稻胚凝集素基因的克隆、序列分析及表达

以水稻基因组ＤＮＡ为模板，以特异引物经聚合酶链式反应方法扩增出稻胚凝集素基因并克隆到Ｅ．ｃｏｌｉ质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）的ＳｍａⅠ位点。序列分析表明，克隆到的基因片段大小为７８１ｂｐ，没有内含子，编码１条长２２７个氨基酸、分子量约２３ｋＤ的肽链，其中Ｎ－端２８个氨基酸是信号肽。与报道的稻胚凝集素ｃＤＮＡ序列进行顺序同源性比较，发现它们之间有很高的同源性（９９．７４％），其编码区第１６７和５６３位各有１个碱基突变，但两者均为同义突变，并未造成氨基酸序列的变化。回收插入片段克隆到表达载体ｐＲＳＥＴ－Ｃ中，在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中得到表达，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱扫描结果表明，融合蛋白表达量约占菌体总蛋白的５％。鉴于凝集素可能具有抗病虫害的能力，稻胚凝集素基因的克隆及其在原核系统中的成功表达有助于我们进一步揭示稻胚凝集素在植物防御以及其他生理活动中的功能。