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噬菌体展示技术筛选幽门螺杆菌空泡毒素(VacA)基因结合蛋白 被引量:1
1
作者 陈琳 王克霞 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第18期1724-1725,共2页
关键词 噬菌体展示 幽门螺杆菌 空泡毒素(vaca) 结合蛋白
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幽门螺杆菌空泡毒素VacA致病机制研究 被引量:2
2
作者 陈圣敏 《中西医结合研究》 2010年第1期41-43,共3页
关键词 幽门螺杆菌 vaca 空泡毒素 致病机制 H.PYLORI 革兰阴性杆菌 消化性溃疡 慢性胃炎
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幽门螺杆菌vacA基因及其细胞空泡毒素的研究进展 被引量:1
3
作者 孙剑刚 叶嗣颖 《咸宁学院学报(医学版)》 2010年第3期268-270,共3页
关键词 幽门螺杆菌 细胞空泡毒素 vaca基因 上消化道疾病 慢性消化性溃疡 消化系统疾病 分子流行病学 发展中国家
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幽门螺杆菌空泡细胞毒素(Vacuolating cytotoxin,VacA)研究进展
4
作者 赵雩卿 钱家鸣 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2004年第3期322-325,共4页
1988年Leunk等发现幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)肉汤培养基的上清液含有一种使多种体外培养的真核细胞系发生空泡样变性的毒素,1992年这种毒素得以纯化并被命名为空泡细胞毒素(Vacuo-1ating cytotoxin,VacA).1994年完成了... 1988年Leunk等发现幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)肉汤培养基的上清液含有一种使多种体外培养的真核细胞系发生空泡样变性的毒素,1992年这种毒素得以纯化并被命名为空泡细胞毒素(Vacuo-1ating cytotoxin,VacA).1994年完成了编码VacA的基因vacA的克隆和序列分析,由此VacA作为H.pylori致病的主要毒力因子引起了研究者的广泛兴趣和关注,本文将综述近十年有关VacA的研究进展. 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 空泡细胞毒素 真核细胞 氨基酸 菌株 空泡毒素
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幽门螺杆菌空泡毒素VacA致病机制研究
5
作者 陈圣敏 杨贵珍 《医学综述》 2009年第23期3542-3545,共4页
VacA是幽门螺杆菌分泌的一种蛋白毒素,它是幽门螺杆菌的一个重要毒力因子。可作为单一致病因子使胃上皮细胞发生多种明显的细胞病变效应。如VacA进入细胞后可启动细胞内发生广泛的rab7依赖的融合及晚期包裹小泡腔隙的渗透性肿胀,最终导... VacA是幽门螺杆菌分泌的一种蛋白毒素,它是幽门螺杆菌的一个重要毒力因子。可作为单一致病因子使胃上皮细胞发生多种明显的细胞病变效应。如VacA进入细胞后可启动细胞内发生广泛的rab7依赖的融合及晚期包裹小泡腔隙的渗透性肿胀,最终导致细胞空泡化;VacA能引起线粒体去极化,从而引起胃上皮细胞凋亡;VacA亦可影响或干扰细胞骨架各成分,引起肌动蛋白重排,致使微管结构发生紊乱。但VacA引起细胞病变和结构异常的确切机制尚未完全阐明。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素 空泡 细胞骨架 凋亡
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幽门螺杆菌及其毒力因子空泡细胞毒素A对人胃腺癌细胞DNA同源重组修复和细胞周期的影响
6
作者 莫慧 黄煌 +4 位作者 梅璐 米阳 刘斌 白利梅 于泳 《肿瘤基础与临床》 2023年第1期7-13,共7页
目的研究幽门螺杆菌(Hp)标准株Hp P12和其毒力因子空泡细胞毒素A(VacA)对人胃腺癌细胞DNA损伤、同源重组修复和细胞周期的影响。方法取对数生长期的人胃腺癌AGS细胞,应用Hp标准株(Hp P12)和其VacA基因敲除株(Hp P12ΔVacA)以感染复数(mu... 目的研究幽门螺杆菌(Hp)标准株Hp P12和其毒力因子空泡细胞毒素A(VacA)对人胃腺癌细胞DNA损伤、同源重组修复和细胞周期的影响。方法取对数生长期的人胃腺癌AGS细胞,应用Hp标准株(Hp P12)和其VacA基因敲除株(Hp P12ΔVacA)以感染复数(multiplicity of infection,MOI)100分别感染AGS细胞,使用Western Blot方法检测DNA损伤标记蛋白γH2AX、HR修复关键蛋白(Rad51、CtIP、pCtIP)、细胞周期检测点激酶2(pCHK2)的表达水平,进一步用流式细胞术检测细胞周期,验证Hp P12及其毒力因子VacA对HR修复和细胞周期的影响。