、天冬氨酸转氨酶(AST)、直接胆红素、碱性磷酸酶、白蛋白和白球比值等无明显相关性(P>0.05)。B超结果显示,肝纤维化Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级的晚期血吸虫病患者分别有5、11和16例,各级的Vα24 NKT细胞比例分别为(0.37±0.02)%、(0.28±0.04)%和(0.15±0.03)%,且各级间差异均有统计学意义(P<0.01);相关性分析结果显示,NKT细胞比例与肝纤维化程度呈负相关性(r=-0.91,P<0.01)。结论晚期血吸虫病患者外周血Vα24 NKT细胞数量明显降低,并随肝纤维化程度加重而减少。

喉罩置入全麻对乳腺癌根治术患者围术期T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞的影响

目的探讨喉罩置入全麻对乳腺癌根治术患者围术期T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞的影响。方法选取2010年1月至2012年7月于该院接受诊断和治疗的乳腺癌患者196例,随机分为观察组和对照组,每组98例。两组患者均择期行乳腺癌根治术治疗,观察组患者给予喉罩置入全麻,对照组给予气管插管麻醉。比较两组患者麻醉前、手术开始后2 h、术后第1、3天时外周血T淋巴细胞(T细胞)亚群和NK细胞数值的变化情况。结果麻醉前,两组患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和CD56+比较差异无统计学意义(P>0.05);手术开始后2 h和术后第1天,两组患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和CD56+数值与麻醉前比较均显著降低,且观察组显著优于对照组(均P<0.05);术后第3天,两组患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和CD56+数值与麻醉前比较和两组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论喉罩置入全麻对乳腺癌根治术患者围术期T淋巴细胞亚群和NK细胞的影响较小,可以显著改善免疫抑制,值得临床推广应用。

白细胞介素15和粒-单核集落刺激因子激活的自然杀伤T细胞对神经母细胞瘤细胞的杀伤作用

目的 研究白细胞介素 15 (IL 15 )和粒 单核集落刺激因子 (GM CSF)对健康儿童自然杀伤T细胞(NKT)增殖和对NKT细胞介导的神经母细胞瘤 (NB)细胞的细胞毒作用的影响。方法 采集分离健康儿童外周血T细胞 ,分别加入IL 15 ,GM CSF培养 ,MTT法检测T细胞增殖程度的变化 ,流式细胞仪检测NKT/T比例并分选出NKT细胞 ,MTT法检测NKT细胞对NB细胞毒作用。结果 IL 15刺激组、GM CSF刺激组和IL 15 +GM CSF刺激组T细胞增殖程度分别是对照组的 1.2 5倍、1.2倍和 1.4倍 (均P <0 .0 1) ;NKT/T比例分别是对照组的 2 .5 6倍、3.2 7倍和 4 .39倍 (P <0 .0 1或 0 .0 5 ) ;GM CSF组和IL 15 +GM CSF组NKT细胞毒作用高于对照组 (均P <0 .0 1) ,IL 15组NKT细胞毒作用与对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。与GM CSF组比较 ,IL 15 +GM CSF组T细胞增殖程度增高但NKT/T比例和NKT细胞毒作用差异无显著性。与IL 15组比较 ,IL 15+GM CSF组NKT/T比例和NKT细胞毒作用增高但T细胞增殖程度差异无显著性。IL 15组与GM CSF组T细胞增殖程度、NKT/T比例和细胞毒作用差异无显著性。结论 NKT细胞对NB具有细胞毒作用 ,IL 15和GM CSF联合应用可以促进健康儿童外周血NKT细胞增殖 ,增强NKT细胞对NB细胞毒作用。

同步放化疗对食管癌患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞的影响

目的:观察同步放化疗对食管癌患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞的影响。方法:选取85例食管癌患者设为食管癌组,并随机分为单纯放疗组(单放组)40例和同步放化疗组45例,另随机选取同期健康体检者40例设为对照组。单放组采用单纯放射治疗,同步放化疗组加用顺铂20mg·m-2·d-1+紫杉醇40mg·m-2·d-1。结果:食管癌组T淋巴细胞总量(T总)、辅助性T细胞(Th)、抑制性T细胞(Ts)比例及Th/Ts与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);NK细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05)。同步放化疗组治疗有效率明显高于单放组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组T总、Th比例及Th/Ts均明显升高,Ts比例明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01);NK比较,差异无统计学意义(P>0.05);组间比较,同步放化疗组T总、Th比例及Th/Ts均明显高于单放组,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:食管癌患者细胞免疫功能低下,同步放化疗较单纯放疗能明显提高其T总、Th比例及Th/Ts值,改善免疫功能。