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稳定表达人热休克蛋白22内皮细胞株的构建和鉴定
1
作者
鲍慧慧
陈琦
+1 位作者
王玲
程晓曙
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第50期9433-9436,共4页
背景:热休克蛋白22的应激表达可能对缺氧复氧内皮具有一定的保护作用。目的:建立稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。方法:EcoRⅠ/kpnⅠ双酶切鉴定真核表达重组质粒pEGFP-N1-HSP22。脂质体法以重组质粒pEGFP-N1-HSP22转染人脐静...
背景:热休克蛋白22的应激表达可能对缺氧复氧内皮具有一定的保护作用。目的:建立稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。方法:EcoRⅠ/kpnⅠ双酶切鉴定真核表达重组质粒pEGFP-N1-HSP22。脂质体法以重组质粒pEGFP-N1-HSP22转染人脐静脉内皮细胞,G418筛选,获得G418抗性单克隆细胞。用荧光显微镜、RT-PCR及Western-blot检测热休克蛋白22在人脐静脉内皮细胞中的表达。结果与结论:经双酶切电泳检测重组质粒pEGFP-N1-HSP22符合预期大小片段。稳定转染的单克隆人脐静脉内皮细胞中,荧光显微镜观察到每个细胞均有绿色荧光蛋白表达,RT-PCR和Western-blot检测到热休克蛋白22mRNA和蛋白表达。说明成功获得稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。
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关键词
热休克蛋白22
人脐静脉内皮细胞
稳定
表达
:
转
染
质粒
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职称材料
题名
稳定表达人热休克蛋白22内皮细胞株的构建和鉴定
1
作者
鲍慧慧
陈琦
王玲
程晓曙
机构
南昌大学第二附属医院心内科
出处
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第50期9433-9436,共4页
基金
国家自然基金青年科学基金资助项目(30800467)
江西省自然基金资助项目(0640089)~~
文摘
背景:热休克蛋白22的应激表达可能对缺氧复氧内皮具有一定的保护作用。目的:建立稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。方法:EcoRⅠ/kpnⅠ双酶切鉴定真核表达重组质粒pEGFP-N1-HSP22。脂质体法以重组质粒pEGFP-N1-HSP22转染人脐静脉内皮细胞,G418筛选,获得G418抗性单克隆细胞。用荧光显微镜、RT-PCR及Western-blot检测热休克蛋白22在人脐静脉内皮细胞中的表达。结果与结论:经双酶切电泳检测重组质粒pEGFP-N1-HSP22符合预期大小片段。稳定转染的单克隆人脐静脉内皮细胞中,荧光显微镜观察到每个细胞均有绿色荧光蛋白表达,RT-PCR和Western-blot检测到热休克蛋白22mRNA和蛋白表达。说明成功获得稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。
关键词
热休克蛋白22
人脐静脉内皮细胞
稳定
表达
:
转
染
质粒
分类号
R318 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
稳定表达人热休克蛋白22内皮细胞株的构建和鉴定
鲍慧慧
陈琦
王玲
程晓曙
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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