结果DNA损伤标记蛋白γH2AX的表达,在Hp P12感染组较未感染组上调(6 h:t=4.870,P=0.001;12 h:t=4.118,P=0.003),在Hp P12ΔVacA感染组较Hp P12感染组下调(6 h:t=4.669,P=0.002;12 h:t=3.117,P=0.013)。Rad51、CtIP、pCtIP和pCHK2的表达在Hp P12感染12 h组较未感染组下调(Rad51:t=22.740,P<0.001;CtIP:t=31.970,P<0.001;pCtIP:t=3.777,P=0.020;pCHK2:t=10.740,P<0.001),而Rad51、pCHK2的表达在Hp P12ΔVacA感染12 h组均较Hp P12感染12 h组上调(Rad51:t=5.637,P=0.005;pCHK2:t=3.726,P=0.006)CtIP的表达在Hp P12ΔVacA感染6 h组较Hp P12感染6 h组上调(t=4.580,P=0.002)。进一步采用流式细胞术检测细胞周期发现Hp P12感染组G 1期细胞数较未感染组下调(t=11.530,P<0.001),S期细胞数上调(t=8.583,P=0.001)。而Hp P12ΔVacA感染组G 1期细胞数较Hp P12感染组上调(t=5.781,P=0.004),S期细胞数下调(t=5.481,P=0.005)。结论Hp P12标准株感染人胃腺癌细胞后引起DNA损伤,抑制了细胞HR修复,并引起细胞周期阻滞,其中VacA毒力因子起到了重要作用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 同源重组修复 胃腺癌 空泡细胞毒素A
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幽门螺杆菌vacA基因及其细胞空泡毒素的研究进展 被引量:8
7
作者 梁怀盼 《山西医药杂志》 CAS 2015年第20期2386-2388,共3页
幽门螺杆菌(H.pylori,HP)是引起人类上消化道疾病的主要致病菌。近20多年来,随着分子流行病学、分子免疫学、分子生物学等相关学科的建立及相关技术的出现,人们对H.pylori毒力的研究也越来越深入,现已发现H.pylori有许多致病因子,如... 幽门螺杆菌(H.pylori,HP)是引起人类上消化道疾病的主要致病菌。近20多年来,随着分子流行病学、分子免疫学、分子生物学等相关学科的建立及相关技术的出现,人们对H.pylori毒力的研究也越来越深入,现已发现H.pylori有许多致病因子,如细胞空泡毒素(vacuolating cytotoxin A,VacA)、细胞毒素相关蛋白(CagA)、热休克蛋白、尿素酶等。 展开更多
关键词 细胞空泡毒素 幽门螺杆菌 vaca基因 H.PYLORI 细胞毒素相关蛋白 上消化道疾病 分子流行病学 分子免疫学
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细胞内空泡毒素(VacA)可有效预测幽门螺杆菌可否引起与胃癌发生相关的进展性萎缩性胃炎
8
作者 Karita M Teramukai S +2 位作者 Matsumoto S Shibuta H 朱国栋 《世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册)》 2005年第8期7-8,共2页
VacA was histochemically stained in biopsy specimen and was intracellularly an d mainly located in fundic gland area. It is recognized gastric atrophy was obse rved in the H. pylori-positive patients with intracellula... VacA was histochemically stained in biopsy specimen and was intracellularly an d mainly located in fundic gland area. It is recognized gastric atrophy was obse rved in the H. pylori-positive patients with intracellular VacA compared with o thers.The aim of study is to understand the relationship between intracellular V acA and the progression of gastric atrophy that is associated with gastric cance r. Biopsy specimens and sera were obtained from 