基于TLR2靶点探讨脐灸对寒凝血瘀型痛经大鼠穴区启动-神经-内分泌-靶器官的调控作用

目的:观察脐灸法对寒凝血瘀型痛经大鼠扭体反应及神阙穴区、下丘脑、脊髓、子宫组织中Toll样受体2(TLR2)表达的影响,初步探索脐灸法的穴区启动-神经-内分泌-靶器官的调控作用,完善脐灸镇痛效应信号通路。方法:将50只成年雌性Wistar大鼠随机分为5组,对照组、模型组、隔药灸脐组、药物贴脐组、艾条灸脐组。除对照组外均造寒凝血瘀型痛经模型,造模后给予相应治疗;采用免疫荧光法、蛋白免疫印迹法(Western Blot)、实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测神阙穴区、下丘脑、脊髓、子宫组织中TLR2蛋白及mRNA表达。结果:①脐灸组与模型组相比痛经模型大鼠寒凝血瘀状态改善,扭体潜伏期显著延长、扭体次数和评分降低(P<0.01),脐灸法具有显著的镇痛疗效,且隔药灸脐组优于艾条灸脐组及药物贴脐组(P<0.05,P<0.01)。②脐灸组与模型组相比可上调神阙穴区TLR2蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01),其中艾条灸脐组疗效优于隔药灸脐组及药物贴脐组。③脐灸组与模型组相比可下调下丘脑、脊髓及子宫TLR2蛋白及mRNA表达(P<0.01),其中下丘脑组织中的艾条灸脐组疗效优于隔药灸脐组及药物贴脐组(P<0.05,P<0.01),子宫及脊髓组织中的隔药灸脐组疗效最优(P<0.05,P<0.01)。结论:脐灸法通过上调神阙穴区TLR2蛋白和mRNA表达以激活穴区信息启动及下调下丘脑-脊髓-子宫中TLR2蛋白及mRNA表达以抑制中枢神经系统及靶器官中肥大细胞功能进而发挥镇痛疗效。