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题名柯萨奇病毒A组2型生物化学特性及免疫原性分析
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作者
杨志辉
胡岗
吕诗韵
吴杰
申硕
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机构
武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究一室
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出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期1089-1098,共10页
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基金
湖北省技术创新专项(重大专项)(项目号:2017ACA078)
题目:手足口病双价灭活疫苗的研制。
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文摘
柯萨奇病毒A组2型(Coxsackievirus A2,CV-A2)每年引起的手足口病病例数不断增加,甚至导致死亡病例[1]。因此,急需对CV-A2的生化特性及免疫原性进行分析,顺利研制出CV-A2的手足口病疫苗。通过细菌表达结构蛋白全长或部分片段的GST融合蛋白,纯化CV-A2病毒颗粒;将纯化的病毒颗粒免疫动物后制备兔抗CVA2 VP1-VP4抗体及CV-A2病毒抗血清,通过免疫印染法(Western Blot,WB)、SDS-PAGE电泳法对CsCl密度梯度纯化的CV-A2的空心颗粒(EP)与实心颗粒(FP)的蛋白组分、纯度、多聚蛋白酶剪切进行分析。WB和间接免疫荧光法证明了抗体具有良好的特异性。EP由VP0、VP1、VP3构成,而FP的VP0被剪切,故由VP1-VP4构成。EP和FP比例为33%和67%,密度分别为.29、1.32 g/cm3,纯度分别为94.7%和97.3%。中和试验结果显示,兔抗全病毒抗体具有中和作用,而兔抗CV-A2 VP1-VP4抗体不具有中和作用。本研究建立了CV-A2纯化病毒结构蛋白的分析方法,研究了重组病毒蛋白及病毒颗粒的免疫原性及持久性,对包括CV-A2的手足口病多价疫苗研究质量控制提供数据支持。
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关键词
CV-A2
结构蛋白VP1-VP4
空心颗粒与实心颗粒
免疫原性和持久性
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Keywords
CV-A2
Structural proteins
Empty and full particles
Immunogenicity
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分类号
R373.2
[医药卫生—病原生物学]
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题名柯萨奇病毒A组4型生物化学特性及免疫原性分析
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作者
田宇璇
魏真妮
安欢欢
吴杰
申硕
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机构
武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究一室
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出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期581-590,共10页
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基金
湖北省技术创新专项(重大专项)(项目号:2017ACA078)
题目:手足口病双价灭活疫苗的研制。
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文摘
对引起手足口病的肠道病毒A组4型进行生物化学特性及免疫原性的研究。利用大肠杆菌表达结构蛋白全长或部分片段的GST融合蛋白,纯化CV-A4病毒颗粒,制备兔抗CV-A4 VP1~VP4蛋白及抗CV-A4病毒颗粒抗血清。以免疫印迹法(Western blotting,WB),结合SDS-PAGE电泳法,对CsCl密度梯度纯化的CV-A4的空心颗粒(EP)与实心颗粒(FP)的蛋白组分、纯度、多聚蛋白酶剪切进行分析。以微量中和法测定以上6种抗原免疫的兔或小鼠血清中和抗体效价,评估免疫原性。WB和间接免疫荧光法证明了抗体特异性。EP由VP0、VP1和VP3构成,而FP的VP0被剪切,故由VP1-VP4构成。EP和FP比例分别为41%和59%。CsCl密度分别为1.26 g/cm^(3)和1.34 g/cm^(3),纯度分别为70.5%和96.3%。中和试验显示,兔抗全病毒抗体具有中和作用,而兔抗CV-A4VP1~VP4结构蛋白抗体不具有中和作用。免疫原性强弱为:FP>EP>VP1-VP4。本研究建立了CV-A4纯化病毒结构蛋白的分析方法,研究了重组病毒蛋白及2种病毒颗粒的免疫原性及免疫持久性。对包括CV-A4的手足口病多价疫苗的研发策略以及质量控制具重要意义。
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关键词
柯萨奇病毒A组4型(CV-A4)
结构蛋白VP1-VP4
空心颗粒与实心颗粒
免疫原性
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Keywords
Coxsackievirus A4(CV-A4)
Structural protein VP1-VP4
Hollow particles and solid particles
Immunogenicity
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分类号
R373.2
[医药卫生—病原生物学]
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