364 people in their 50s and 60s without gastric cancer diagnosed at first endoscopy undergoing diagnostic endosc opy, for H. pylori infection, histology, and the histochemical status of intrace llular VacA using anti-VacA Ab during the follow-up period (mean, 7.3 years). Three hundred eleven of 364 enrolled patients were H. pylori positive and 53 pat ients were H. pylori negative at first endoscopy. VacA was intracellularly stain ed with vacuolation and cell de struction in the fundic gland in 98 of 311 H. pylori-positive patients and no t stained in another 213 H. pylori-positive patients plus 53 H.pylori-negative patients at first endoscopy. Gastric atrophy has significantly progressed in th e H. pylori-positive patints with intracellular VacA with gastric ulcers compar ed with the others and six gastric cancers have developed in this group during t he follow-up period (mean, 7.3 years). Intracellular VacA is a valuable marker to predict whether Helicobacter pylori induces progressive atrophic gastritis th at is associated with the development of gastric cancer. 展开更多
关键词 萎缩性胃炎 空泡毒素 幽门螺杆菌阳性 vaca 胃黏膜萎缩 胃溃疡患者 胃底腺 内镜活检 活检标本 阴性患者
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硒对幽门螺杆菌空泡毒素及其重组影响 被引量:4
9
作者 段秀杰 王文凯 +1 位作者 邵世和 刘继斌 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期833-835,共3页
目的研究硒(Se)对幽门螺杆菌(Hp)空泡毒素(VacA)及重组VacA的影响。方法采用盐析、透析、柱层析、浓缩、抽滤等方法提纯幽门螺杆菌分泌的空泡毒素。通过琼脂糖凝胶电泳、基因序列分析鉴定重组载体,重组VacA产物经Ni-TEDTM蛋白纯化系统纯... 目的研究硒(Se)对幽门螺杆菌(Hp)空泡毒素(VacA)及重组VacA的影响。方法采用盐析、透析、柱层析、浓缩、抽滤等方法提纯幽门螺杆菌分泌的空泡毒素。通过琼脂糖凝胶电泳、基因序列分析鉴定重组载体,重组VacA产物经Ni-TEDTM蛋白纯化系统纯化,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、及免疫印迹(Western blot)鉴定,间接酶联免疫吸附(ELISA)法检测其抗原特异性。进行细胞培养、细胞爬片;采用分光光度计、倒置显微镜、透射电镜及流式细胞仪等方法检测硒对幽门螺杆菌分泌的VacA及重组毒素蛋白功能的影响。结果12 mmol/L硒即可使幽门螺杆菌形态发生球形变,鞭毛及菌毛出现脱落,溶血作用减弱,硒对VacA空泡毒作用无直接影响(P>0.05);硒通过抑制Hp生长减少VacA产生量从而使空泡毒作用减弱;通过抑制表达VacA的大肠埃希菌生长,减少重组VacA表达量;能增强重组VacA对人胃上皮癌细胞株(SGC-7901)生长抑制作用,使细胞分裂指数、集落形成率、S期细胞数量降低,G1期细胞总数增加;使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素,并随硒浓度增加颜色加深。结论硒能抑制Hp生长,改变Hp的形态及结构;可使重组VacA表达量减少;能增强重组VacA对SGC-7901细胞的生长抑制及诱导细胞凋亡作用;可使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素;不能直接抑制VacA的空泡毒作用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌(Hp) 空泡毒素(vaca) 重组空泡毒素 提纯
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幽门螺杆菌空泡毒素对人牙周膜成纤维细胞的增殖和凋亡的影响 被引量:6
10
作者 马玲 许丹 任吉芳 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2016年第5期272-276,共5页
目的:观察幽门螺杆菌空泡毒素(HP Vac A)对人牙周膜成纤维细胞(h PDLFs)增殖和凋亡的影响。方法:人牙周膜成纤维细胞株(h PDLFs100),分别与不同浓度的HP Vac A(0.1、0.2、0.3 mg/m L)共培养,CCK-8方法检测细胞的增殖情况;倒置显微镜观... 目的:观察幽门螺杆菌空泡毒素(HP Vac A)对人牙周膜成纤维细胞(h PDLFs)增殖和凋亡的影响。方法:人牙周膜成纤维细胞株(h PDLFs100),分别与不同浓度的HP Vac A(0.1、0.2、0.3 mg/m L)共培养,CCK-8方法检测细胞的增殖情况;倒置显微镜观察细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;透射电镜观察细胞超微结构的改变。结果:随着HP Vac A浓度的增大和培养时间的延长,h PDLFs的增殖明显受到抑制;贴壁的PDLFs数量递减,细胞由长梭形逐渐变为圆形,折光性不断减弱,悬浮细胞和凋亡细胞增多;胞浆内大量空泡形成,细胞染色体聚集于核膜,呈块状、浓集和边缘化,表现出典型的凋亡特征。结论:HP Vac A对PDLFs有明显的细胞毒作用,能抑制细胞增殖,并引起细胞凋亡。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌(HP) 空泡毒素(vaca) 人牙周膜成纤维细胞(hDPLFs) 细胞凋亡
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幽门螺杆菌空泡细胞毒素与细胞毒素相关蛋白 被引量:7
11
作者 郭飞 胡伏莲 贾博琦 《胃肠病学》 1997年第2期113-116,共4页
研究证明幽门螺杆菌(Hp)是人类慢性B型胃炎的主要致病因素,与消化性溃疡密切相关,近年的研究提示Hp与胃癌的发生也有密切关系。关于Hp的致病机理还不是很清楚,现有的资料表明Hp分泌的毒素与其致病性有较密切的关系。本文就这一方面的研... 研究证明幽门螺杆菌(Hp)是人类慢性B型胃炎的主要致病因素,与消化性溃疡密切相关,近年的研究提示Hp与胃癌的发生也有密切关系。关于Hp的致病机理还不是很清楚,现有的资料表明Hp分泌的毒素与其致病性有较密切的关系。本文就这一方面的研究作一简要综述。 1988年。 展开更多
关键词 空泡细胞毒素 CAGA蛋白 vaca基因 细胞毒素相关蛋白 CAGA基因 vaca 幽门螺杆菌 菌株 产毒 致病机理
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幽门螺杆菌细胞空泡毒素基因毒性片段的克隆与表达 被引量:12
12
作者 刘淼 杨致邦 +1 位作者 林珊珊 吴利先 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第6期720-723,共4页
目的 :通过基因于程技术获得具有良好抗原性的重组细胞空泡毒素毒性亚单位蛋白。方法 :利用PCR从幽门螺杆菌 (Hp)空泡毒素基因中扩增毒性片段V ,克隆及序列分析后在大肠杆菌中高效表达 ,用免疫印迹法 (Westernblotting)检测其抗原性。结... 目的 :通过基因于程技术获得具有良好抗原性的重组细胞空泡毒素毒性亚单位蛋白。方法 :利用PCR从幽门螺杆菌 (Hp)空泡毒素基因中扩增毒性片段V ,克隆及序列分析后在大肠杆菌中高效表达 ,用免疫印迹法 (Westernblotting)检测其抗原性。结果 :序列分析所得片段完整 ,与标准株AF36 170 0比较有 1.5 %的bp及一个氨基酸发生变异。与文献报道的中国菌株相比有高度的同源性。SDS -PAGE显示表达产物相对分子量为 2 70 0 0 ,表达量为 30 %以上 ,Westernblotting显示该蛋白可被HP全菌抗血清所识别。结论 :基因重组Hp细胞空泡毒素毒性蛋白具有良好的抗原性 ,可用于制备Hp感染的诊断试剂与疫苗。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素 基因克隆 表达
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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白、空泡毒素基因与儿童胃十二指肠疾病的关系 被引量:8
13
作者 胡伟国 黄开宇 +7 位作者 朱欢 徐辉 徐彰 黄爱芬 程芹芹 陶洪群 谢小志 杨锦红 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期884-886,共3页
目的 探讨幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白 (cagA)、空泡毒素 (vacA)与儿童胃十二指肠疾病类型及胃黏膜炎症程度的关系。方法 采用免疫印迹法测定 88例Hp相关性慢性胃炎 (CG)、4 6例Hp相关性消化性溃疡 (PU)患儿血清cagA、vacA抗体 ... 目的 探讨幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白 (cagA)、空泡毒素 (vacA)与儿童胃十二指肠疾病类型及胃黏膜炎症程度的关系。方法 采用免疫印迹法测定 88例Hp相关性慢性胃炎 (CG)、4 6例Hp相关性消化性溃疡 (PU)患儿血清cagA、vacA抗体 ,并观察胃黏膜病理变化。 结果  1.CagA、vacA抗体总检出率分别为 85 .0 7%、91.0 4 % ,cagA抗体在CG与PU中检出率分别为 84 .0 9%与 86 .96 % ,两组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;vacA抗体在CG与PU中检出率分别为 89.77%与 93.4 8% ,两组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 2 .134例Hp感染患儿cagA、vacA抗体均阳性 (Ⅰ型菌 ) 113例 ,cagA、vacA抗体均阴性 (Ⅱ型菌 ) 11例 ,cagA、vacA抗体仅一项阳性 (中间型 ) 10例 ,各型菌株在CG、PU中的检出率无明显差异 (P均 >0 .0 5 )。 3.113例Hp Ⅰ型菌株感染引起胃黏膜中重度炎症占 88.5 0 % ,而Ⅱ型菌株、中间型菌株感染引起胃黏膜中重度炎症分别为 4 5 .4 5 %及 5 0 .0 0 % ,两组有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 CagA、vacA与CG、PU发病均有关 ,不能作为区分Hp感染致不同胃十二指肠疾病的特异性指标。本地区儿童感染的Hp主要为cagA和vacA阳性的Ⅰ型菌株 。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白 空泡毒素 抗体 胃炎 慢性 溃疡 消化性
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黄芪含药血清对幽门螺杆菌空泡毒素活性的影响 被引量:16
14
作者 王平 田维毅 +4 位作者 王文佳 韩洁 何光志 蔡琨 俞琦 《西部中医药》 2011年第7期17-19,共3页
目的:观察黄芪含药血清能否有效抑制体外幽门螺杆菌(hel i cobact er pyl ori,Hp)空泡毒素(VacA)的活性,从而探讨其抗菌机制。方法:将HP菌株培养上清液制成粗制VacA蛋白,经倍比稀释后(1∶32~1∶1),选择1∶2滴度与不同浓度黄芪含药血清... 目的:观察黄芪含药血清能否有效抑制体外幽门螺杆菌(hel i cobact er pyl ori,Hp)空泡毒素(VacA)的活性,从而探讨其抗菌机制。方法:将HP菌株培养上清液制成粗制VacA蛋白,经倍比稀释后(1∶32~1∶1),选择1∶2滴度与不同浓度黄芪含药血清共同作用于胃癌SGC-7901细胞,观察胃癌细胞形态变化,采用中性红摄入法(NRU)评价空泡活性。结果:黄芪含药血清对VacA活性有显著抑制作用,含药血清小剂量组NRU检测其空泡活性A550=0.228±0.029,显微镜下计数空泡形成率为78.75%±8.539%,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05),随血清含药浓度的增加A550和空泡形成率逐渐降低;含药血清大剂量组A550=0.127±0.047,空泡形成率为32.25%±10.21%,与阴性对照组比较差异有极显著性(P<0.01),与阳性对照奥美拉唑组比较差异无显著性(P>0.05);含药血清大剂量组与中剂量组A550比较,差异无显著性(P>0.05),与小剂量组比较差异有显著性(P<0.05),可见黄芪含药血清对空泡毒素的抑制作用具有浓度依赖性。结论:黄芪对HP VacA活性具有明显的抑制作用,且该抑制作用具有一定的浓度依赖性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 黄芪 含药血清 空泡毒素
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幽门螺杆菌VacA真核表达载体的构建及其诱导细胞空泡化和凋亡 被引量:4
15
作者 袁建平 赵蔚 +3 位作者 杨贵珍 胡宝瑜 童善庆 郭晓奎 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期66-68,共3页
目的 :研究幽门螺杆菌空泡毒素作为单一毒力决定簇对真核细胞的作用。方法 :用 PCR扩增vac A基因片段 ,克隆入真核表达载体 p EGFP- N 1,构建重组质粒 p EGFP- vac A,转染 He L a细胞 ,通过相差显微镜和电子显微镜观察细胞形态与结构的... 目的 :研究幽门螺杆菌空泡毒素作为单一毒力决定簇对真核细胞的作用。方法 :用 PCR扩增vac A基因片段 ,克隆入真核表达载体 p EGFP- N 1,构建重组质粒 p EGFP- vac A,转染 He L a细胞 ,通过相差显微镜和电子显微镜观察细胞形态与结构的变化。结果 :重组质粒转染 He L a细胞 2 4 h,10 %~ 2 0 %细胞的胞质内出现明显空泡 ,其中少数细胞发生凋亡改变。结论 :成功构建了用于真核表达的重组 vac A质粒 ,转染真核细胞后 ,观察 Vac A作用导致的细胞形态结构的变化 ,为研究 Vac 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素 单一毒力决定簇 真核表达载体 细胞空泡 细胞凋亡
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幽门螺杆菌空泡毒素活性的体外观察 被引量:3
16
作者 杜奕奇 李兆申 +2 位作者 苏暾 屠振兴 龚燕芳 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期858-861,F0002,共5页
目的研究幽门螺杆菌(Hp)液体浓缩上清液对胃上皮细胞的空泡毒性作用,为进一步开展空泡变性细胞毒素(VacA)的纯化及探讨VacA的致病机制奠定基础。方法将Hp菌株液体培养上清液制成粗制VacA蛋白,粗制VacA经倍比稀释(1∶160~1∶2)后与胃癌S... 目的研究幽门螺杆菌(Hp)液体浓缩上清液对胃上皮细胞的空泡毒性作用,为进一步开展空泡变性细胞毒素(VacA)的纯化及探讨VacA的致病机制奠定基础。方法将Hp菌株液体培养上清液制成粗制VacA蛋白,粗制VacA经倍比稀释(1∶160~1∶2)后与胃癌SGC7901细胞共同孵育后观察胃癌细胞形态变化,同时观察1∶2及1∶5滴度组于0、2、4、8、16和24h时的空泡活性。采用中性红摄入法(NRU)评价空泡活性。结果1∶2及1∶5滴度组胃癌细胞于24h时空泡形成细胞达100%,空泡细胞比例随毒素滴度递减。孵育24h时粗制VacA产生空泡活性的最小剂量约为6μg,超过120μg可导致细胞死亡。当毒素滴度为1∶2时,孵育4h即产生明显空泡[550nm光吸收值(A550)=0.43±0.06],至16h达最高吸收值(A550=0.71±0.03),至24h时因细胞大量死亡,A550反而下降至0.06±0.04,与空白对照组的差异无显著性(P>0.05)。1∶5毒素滴度的时间曲线较1∶2滴度更恰当反映出空泡活性随孵育时间变化的特性。结论Hp液体培养上清浓缩液对胃癌细胞具有明显的空泡毒性作用,VacA导致的空泡毒性具有明显的浓度及时间依赖性,且易受多种因素的影响,适当的浓度及孵育时间是VacA致病机制研究过程中的关键因素。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素 中性红摄入
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氢溴酸槟榔碱对幽门螺杆菌生长和空泡毒素A表达和活性的影响 被引量:6
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作者 刘丹 廖顺花 +1 位作者 王莉新 王易 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1163-1167,共5页
目的评价氢溴酸槟榔碱对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)的抑制作用及其对H.pylori空泡毒素A表达水平和活性的影响。方法使用平皿稀释固体法和脑心浸液液体法测定中药活性成分氢溴酸槟榔碱对H.pylori的最低抑菌浓度(MIC),以反... 目的评价氢溴酸槟榔碱对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)的抑制作用及其对H.pylori空泡毒素A表达水平和活性的影响。方法使用平皿稀释固体法和脑心浸液液体法测定中药活性成分氢溴酸槟榔碱对H.pylori的最低抑菌浓度(MIC),以反映药物对H.pylori的抑制作用。通过中性红摄入法评价药物干预后H.pylori培养上清中空泡毒素A对胃癌细胞BGC-823的毒性作用,并通过RT-PCR方法和Western blot方法检测经药物处理后H.pylori菌体及分泌上清中空泡毒素A mRNA和蛋白的表达水平,以反映药物对H.pylori空泡毒素A活性和表达的影响。结果高浓度氢溴酸槟榔碱对H.pylori具有抑制作用,MIC为:固体法和液体法均为1.25 g·L-1。低浓度氢溴酸槟榔碱可不同程度抑制H.pylori空泡毒素A的活性(P<0.01);抑制H.pylori菌体和分泌上清中空泡毒素A mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.05)的表达。结论氢溴酸槟榔碱在较高浓度(1.25 g·L-1)时具有抑制H.pylori生长作用,而在较低浓度(0.15 g·L-1)时,即可抑制H.pylori空泡毒素A的表达和活性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素A 氢溴酸槟榔碱 中性红摄入实验 慢性活动性胃炎 消化性溃疡
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幽门螺杆菌VacA N端真核表达载体的构建、鉴定及其诱导巨噬细胞空泡化和凋亡的观察 被引量:2
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作者 黎村艳 张艳 +2 位作者 刘志杰 余敏君 于文 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期352-355,共4页
目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)空泡毒素(Vacuolating cytotoxin,VacA)基因的真核表达载体pDsRed-Monomer-C1/vacA,并在THP-1巨噬细胞中表达,为研究VacA单一毒力决定簇的致病性奠定实验基础。方法用Primer 5.0软件设计引物... 目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)空泡毒素(Vacuolating cytotoxin,VacA)基因的真核表达载体pDsRed-Monomer-C1/vacA,并在THP-1巨噬细胞中表达,为研究VacA单一毒力决定簇的致病性奠定实验基础。方法用Primer 5.0软件设计引物,以HP基因组为模板,PCR扩增vacA目的基因片段,克隆入真核表达载体pDsRed-Monomer-C1中,经酶切、PCR鉴定及测序鉴定后,转染THP-1巨噬细胞中,荧光显微镜和Western-blot检测VacA蛋白在细胞中的表达;电镜观察巨噬细胞(MΦ)的空泡样变和凋亡;流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果PCR扩增得到了大小约为1 428bp的目的片段,双酶切及测序鉴定证明成功构建了HP真核表达重组载体;转染后24h,重组质粒组部分细胞中有聚集的荧光颗粒,部分细胞发生空泡样变和凋亡改变;细胞凋亡率明显高于空质粒组和阴性对照组(P<0.001),细胞核因子-κB(nuclear factorkappaB,NF-κB)的抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)抑制细胞的凋亡。结论VacA蛋白瞬时高表达促进THP-1巨噬细胞空泡样变和凋亡。NF-κB可能参与调节VacA诱导的巨噬细胞凋亡。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素 巨噬细胞 凋亡
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奥美拉唑对胃癌上皮细胞株、幽门螺杆菌及空泡毒素作用的体外试验 被引量:2
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作者 屠振兴 龚燕芳 +4 位作者 杜奕奇 丁华 满晓华 李兆申 许国铭 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期649-652,共4页
目的 :通过奥美拉唑对胃癌上皮细胞、幽门螺杆菌 (Hp)菌株生长及空泡毒素 (VacA)毒性的影响 ,探讨其临床应用价值。方法 :应用不同浓度奥美拉唑和细胞、细菌及VacA共孵育方法观察细胞、细菌的生长状况及空泡毒性的变化。结果 :(1)当奥... 目的 :通过奥美拉唑对胃癌上皮细胞、幽门螺杆菌 (Hp)菌株生长及空泡毒素 (VacA)毒性的影响 ,探讨其临床应用价值。方法 :应用不同浓度奥美拉唑和细胞、细菌及VacA共孵育方法观察细胞、细菌的生长状况及空泡毒性的变化。结果 :(1)当奥美拉唑浓度 >10 0mg·L- 1时 ,细胞 10 0 %死亡 ;低于4 0mg·L- 1时 ,光镜下未见上皮细胞的形态学改变。(2 )当奥美拉唑≥ 10 0mg·L- 1时 ,细菌生长完全被抑制 ;低于 30mg·L- 1,细菌的生长不受影响。 (3)低浓度奥美拉唑 (10~ 4 0mg·L- 1)能部分抑制Va cA毒素对SGC 790 1的空泡作用 ,但不抑制毒素对HeLa细胞的空泡毒性作用。结论 :抑制Hp生长所需的奥美拉唑浓度对胃上皮细胞也有损伤作用 ,对空泡毒素无显著的抑制作用 ,临床上只能应用低剂量奥美拉唑 ,通过抑制胃酸分泌治疗酸相关疾病 。 展开更多
关键词 奥美拉唑 胃癌 上皮细胞株 幽门螺杆菌 空泡毒素 体外试验
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幽门螺杆菌致病机制及其空泡毒素研究进展 被引量:2
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作者 施理 侯晓华 +1 位作者 易粹琼 张锦坤 《中国内镜杂志》 CSCD 1998年第2期21-24,共4页
关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素 致病机制
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